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啤酒花活性成分與抗氧化活性的相關(guān)性

2019-04-02 03:42李玉晶劉玉梅
食品科學(xué) 2019年5期
關(guān)鍵詞:啤酒花極性光度

李玉晶,劉玉梅*

(新疆大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,煤炭清潔轉(zhuǎn)化與化工過程自治區(qū)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆 烏魯木齊 830046)

隨著對(duì)氧化與人體衰老、疾病的發(fā)生與發(fā)展之間關(guān)系的認(rèn)識(shí)不斷深入,研究者發(fā)現(xiàn),外源補(bǔ)充抗氧化劑是提高機(jī)體抗氧化能力、減緩衰老、防病養(yǎng)生的有效途徑[1-2];而天然來源的抗氧化劑以安全性高、抗氧化能力強(qiáng)、無副作用等優(yōu)點(diǎn)備受關(guān)注[3-4]。因此,尋找安全的天然抗氧化劑成為從事食品科學(xué)研究人員的重要課題。啤酒花(Humulus lupulus L.),別名忽布、蛇麻花等,是蕁麻目大麻科葎草屬多年生草本植物,雌雄異株;其化學(xué)成分主要有啤酒花樹脂、黃酮、多酚、揮發(fā)油等。啤酒花味苦、性平,具有明顯的藥理活性、優(yōu)異的抗氧化能力和防腐特性[5-8],有健胃、消食、利尿、安神、止咳化痰等功效[9-10]。

啤酒花是啤酒釀造的主要原料之一,在國內(nèi)外均有悠久的應(yīng)用歷史,其安全性好。本實(shí)驗(yàn)以新疆三寶樂農(nóng)業(yè)科技有限公司培育的薩斯特1、薩斯特2、薩斯特3號(hào)啤酒花為原料,首先通過石油醚提取得到啤酒花樹脂,再以體積分?jǐn)?shù)75%乙醇溶液提取脫脂后啤酒花中的其他活性成分,對(duì)得到的乙醇提取物經(jīng)氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次分離得不同極性溶劑提取物,以·OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基及β-胡蘿卜素-亞油酸體系綜合評(píng)價(jià)上述不同極性溶劑提取物的抗氧化能力,并結(jié)合樣品中活性成分含量的相關(guān)性分析,尋找啤酒花中抗氧化成分的物質(zhì)基礎(chǔ),為進(jìn)一步拓展啤酒花的應(yīng)用領(lǐng)域提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

薩斯特1號(hào)、薩斯特2號(hào)、薩斯特3號(hào)壓縮啤酒花樣品由新疆三寶樂農(nóng)業(yè)科技有限公司提供;為敘述方便,后文中相應(yīng)統(tǒng)一簡化為1#、2#、3#。

DPPH、β-胡蘿卜素、福林-酚試劑 Sigma-Aldrich(中國)公司;沒食子酸、蘆丁 中國藥品生物制品鑒定所;其他試劑均為國產(chǎn)分析純 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司。

1.2 儀器與設(shè)備

KQ-100VED型三頻數(shù)控超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;BS210S型電子天平 德國賽多利斯公司;DHP-420型電熱恒溫培養(yǎng)箱 北京市永光明醫(yī)療儀器廠;UV-5300PC型紫外-可見分光光度計(jì) 上海元析儀器有限公司;DHG-9075A型電熱鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;HH-S4型數(shù)顯恒溫水浴 金壇市醫(yī)療儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 3 種啤酒花不同極性溶劑的提取

啤酒花樣品粉碎后以石油醚萃取至溶液無色,石油醚相脫去溶劑后得石油醚提取物(petroleum ether extracts,PE);萃取后的啤酒花渣以體積分?jǐn)?shù)75%乙醇溶液提取、濃縮后得乙醇提取物。該乙醇提取物用蒸餾水溶解混懸后,依據(jù)極性由弱到強(qiáng)順序依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取,提取液脫除溶劑后分別得氯仿提取物(chloroform extracts,CE)、乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extracts,EAE)、正丁醇提取物(n-butanol extracts,NBE),萃取后的水相經(jīng)濃縮干燥后得到水提取物(water extracts,WE),各極性溶劑提取物測試前分別用無水乙醇溶解,并根據(jù)需要進(jìn)行相應(yīng)稀釋。

1.3.2 α-酸和β-酸含量的測定

α-酸和β-酸含量的測定參考GB/T 20369—2006《啤酒花制品》[11]中的方法。準(zhǔn)確稱取樣品(5.000±0.001)g于250 mL具塞錐形瓶中,移入100 mL甲苯,振蕩萃取30 min后靜置10 min,精確移取5.0 mL萃取液于100 mL容量瓶中,甲醇定容,得到A液。準(zhǔn)確移取3.0 mL A液于50 mL容量瓶中,用堿性甲醇(100 mL的甲醇中加入6 mol/L的NaOH 0.2 mL)定容,得到B液。參比液配制:移取5.0 mL甲苯于100 mL容量瓶中,用甲醇定容,搖勻后移取該溶液3.0 mL,再用堿性甲醇稀釋定容至50 mL。以參比液校正儀器吸光度為零,然后在波長275、325、355 nm波長處分別測定樣品稀釋B液的吸光度,α-酸和β-酸含量分別按公式(1)、(2)計(jì)算。

式中:A355nm、A325nm、A275nm分別為稀釋B液在波長355、325、275 nm波長處的吸光度;其余數(shù)據(jù)均為經(jīng)驗(yàn)公式中的經(jīng)驗(yàn)值。

1.3.3 總黃酮含量的測定

采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色法[12]測定總黃酮含量。準(zhǔn)確稱量烘至恒質(zhì)量的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品0.109 1 g,用體積分?jǐn)?shù)30%乙醇溶液配制成質(zhì)量濃度為0.218 2 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL,分別置于25 mL的容量瓶中,用體積分?jǐn)?shù)30%乙醇溶液補(bǔ)充至10 mL,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)5% NaNO2溶液1.0 mL,搖勻,放置5 min;然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)10% Al(NO3)3溶液1.0 mL,搖勻,放置6 min;再加入1 mol/L NaOH溶液10 mL,用蒸餾水定容至刻度,搖勻,放置10 min。以不加樣品的溶液為參比,在510 nm波長處測定吸光度,以質(zhì)量濃度-吸光度進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為:A=0.007 5+15.668 7ρ,決定系數(shù)R2=0.999 2,線性范圍0.008 7~0.043 6 mg/mL(以蘆丁質(zhì)量計(jì))。以1 mL的樣品溶液代替標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn),總黃酮含量按式(3)計(jì)算。

式中:ω為樣品中總黃酮含量;ρ為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品提取液中總黃酮的質(zhì)量濃度/(mg/mL);V為提取液的體積/mL;n為稀釋倍數(shù);m為樣品質(zhì)量/g。

1.3.4 總多酚含量的測定

采用福林-酚比色法[13-14]測定總多酚含量。取烘至恒質(zhì)量的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品0.044 3 g,用水溶解并配成質(zhì)量濃度依次為8.86、17.22、35.44、53.16、70.88、88.60 μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取上述不同溶液1 mL加到10 mL比色管中,依次加入1 mL去離子水、0.5 mL稀釋兩倍的福林-酚試劑、1.5 mL 17.5% Na2CO3,去離子水定容至刻度;室溫下反應(yīng)2 h,在760 nm波長處測定吸光度。以質(zhì)量濃度-吸光度進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為:A=0.003 5+0.010 3ρ,決定系數(shù)R2=0.999 5,線性范圍在8.86~88.60 μg/mL(以沒食子酸質(zhì)量計(jì))。1 mL的樣品溶液代替標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn),總多酚含量按式(4)計(jì)算。

式中:ω為樣品中總多酚含量;ρ為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品提取液中多酚的質(zhì)量濃度/(μg/mL);V為提取液的體積/mL;n為稀釋倍數(shù);m為樣品質(zhì)量/g。

1.3.5 ·OH清除活力的測定

采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法[15]測定·OH清除活力,取0.75 mmol/L新鮮配制的的鄰二氮菲溶液1 mL于試管中,依次加入磷酸鹽緩沖溶液(0.2 mmol/L、pH 7.4)2 mL和重蒸水1 mL,充分混勻后,加0.75 mmol/L FeSO41 mL混勻,再加入體積分?jǐn)?shù)0.3% H2O2溶液1 mL,混合均勻后于37 ℃恒溫箱中溫育60 min。冷卻后,在536 nm波長處測定吸光度(以蒸餾水作空白),所測得的數(shù)據(jù)為損傷管的吸光度。未損傷管以1 mL重蒸水代替損傷管中1 mL 0.3%的H2O2,樣品管以1 mL樣品代替損傷管中的1 mL重蒸水,操作方法同損傷管,可分別測得536 nm波長處損傷管和樣品管的吸光度,樣品·OH清除率按公式(5)計(jì)算。

式中:A樣為樣品的吸光度;A損為損傷管的吸光度;A未為未損傷管的吸光度。

1.3.6 DPPH自由基清除活力的測定

準(zhǔn)確稱取0.010 0 g DPPH,用甲醇定容于250 mL的容量瓶中,配成質(zhì)量濃度為0.04 mg/mL的溶液。取1 mL樣品液于試管中,加入3 mL DPPH溶液,放置40 min后,在517 nm波長處測定吸光度(空白對(duì)照組用甲醇代替樣品)[16]。DPPH自由基清除率按公式(6)計(jì)算。

式中:A0為未添加樣品時(shí)DPPH溶液的吸光度;A1為添加樣品時(shí)DPPH溶液的吸光度。

1.3.7 β-胡蘿卜素-亞油酸體系抗氧化活性實(shí)驗(yàn)

取0.5 mL質(zhì)量濃度為1.21 mg/mL的β-胡蘿卜素氯仿溶液、0.2 mL質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的亞油酸氯仿溶液、1.0 mL質(zhì)量濃度為0.2 g/mL的吐溫-40氯仿溶液于200 mL圓底燒瓶中混勻,置于50 ℃水浴中除去氯仿,加入100 mL蒸餾水搖勻,制得β-胡蘿卜素-亞油酸溶液。同時(shí)另取小錐形瓶,不加β-胡蘿卜素溶液,其他同前述,作空白調(diào)零用。測定時(shí),取上述制得的β-胡蘿卜素-亞油酸溶液45 mL,加入4 mL的0.2 mol/L pH 7.0磷酸鹽緩沖液,搖勻得反應(yīng)介質(zhì)溶液。在試管中逐一加入4.0 mL反應(yīng)介質(zhì)溶液,再加0.1 mL的樣液,同時(shí)設(shè)置不含試樣(以0.1 mL 體積分?jǐn)?shù)80%乙醇溶液代替)的對(duì)照管。配制好的溶液在470 nm波長處測定其吸光度,記為“0 min”時(shí)刻的吸光度[17]。然后將所有試管置于50 ℃恒溫水浴中保溫90 min,取出測定“90 min”時(shí)刻的吸光度,總抗氧化能力按公式(7)計(jì)算。

式中:A空t、A樣t分別表示t=90 min時(shí)對(duì)照和樣品的吸光度;A空0、A樣0分別表示t=0 min時(shí)對(duì)照和樣品的吸光度。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為3 次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值,表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理與統(tǒng)計(jì)分析采用Microsoft Excel 2010、OriginPro 8.6和SPSS 16.0軟件進(jìn)行處理,采用鄧肯氏多重極差法進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同極性溶劑提取物中α-酸、β-酸、黃酮和多酚含量

α-酸、β-酸、黃酮和多酚類化合物為啤酒花中的主要活性成分,表1為3 個(gè)品種啤酒花各極性溶劑提取物中α-酸、β-酸、黃酮和多酚的含量。α-酸和β-酸極性較弱,主要存在于PE中,CE中僅有少量,其他極性提取物中均未檢測出α-酸和β-酸。其中,1#和2#樣品中的α-酸含量相當(dāng),3#樣品略低;β-酸在3#樣品中的含量也較低。黃酮及多酚類化合物在所有極性溶劑提取物中都存在,含量均以在EAE最高,NBE次之,PE最低。3 個(gè)啤酒花樣品在各極性溶劑提取物中的趨勢差異較小,各極性溶劑提取物中黃酮均為1#樣品中含量最高,多酚含量除WE、EAE外也與此基本一致,僅在PE中3#樣品略高于1#樣品。

表 1 α-酸、β-酸、黃酮和多酚的含量Table 1 Contents of α-acids, β-acids, fl avonoids and polyphenols in hop extracts mg/g

2.2 清除·OH能力

Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的·OH能使鄰二氮菲-Fe2+氧化為鄰二氮菲-Fe3+,鄰二氮菲-Fe2+在536 nm波長處的最大吸收峰消失,根據(jù)536 nm波長處吸光度變化可判斷受試物清除·OH的能力,進(jìn)而反映抗氧化劑抗氧化能力的強(qiáng)弱[18],啤酒花不同極性溶劑提取物的清除·OH活性見圖1。

圖 1 各樣品清除·OH能力Fig. 1 Hydroxyl radical scavenging activity of hop extracts

由圖1可知,啤酒花各極性溶劑提取物對(duì)·OH均有一定的清除能力,且表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。3 種酒花各極性溶劑提取物清除·OH的能力由強(qiáng)到弱依次為PE>CE>EAE>NBE>W(wǎng)E??寡趸钚詮?qiáng)弱通常以半數(shù)清除濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50)來評(píng)價(jià),IC50越小,樣品清除自由基能力越強(qiáng)。從表2的IC50可以看出,3 個(gè)啤酒花樣品中,PE、CE、NBE清除·OH能力為1#>2#>3#,EAE為2#>1#>3#,WE為1#>3#>2#;與對(duì)照品蘆?。↖C50為(0.041 8±0.000 1)mg/mL)相比,除1#樣品的PE(IC50為(0.073 6±0.010 2)mg/mL)比較接近外,其余·OH清除能力均明顯偏弱。比較白姍姍等[19]對(duì)扎一、馬可波羅啤酒花廢棄枝葉70%乙醇提取物清除·OH能力的相關(guān)性研究,1#、2#、3#各極性溶劑提取物清除·OH的能力都強(qiáng)于扎一、馬可波羅啤酒花廢棄枝葉70%乙醇提取物(扎一、馬可波羅清除·OH的IC50分別為9.04、6.80 mg/mL)。

表 2 不同抗氧化體系樣品的IC50Table 2 IC50 for antioxidant properties of different hop extracts mg/mL

2.3 清除DPPH自由基的能力

DPPH自由基是一種以氮為中心的很穩(wěn)定的自由基,其甲醇溶液呈現(xiàn)深紫色,在517 nm波長有最大吸收峰,當(dāng)有自由基清除劑存在時(shí),DPPH自由基的游離電子被配對(duì),溶液顏色會(huì)逐漸變淺。DPPH自由基的配對(duì)程度與其顏色褪色程度成定量關(guān)系,據(jù)此可通過測定其吸光度的變化確定其抗氧化能力的強(qiáng)弱[20],啤酒花各極性部位提取物清除DPPH自由基的活性見圖2。

圖 2 各樣品清除DPPH自由基能力Fig. 2 DPPH radical scavenging activity of hop extracts

由圖2可知,啤酒花各極性溶劑提取物均具有清除DPPH自由基的活性,質(zhì)量濃度在0~0.2 mg/mL的范圍內(nèi),清除率隨樣品質(zhì)量濃度的增大而增大,當(dāng)質(zhì)量濃度超過0.2 mg/mL時(shí),清除率趨于穩(wěn)定。各樣品清除DPPH自由基的IC50如表2所示,3 個(gè)啤酒花各極性溶劑提取物清除能力大小均為PE>CE>EAE>NBE>W(wǎng)E,且1#>2#>3#。但與對(duì)照品蘆丁相比,所有樣品的IC50均高于蘆?。↖C50為0.011 9±0.013 6 mg/mL)。上述結(jié)果與劉莎等[21]有關(guān)不同品種酒花(‘馬可波羅’、‘青島大花’和‘扎一’)液態(tài)CO2萃余物清除DPPH自由基能力結(jié)果相比,‘扎一’清除DPPH自由基活性弱于PE、CE及1#的EAE,但強(qiáng)于其他極性溶劑提取物;‘青島大花’清除DPPH自由基活性弱于PE、CE、EAE、1#、2#的NBE和1#的WE;‘馬可波羅’清除DPPH自由基的活性強(qiáng)于2#、3#的WE及3#的NBE,但都比其他極性溶劑提取物弱(‘馬可波羅’、‘青島大花’和‘扎一’清除DPPH自由基IC50分別為0.123、0.106、0.071 mg/mL)。

2.4 β-胡蘿卜素-亞油酸乳化體系樣品的總抗氧化能力

β-胡蘿卜素是一種多烯橘黃色素易被氧化褪色,反應(yīng)介質(zhì)中的亞油酸會(huì)氧化產(chǎn)生過氧化物質(zhì)使β-胡蘿卜素褪色,當(dāng)向反應(yīng)體系中加入抗氧化劑時(shí),抗氧化劑能抑制亞油酸氧化產(chǎn)生過氧化物質(zhì),其褪色程度取決于體系中抗氧化物質(zhì)的活性強(qiáng)弱[17],基于此可通過比色法計(jì)算抗氧化物質(zhì)的總抗氧化能力的大小。啤酒花不同極性部位提取物的總抗氧化能力見圖3。

圖 3 β-胡蘿卜素-亞油酸抗氧化能力Fig. 3 Total antioxidant activity evaluated by β-carotene-linoleic acid model system assay

由圖3可知,啤酒花各極性溶劑提取物均有一定的抗氧化能力,且總抗氧化能力隨各溶劑提取物質(zhì)量濃度的增大而增大,當(dāng)質(zhì)量濃度超過2 mg/mL時(shí)總抗氧化能力趨于平衡??偪寡趸芰Φ膹?qiáng)弱也可以IC50評(píng)價(jià),IC50越小,總抗氧化能力越強(qiáng)。由表2的IC50可知,3 種酒花各極性部位的總抗氧化能力隨極性增加而減小,其中PE、CE、EAE的總抗氧化能力由強(qiáng)到弱為1#>2#>3#,NBE、WE的總抗氧化能力為1#>3#>2#,但均低于對(duì)照品蘆丁(IC50為(0.028 4±0.012 5)mg/mL)。與劉玉梅[22]對(duì)質(zhì)量濃度為2 mg/mL的5 種啤酒花熱水、乙醇提取物的總抗氧化能力相比,1#、2#、3#PE、CE的總抗氧化能力高于熱水、乙醇提取物,EAE、NBE、WE的總抗氧化能力與乙醇提取物相當(dāng),高于熱水提取物。

2.5 極性部位中活性成分的含量與其抗氧化活性的相關(guān)性分析

對(duì)啤酒花提取物中α-酸、β-酸、黃酮、多酚的含量與其3 種抗氧化體系的IC50進(jìn)行相關(guān)性分析,可系統(tǒng)地評(píng)價(jià)啤酒花提取物的活性成分與其抗氧化活性的相關(guān)性。因α-酸、β-酸僅在PE和CE中存在,所以分別比較了PE和CE中α-酸、β-酸、黃酮、多酚的含量與3 種抗氧化體系的相關(guān)性及EAE、NBE、WE中的黃酮、多酚的含量與3 種抗氧化體系的相關(guān)性,分別見表3、4。

表 3 PE和CE中α-酸、β-酸、黃酮和多酚的含量與抗氧化活性IC50的相關(guān)系數(shù)Table 3 Correlation between IC50 for antioxidant properties and the contents of α-acids, β-acids, phenolics and fl avonoids in PE and CE extracts

由表3可知,在低極性的PE、CE樣品中,α-酸、β-酸含量與3 個(gè)體系的抗氧化能力均具有極顯著負(fù)相關(guān)性,其相關(guān)系數(shù)在-0.758~-0.978之間(P<0.01),說明在極性低的提取物樣品中,當(dāng)提取物質(zhì)量濃度一定時(shí),樣品體系中α-酸、β-酸的濃度越高,其IC50越小,抗氧化活性越強(qiáng),即α-酸、β-酸是抗氧化的主要貢獻(xiàn)者。Liu Yumei等[23]研究了啤酒花α-酸、β-酸及其衍生物的抗氧化活性,結(jié)果表明,啤酒花α-酸、β-酸均具有很強(qiáng)的抗氧化活性;趙素華等[24]采用單掃描示波極譜法證明了酒花中的α-酸、β-酸對(duì)自由基均有一定程度的清除能力;Ting等[25]的研究也表明,α-酸可形成穩(wěn)定的運(yùn)載苯氧自由基的基團(tuán),可以抑制氧化反應(yīng)。上述研究結(jié)果均與本研究取得的結(jié)果一致,說明啤酒花中的α-酸、β-酸有較強(qiáng)的抗氧化能力。表3的數(shù)據(jù)還表明,樣品中黃酮和多酚含量與上述抗氧化體系IC50呈正相關(guān)關(guān)系,其相關(guān)性系數(shù)在0.594~0.975之間(P<0.01),說明樣品的抗氧化活性與多酚、黃酮也存在明顯的劑量依賴性。

表 4 EAE、NBE、WE中黃酮和多酚含量與抗氧化活性IC50的相關(guān)系數(shù)Table 4 Correlation between IC50 for antioxidant properties and the contents of phenolics, fl avonoids in EAE, NBE and WE extracts

由表4可知,在極性較大的EAE、NBE、WE樣品中,黃酮和多酚含量與·OH、DPPH自由基清除能力和總抗氧化能力的IC50均具有極顯著的負(fù)相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)在-0.683~-0.891之間(P<0.01)。由于極性較大的提取物中沒有α-酸、β-酸,說明黃酮、多酚為其主要抗氧化物質(zhì)。已有文獻(xiàn)報(bào)道啤酒花中總黃酮、總多酚的含量與其抗氧化活性有很高的相關(guān)性,也是其主要的抗氧化物質(zhì)基礎(chǔ)[26-27],這與本實(shí)驗(yàn)所得結(jié)論一致。研究表明,啤酒花中的多酚黃酮類物質(zhì)以黃腐酚等查耳酮類物質(zhì)為主,其次為金合歡素、槲皮素、楊梅素等黃酮及黃酮醇;花旗松素、兒茶酸等的黃烷醇類;山柰酚-O-蕓香糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷等黃酮苷;以及鞣花酸、羥基肉桂酸等酚酸類物質(zhì)[28-29]。上述化合物中多含有酚羥基,酚羥基的氧原子與苯環(huán)形成p-π共軛結(jié)構(gòu),使得苯環(huán)上的電子云密度增高,酚羥基的O—H鍵能減弱,成為極好的氫和電子供體;而鄰位酚羥基容易被氧化成半醌式或醌式結(jié)構(gòu),使自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)終止,且黃酮和多酚能夠還原一些氧化性物質(zhì),所以黃酮和多酚具有較強(qiáng)的捕捉自由基的能力和抗氧化活性,黃酮和多酚抗氧化活性的強(qiáng)弱與其含量的高低、結(jié)構(gòu)中取代基的性質(zhì)和位置(尤其是羥基的取代位置)等均有關(guān)[30-32]。

3 結(jié) 論

通過比較不同極性部位啤酒花提取物發(fā)現(xiàn),啤酒花中的活性成分α-酸、β-酸主要存在于極性較弱的PE和CE中,且以PE中為主,3 個(gè)啤酒花中α-酸和β-酸的含量范圍分別為444.29~583.81 mg/g和131.83~293.19 mg/g;黃酮、多酚類物質(zhì)則在P E中含量最低,僅為0.78~1.19 mg/g和1.24~2.24 mg/g。黃酮、多酚類物質(zhì)在中等極性的EAE中含量較高,分別為20.43~24.13 mg/g和34.97~40.24 mg/g,在極性較大的NBE中次之,說明啤酒花中的黃酮和多酚主要為中等極性到極性較大的黃酮和黃酮苷類,而極性較弱的氯仿相和極性較大的水相中黃酮和多酚的含量相對(duì)較少??寡趸钚缘难芯勘砻?,啤酒花中各極性部位的提取物均有抗氧化活性。通過相關(guān)性分析表明,在極性較弱的PE和CE中α-酸、β-酸為主要的抗氧化物質(zhì),而極性較大的EAE、NBE和WE中黃酮和多酚為抗氧化基礎(chǔ)物質(zhì)。

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