胡 穎，梁 濤，張 駿

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，貴州 遵義563000)

細(xì)胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42，CDC42)是Rho家族的小GTP酶，Rho家族的GTP酶屬于低分子量的RAS超家族鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白。Rho家族的小GTP酶在轉(zhuǎn)錄激活、肌動蛋白細(xì)胞骨架的重組和細(xì)胞形態(tài)過程中發(fā)揮重要作用[1]。CDC42分子量為25 000，其基因定位于1p36.1[2]，F(xiàn)arhan和Hsu[3]發(fā)現(xiàn)CDC42表達(dá)于不同的亞細(xì)胞膜區(qū)室中，包括細(xì)胞膜、高爾基復(fù)合體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),絕大多數(shù)研究集中于CDC42在細(xì)胞膜上的作用。其中細(xì)胞膜上的CDC42在細(xì)胞極性和肌動蛋白細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，CDC42活性受損會引起細(xì)胞的黏附、遷移減少，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)異常和細(xì)胞凋亡[4]。CDC42在調(diào)節(jié)神經(jīng)元中的突觸小泡運(yùn)輸和肌動蛋白動力學(xué)中起關(guān)鍵作用[5]，CDC42使細(xì)胞骨架-肌動蛋白解聚，誘導(dǎo)偽裝絲足的快速形成，減少樹突棘的密度和體積[6]，樹突棘的調(diào)節(jié)是突觸功能和可塑性的關(guān)鍵組成部分，而樹突棘失調(diào)與幾種精神病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病有關(guān)[7]，所以CDC42可能在一些常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制中起作用。近年來，針對CDC4的研究逐漸增多，CDC42的活性改變可能參與了某些神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病，現(xiàn)對CDC42在精神分裂癥、阿爾茨海默病(Alzheimer′s disease，AD)、癲癇、腦卒中等常見神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的表達(dá)變化及CDC42在這些神經(jīng)系統(tǒng)疾病中作為潛在治療靶點的可能性進(jìn)行綜述。

1 CDC42概述

CDC42是一種小GTP酶，小GTP酶參與大多數(shù)神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)育過程，包括神經(jīng)發(fā)生、遷移、軸突生長和突觸可塑性[8]。小GTP酶通常作為分子開關(guān)，在活性(與GTP結(jié)合)和非活性(與GDP結(jié)合)狀態(tài)之間循環(huán)，從而將上游信號傳遞到下游效應(yīng)器[3]。在此循環(huán)過程中需要以下3種必不可少的調(diào)節(jié)因子:①鳥嘌呤核苷酸交換因子，催化GTP向GDP進(jìn)行轉(zhuǎn)換，使GTP酶與GTP結(jié)合后分子結(jié)構(gòu)發(fā)生構(gòu)象改變，隨后與下游底物進(jìn)行信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。②GTP酶活化蛋白(GTPase activating proteins,GAPs)，促進(jìn)GTP酶分子內(nèi)部的GTP水解，使GTP酶失活而關(guān)閉信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。③GDP解離抑制因子(guanine nucleotide dissociation inhibitors,GDIs)，抑制GDP從GTP酶上解離[9]。多種鳥嘌呤核苷酸交換因子和GAPs的存在是為了確保信號通路的特異性和微調(diào)調(diào)節(jié)的精確性[10]。Rho GTP酶及其相關(guān)分子控制著神經(jīng)元的遷移、神經(jīng)突的伸長和分支以及突觸形成等發(fā)育過程[1]，它們參與了幾乎所有細(xì)胞調(diào)節(jié)的過程，因此在細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中扮演重要角色[3]。Rho家族GTP酶含有一個分子量低于200的氨基酸殘基的Dbl同源結(jié)構(gòu)域和相鄰的C端，以及120氨基酸殘基的pleckstrin同源結(jié)構(gòu)域。Rho GTP酶的Dbl同源結(jié)構(gòu)域促進(jìn)與GEFs的反應(yīng)以及之后的GTP向GDP轉(zhuǎn)換的過程，然而pleckstrin同源結(jié)構(gòu)域通過結(jié)合磷酸肌醇將Rho GTP酶定位在細(xì)胞膜上[11]。作為小GTP酶，CDC42在其無活性狀態(tài)下與GDP結(jié)合，并通過與GDI結(jié)合在胞質(zhì)中保持可溶狀態(tài)，CDC42在與GEF相互作用時被激活，在與GTP結(jié)合的活性狀態(tài)中，CDC42與效應(yīng)器結(jié)合以促進(jìn)其生物學(xué)功能[3]。

2 CDC42與精神分裂癥

精神分裂癥是一組病因未明的精神疾病，多發(fā)生于青壯年，臨床表現(xiàn)為感知、思維、情感、行為等多方面的障礙以及精神活動的不協(xié)調(diào)。Ramos-Miguel等[12]發(fā)現(xiàn)選擇性地減少額葉和顳葉的棘密度與精神分裂癥相關(guān)。盡管在大腦發(fā)育期間建立了大量的突觸連接，但在青春期和成年期，樹突棘的數(shù)量和形態(tài)仍持續(xù)變化，樹突棘形態(tài)的動態(tài)變化與復(fù)雜的信號級聯(lián)網(wǎng)絡(luò)對激動蛋白細(xì)胞骨架的快速重組相關(guān)，其中一些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與精神分裂癥有潛在相關(guān)性。有研究認(rèn)為精神分裂癥患者的某些認(rèn)知缺陷似乎是源于背外側(cè)前額葉皮質(zhì)出生后發(fā)育的改變[13]，背外側(cè)前額葉皮質(zhì)的第3層錐體細(xì)胞樹突棘的密度變化和對某些認(rèn)知功能有重要的作用,并且在精神分裂癥中減少。Datta等[14]實驗表明，精神分裂癥患者背外側(cè)前額葉皮質(zhì)灰質(zhì)中CDC42的轉(zhuǎn)錄水平較低，與第3層棘密度呈正相關(guān)。Ide和Lewis[15]研究表明,CDC42信號通路中至少有3種不同的分子干擾模式,可能會造成精神分裂癥的第3層錐體細(xì)胞棘缺損。Rho-GDP解離抑制因子α是一種GDI，在第3層錐體細(xì)胞中的表達(dá)水平較高，表明CDC42可能在精神分裂癥中處于非活動GDP結(jié)合狀態(tài)。在較低水平的CDC42表達(dá)情況下，預(yù)測CDC42-CDC42效應(yīng)蛋白和CDC42-p21活化激酶-LIM激酶信號通路調(diào)節(jié)肌動蛋白的能力會在精神分裂癥中的第3層錐體神經(jīng)元受損，精神分裂癥第3層錐體神經(jīng)元樹突棘異常的突出與調(diào)節(jié)層特異性表達(dá)的分子的信號有關(guān)，如CDC42效應(yīng)蛋白信使RNA優(yōu)先在人類背外側(cè)前額葉皮質(zhì)的第3層表達(dá)[16]，CDC42的活化抑制CDC42效應(yīng)蛋白的表達(dá)，CDC42的瞬時活化通常發(fā)生于谷氨酸刺激后的單個棘中，它的瞬時活化破壞了由CDC42效應(yīng)蛋白介導(dǎo)的septin屏障的組裝，還使F-actin介導(dǎo)的棘生長和突觸增強(qiáng)所必需的第二信使和細(xì)胞骨架蛋白進(jìn)入突觸后分子的棘頭部。ARHGDIA的表達(dá)增強(qiáng)聯(lián)合CDC42、CDC42效應(yīng)蛋白表達(dá)減少起放大作用，損害谷氨酸刺激后septin屏障的開放，從而抑制棘生長和維持所需的分子流進(jìn)入棘頭部，最終導(dǎo)致棘丟失?；罨腃DC42通過CDC42-p21活化激酶-LIM激酶信號級聯(lián)反應(yīng)抑制肌動蛋白解聚的cofilin家族，cofilin家族蛋白調(diào)節(jié)棘結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性所需的F-actin的組裝和分解。上述放大作用進(jìn)一步降低了CDC42-p21活化激酶-LIM激酶信號通路的活性，促進(jìn)棘丟失[14]。這些機(jī)制可能為精神分裂癥提供新的治療靶點。

3 CDC42與AD

AD是常見的進(jìn)行性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，以漸進(jìn)性的認(rèn)知和記憶的障礙和情志的異常改變?yōu)橹饕R床癥狀。AD的主要病理改變是由β淀粉樣蛋白(β-amyloid protein,Aβ)沉積形成的老年斑和由磷酸化的tau蛋白組成的神經(jīng)元纖維纏結(jié)[17]。Rho GTP酶活性的失調(diào)可能與Aβ的生成相關(guān)，從而導(dǎo)致肌動蛋白聚合的缺失、樹突棘的缺失，而這可能參與了AD的發(fā)病機(jī)制[11]。Seidman和Mirsky[18]研究發(fā)現(xiàn)，額葉皮質(zhì)功能障礙是導(dǎo)致與年齡相關(guān)的行為和認(rèn)知缺陷的基本病理過程，該功能障礙讓老年人易患神經(jīng)退行性疾病，其中CDC42是在額葉皮質(zhì)功能下調(diào)過程中最重要的基因。Aguilar等[19]認(rèn)為CDC42參與AD的發(fā)病機(jī)制。在轉(zhuǎn)基因小鼠中，核糖核酸酶P RNA組分H1與miR-326-3p/miR-330-5p結(jié)合導(dǎo)致CDC42的表達(dá)上調(diào)，在核糖核酸酶P RNA組分H1上MRE突變后，該作用被破壞。核糖核酸酶P RNA組分H1可能通過與miR-330-5p競爭上調(diào)CDC42表達(dá)并促進(jìn)海馬神經(jīng)元樹突棘形成，這可能是AD發(fā)病機(jī)制早期的代償機(jī)制[20]。Pelleieux等[21]發(fā)現(xiàn)CDC42的門控酶可促進(jìn)大腦中tau磷酸化的產(chǎn)生。在AD患者中，認(rèn)知障礙的主要原因可能是神經(jīng)突起萎縮和神經(jīng)突觸丟失，這是由毒性Aβ(主要是Aβ寡聚體)引起的。CDC42可能通過影響cofilin活性進(jìn)一步調(diào)節(jié)Aβ對肌動蛋白細(xì)胞骨架動力學(xué)的影響，在AD動物模型中，丹皮酚磺酸鈉可以減弱D-gal和AICI3誘導(dǎo)的RAC1/CDC42的上調(diào)，阻止毒性Aβ的形成，導(dǎo)致cofilin1的再分配及p-cofilin1/cofilin1比例的降低，進(jìn)而引起棒狀形成減少、突觸和樹突丟失，最終改善行為缺陷。丹皮酚廣泛應(yīng)用于中藥，為AD的治療方案提供了新的思路[22]。

4 CDC42與癲癇

癲癇由不同病因引起腦部神經(jīng)元高度同步化異常放電導(dǎo)致，但其發(fā)病機(jī)制仍不完全清楚，目前發(fā)病機(jī)制有離子通道學(xué)說、異常網(wǎng)絡(luò)學(xué)說等，證據(jù)表明，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中突觸的功能障礙和重組以及病理性興奮環(huán)形成與癲癇有關(guān)[6]。CDC42在顳葉癲癇患者的腦組織和癲癇腦組織中表達(dá)增加，而且在癲癇大鼠的海馬區(qū)域表達(dá)也明顯增加，在毛果蕓香堿誘導(dǎo)的癲癇模型中，用CDC42的特異性抑制劑ML141預(yù)處理可降低癲癇發(fā)作的嚴(yán)重程度。對毛果蕓香堿誘導(dǎo)的癲癇模型海馬切片中CA1區(qū)錐體神經(jīng)元進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗記錄，發(fā)現(xiàn)ML141顯著抑制動作電位的頻率，增加微抑制性突觸后電流的幅度和頻率，并增加誘發(fā)抑制性突觸后電流的幅度。然而，ML141對微興奮性突觸后電流沒有影響[23]。提示CDC42與癲癇發(fā)生機(jī)制有關(guān)。Gorter等[24]認(rèn)為微RNA的表達(dá)及其對信號通路的調(diào)控作用對研究癲癇治療的可能靶點有重要作用。有研究表明，miR-132在大鼠顳葉內(nèi)側(cè)癲癇的發(fā)生過程中持續(xù)升高[25]，p250GAP是miR-132的靶點，p250GAP是一種GAP，可以通過抑制下游Rho GTP酶的活性與多種突觸蛋白相互作用，包括RhoA、RAC1和CDC42[26-27]。所以CDC42可能與癲癇的發(fā)生機(jī)制也有關(guān)。Wayman等[27]在無鎂培養(yǎng)基誘發(fā)的海馬神經(jīng)元癲癇模型中，發(fā)現(xiàn)沉默miR-132蛋白的表達(dá)可減少慢性復(fù)發(fā)性癲癇的發(fā)作。p250GAP使中樞神經(jīng)系統(tǒng)中RAC1和CDC42活性增高，抑制miR-132或p250GAP對RAC1的活性沒有影響，抑制miR-132后，p250GAP表達(dá)上調(diào)，CDC42的活性受到抑制，抑制p250GAP后，CDC42的活性增強(qiáng)，因此miR-132可能通過調(diào)節(jié)p250GAP的表達(dá)、下游CDC42的活化及樹突棘的形態(tài)和功能來發(fā)揮作用。這可能為新型抗癲癇藥物的研發(fā)提供了新的靶點，可能對抗癲癇藥物治療耐受性差的患者來說多了一種更好的選擇[6]。

5 CDC42與腦卒中

腦卒中指由于大腦血供中斷超過24 h引起的局灶性或全腦的功能紊亂[28]，腦卒中是全球第二大死亡原因，也是致殘的主要原因[29]，故有必要研究腦卒中相關(guān)的發(fā)病機(jī)制和藥物靶點。Wei等[30]發(fā)現(xiàn)大鼠在長期適度運(yùn)動后，腦組織中的CDC42、RAS相關(guān)蛋白1b、11型非受體蛋白酪氨酸磷酸化酶、Rho-GDP解離抑制因子α和酪氨酸3-加單氧酶/色氨酸5-加單氧酶激活蛋白ε多肽5種參與神經(jīng)營養(yǎng)因子信號通路蛋白的表達(dá)增加，可能在增加心血管健康、增強(qiáng)免疫能力、降低神經(jīng)系統(tǒng)疾病風(fēng)險、預(yù)防肥胖、癌癥、腦卒中、糖尿病等方面發(fā)揮作用。侯氏黑散是一種經(jīng)典的中藥，該中藥可以通過Netrin-1/RAC1/CDC42信號通路促進(jìn)腦缺血后軸突和神經(jīng)再生的修復(fù)[31]。Mo等[32]發(fā)現(xiàn)急性缺血性卒中患者的外周淋巴細(xì)胞中CDC42表達(dá)降低。所以CDC42可能與腦卒中發(fā)病機(jī)制有關(guān)。近年來，有研究表明，腦卒中和其他缺血性損傷是慢性進(jìn)展性炎癥的表現(xiàn)，在缺血性卒中發(fā)作后，一種繼發(fā)性細(xì)胞死亡機(jī)制介導(dǎo)了更嚴(yán)重的神經(jīng)損害，這是由于內(nèi)源性神經(jīng)炎癥過程上調(diào)使局部缺氧組織受到損傷，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，與此同時還啟動了一個炎癥級聯(lián)反應(yīng)的反饋環(huán)路，進(jìn)一步擴(kuò)大了損傷的區(qū)域[33]。腦卒中引起的興奮性毒性和氧化應(yīng)激進(jìn)一步激活神經(jīng)炎癥，神經(jīng)炎癥在卒中后長期腦損傷中起關(guān)鍵作用。LJ529是A3腺苷受體的激動劑，Choi等[34]發(fā)現(xiàn)在大鼠的大腦中動脈阻塞模型中，LJ529可能通過活化A3腺苷受體，抑制小膠質(zhì)細(xì)胞中RAC、CDC42、Rho等Rho GTP酶的活性和極化表達(dá)，可能抑制肌動蛋白極性和細(xì)胞骨架的變化，從而抑制MCP-1誘導(dǎo)的炎性細(xì)胞的趨化和遷移來減輕缺血性腦損傷。

6 CDC42與其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病

激活轉(zhuǎn)錄因子4(activating transcription factor 4,ATF4)是學(xué)習(xí)和記憶的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。特異性海馬ATF4下調(diào)可導(dǎo)致突觸可塑性改變、記憶缺陷以及谷氨酸能功能降低。同時，GABAB受體是抑制神經(jīng)遞質(zhì)GABA的代謝型受體，在控制神經(jīng)元放電過程中起關(guān)鍵作用。GABAB受體轉(zhuǎn)運(yùn)或功能的缺陷與各種神經(jīng)和精神疾病有關(guān)，其中包括癲癇、焦慮、抑郁、精神分裂癥、成癮和疼痛[35]。已有研究表明，ATF4通過調(diào)節(jié)RhoGDIα的表達(dá)來影響Rho GTP酶蛋白水平，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞記憶、運(yùn)動等功能[36]。GABAB受體的運(yùn)輸過程受ATF4的影響，在海馬神經(jīng)元中，ATF4下調(diào)后可以通過介導(dǎo)CDC42的缺失進(jìn)一步降低膜結(jié)合的GABAB受體水平，最終增加內(nèi)在興奮性[35]。EF-hand域家族D2蛋白是一種在神經(jīng)元細(xì)胞中表達(dá)豐富的保守的鈣結(jié)合蛋白，研究發(fā)現(xiàn)EF-hand域家族D2蛋白的表達(dá)在AD、帕金森病、亨廷頓病、肌萎縮側(cè)索硬化癥和精神分裂癥中都有變化，EF-hand域家族D2蛋白可能通過調(diào)節(jié)RAC1，Cdc42和RhoA的活性來調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移等[37]。在Habib等[38]研究發(fā)現(xiàn)，CDC42在許多退行性疾病，例如AD、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化癥和額顳癡呆中均有下調(diào)表現(xiàn)。

在自閉癥譜系障礙中，腫瘤壞死因子α是研究較多的與自閉癥譜系障礙相關(guān)的生物標(biāo)志物，腫瘤壞死因子α水平升高導(dǎo)致胱天蛋白酶3水平升高，引起神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致神經(jīng)元缺乏，這是自閉癥的發(fā)病機(jī)制之一，此外，腫瘤壞死因子α還可以通過激活CDC42和GOPC(golgi associated PDZ and coiled-coil motif containing)進(jìn)一步調(diào)節(jié)GRID2的表達(dá)，這個信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能也參與了自閉癥譜系障礙的發(fā)病機(jī)制[39]。

TDP-43(43-kDa TAR DNA-binding protein)是肌萎縮側(cè)索硬化癥的泛素化包涵體和額顳葉變性的泛素化陽性包涵體的主要成分，TDP-43的功能失活參與了神經(jīng)變性疾病的發(fā)病機(jī)制，在分化的Neuro-2a細(xì)胞中的敲低TDP-43可以抑制神經(jīng)突起生長并誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，在這些敲低細(xì)胞中，Rho家族成員RhoA、RAC1和CDC42 GTP酶被滅活，并且這些分子的膜定位減少，說明CDC42可能也參與了肌萎縮側(cè)索硬化癥及額顳葉變性的發(fā)病機(jī)制[40]。

7 結(jié) 語

CDC42在神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛存在，同時參與了細(xì)胞生長、增殖、遷移、細(xì)胞骨架及突觸形成、凋亡等重要的生理過程，因此在病理狀態(tài)下CDC42很有可能參與了精神分裂癥、AD、癲癇、腦卒中及其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生及發(fā)展過程，CDC42可能與精神分裂癥患者背外側(cè)額葉皮質(zhì)的錐體細(xì)胞棘缺失相關(guān)；在AD中，CDC42在額葉皮質(zhì)功能下調(diào)中起著重要作用；同時，癲癇及腦卒中的發(fā)病機(jī)制也與CDC42的活性改變有關(guān)。通過CDC42在這些疾病中的異常表達(dá)以及信號通路的改變，可以認(rèn)為在其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病中CDC42的研究也很有意義。盡管現(xiàn)在大多數(shù)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制尚未明確，但CDC42作為改善癥狀的潛在治療靶點有一定的價值。