■張鑫蕊 閆俊書 宦海琳 林 勇 張 干 葉成智 周巖民 周維仁*

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，江蘇南京 210095；2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所，江蘇南京 210014)

母體的營養(yǎng)水平會影響到子代生長發(fā)育[1]，對于家禽來說，母體影響是直接的(資源供應(yīng))或間接的(遺傳)[2]。種雞的營養(yǎng)水平對子代非常重要，它可以調(diào)節(jié)種蛋中的營養(yǎng)含量，進而影響子代血液和組織中生長調(diào)節(jié)因子的含量，最終影響子代對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收[3]。一些母代效應(yīng)可以增強后代的適應(yīng)性[4]。子代胚胎期養(yǎng)分的積累受母代飼糧營養(yǎng)水平的直接影響，對子代孵化后的生長性能、肉品質(zhì)等性狀有一定的影響[5]。在母代飼糧中添加飼料添加劑已成為促進子代健康、提高生長性能、免疫功能、促進營養(yǎng)物質(zhì)吸收等不可缺少的成分[6]。

核苷酸（Nucleotide，NT）是一種重要的低分子化合物[7]。飼料中添加核苷酸具有促生長、提高免疫應(yīng)答、免疫效果等作用[8]。肌苷酸是一種重要的核酸代謝中間產(chǎn)物[9]。黃鑫等[10]研究表明肉雞飼糧中添加酵母核酸能促進幼齡肉雞腸道組織生長發(fā)育，進而改善肉雞的生長性能。本團隊前期研究發(fā)現(xiàn)，母代肉雞飼糧添加肌苷酸增強了1～21日齡子代肉雞體內(nèi)的脂質(zhì)代謝，提高了子代肉雞生長與血清免疫相關(guān)激素水平和免疫因子含量[11]。然而，關(guān)于母代肉雞飼糧外源添加肌苷酸是否影響子代肉雞生長后期的生長及血清免疫指標(biāo)，尚不明確，母代肉雞飼糧肌苷酸添加量為多少時，對生長后期肉雞有最佳效果，尚未定論。因此，本研究旨在研究母雞飼糧中添加不同劑量肌苷酸對生長后期子代肉雞的生長性能、血清免疫功能的影響，并對肌苷酸添加劑量進行探究，為更深層次的研究母源營養(yǎng)對子代的遠期影響提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及試驗設(shè)計

試驗選取遺傳背景相同、體重相近的20周齡健康A(chǔ)A肉雞480只，隨機分為4組：Ⅰ組（基礎(chǔ)日糧）、Ⅱ組（基礎(chǔ)日糧+0.2%肌苷酸）、Ⅲ組（基礎(chǔ)日糧+0.5%肌苷酸）和Ⅳ組（基礎(chǔ)日糧+1%肌苷酸），每組6個重復(fù)，每個重復(fù)20只，當(dāng)母雞產(chǎn)蛋率達到5%時進行試驗處理，母雞產(chǎn)蛋率達到50%時人工受精，母雞產(chǎn)蛋率達到高峰時收集種蛋，收集7 d孵化。孵化后依據(jù)母代分組情況，將各組孵化所得1 920只1日齡仔雞再分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組），每組6個重復(fù)，每個重復(fù)80只，子代雞飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗期42 d，試驗分組設(shè)計見表1。

1.2 試驗日糧及營養(yǎng)水平

本試驗所用5’-肌苷酸二鈉（IMP）購自希杰生物科技有限公司，純度不低于97%。試驗用種雞、肉雞飼料由江蘇大地動物保健品有限公司生產(chǎn)，試驗日糧配方及營養(yǎng)水平見表2。

表1 試驗分組設(shè)計

表2 試驗日糧配方及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長性能指標(biāo)的測定

于試驗42 d早8：00以重復(fù)為單位空腹稱重，結(jié)算耗料量，計算各重復(fù)肉仔雞的平均日增重、料重比。

平均日增重(g)=[階段末重-始重]/試驗天數(shù)

平均日采食量(g)=階段總采食量/試驗天數(shù)

料重比=平均日采食量/平均日增重

1.3.2 血液生化指標(biāo)測定

于子代42日齡時，每個重復(fù)中隨機抽取2羽健康雞，頸靜脈采血，分離血清。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法測定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細胞介素2（IL-2），試劑盒購自美國Bethyl公司。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS（Ver22.0）軟件包中的GLM過程對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析，利用Duncan's法進行多重比較，利用Means過程計算平均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)誤。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”的方式表示，顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 肉種雞飼糧添加肌苷酸對子代肉雞生長性能的影響（見表3）

表3 肉種雞飼糧添加肌苷酸對子代肉雞生長性能的影響

由表3可知，在子代肉雞生長后期（22～42日齡），與Ⅰ組相比，Ⅲ組平均日增重有升高的趨勢(P＞0.05)，并且Ⅲ組平均日采食量顯著高于Ⅱ組（P＜0.05），其他各組無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 肉種雞飼糧添加肌苷酸對子代肉雞血清生化指標(biāo)的影響（見表4）

表4 肉種雞飼糧添加肌苷酸對子代肉雞血清免疫指標(biāo)的影響(g/l)

由表4可知，在42日齡時，與Ⅰ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組血清中IL-2的含量顯著升高（P＜0.05），Ⅱ組有升高的趨勢，但不顯著（P＞0.05）；而血清中IgA、IgG和IgM的含量無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 肉種雞飼糧添加肌苷酸對子代肉雞生長性能的影響

作為一種潛在的核苷酸類飼料添加劑，肌苷酸在提高動物生長性能和免疫功能方面發(fā)揮著重要作用[12]，Superchi等[13]研究發(fā)現(xiàn)斷奶前飼糧補充核苷酸可提高仔豬的生長性能。肌苷酸作為一種單核苷酸[14]，能夠參與機體的代謝[15]。有研究表明，斷奶仔豬早期采用高核苷酸飼料可提高生長性能、飼料攝取量和飼料利用率[16]。周慧琦等[17]報道，飼糧中添加較多5’IMP的核苷酸添加劑，可能有助于仔豬生長性能的提高。在鴨上也有研究表明，含有核苷酸的復(fù)合添加劑可提高鴨的生長性能[18]。Safari等[19]也報道，日糧核苷酸對小龍蝦的生長性能有積極影響。以上研究均表明，飼糧中添加外源核苷酸對動物的生長性能等方面發(fā)揮重要的作用。在肉種雞飼糧中添加外源肌苷酸的研究少有報道，本試驗研究發(fā)現(xiàn)，母雞飼糧中添加0.2%、0.5%和1.0%肌苷酸對22～42日齡子代肉雞的生長性能無顯著影響，這與本研究團隊前期研究結(jié)果一致。這可能是由于母代飼糧添加外源肌苷酸未能引發(fā)母體效應(yīng)，也可能是由于母代飼糧添加外源肌苷酸對胚胎期的子代肌纖維影響不顯著，因而對子代肉雞的生長性能影響不顯著，其具體作用機理還有待進一步研究。

3.2 肉種雞飼糧添加肌苷酸對子代肉雞血清生化指標(biāo)的影響

外源性核苷酸與機體免疫功能密切相關(guān)，其可通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制皮質(zhì)醇產(chǎn)生、促進可能提高免疫能力的細胞因子生成[20]。補充核苷酸能有效地修復(fù)淋巴細胞中DNA的氧化損傷[21]。細胞膜和血液中的免疫相關(guān)分子可能反映調(diào)節(jié)免疫功能。也是免疫應(yīng)答和預(yù)防感染的重要因子，可促進細胞裂解，激活補體促進吞噬作用[22]。免疫球蛋白G(IgG)是體液免疫的重要抗體[23]，具有免疫調(diào)節(jié)作用[24]。Campbell等[25]研究發(fā)現(xiàn)，新生仔豬對IgG的吸收可提高免疫能力，但本試驗結(jié)果顯示，母雞飼糧中添加1.0%肌苷酸對子代肉雞血清IgG含量有提高趨勢，但對IgA、IgM含量無顯著影響。

白細胞介素(IL)作為一種十分重要的細胞因子家族，在免疫細胞的成熟、活化及免疫調(diào)節(jié)等一系列過程中均起到重要作用[26]。IL-2是一種多效細胞因子，能夠調(diào)節(jié)T細胞代謝[27]，維持具有免疫調(diào)節(jié)功能的CD4+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞分化、存活[28]。有研究表明超低劑量IL-2促進調(diào)節(jié)性T細胞和自然殺傷細胞的免疫調(diào)節(jié)功能[29]。本試驗結(jié)果顯示，母代飼糧中添加0.2%肌苷酸對子代肉雞IL-2有提高趨勢，添加0.5%和1.0%肌苷酸對子代肉雞血清IL-2含量提高顯著。表明母代飼糧添加肌苷酸對子代肉雞機體免疫系統(tǒng)具有促進作用，母體飼糧添加IMP能夠使子代肉雞在整個生長期均能提高血清中相關(guān)免疫指標(biāo)。

4 結(jié)論

①母雞飼糧添加肌苷酸對22～42日齡子代肉雞的生長性能無顯著影響。

②添加0.5%和1.0%肌苷酸對子代肉雞血清IL-2含量提高顯著，從而改善了子代肉雞的免疫功能。