趙鳳麗 劉保明 宋健 田東

【摘 要】目的：探討子宮內(nèi)膜癌中的死亡相關(guān)蛋白激酶-3（DAPK3）、c-Myc的表達及臨床意義。方法：收集190例子宮內(nèi)膜癌患者的病例資料，采用免疫組織化學(xué)法對子宮內(nèi)膜癌組織中的ER，PR，DAPK3、cMyc表達水平進行檢測，對比、分析檢測結(jié)果。結(jié)果：DAPK3、c-Myc在子宮內(nèi)膜癌組織中的陽性率明顯高于正常增生期子宮內(nèi)膜組織。隨FIOG分級升高，ER、PR、DAPK3趨向于低表達，而c-Myc相對趨向于高表達。結(jié)論：ER、PR、DAPK3、c-Myc的異常表達與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其可能與細胞增殖、凋亡功能的異常有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】子宮內(nèi)膜癌;DAPK3;c-Myc

中圖分類號： R737.33 文獻標識碼： A文章編號： 2095-2457（2019）01-0188-002

子宮內(nèi)膜癌（Uterine Corpus Endometrial Carcinoma，UCEC）是一種惡性度極高的婦科腫瘤，其起病具有隱秘性，早期可無任何癥狀，臨床中約有近70%的腫瘤患者確診時即已經(jīng)達到晚期[1]。近年來，我國子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率及死亡率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[2]。該病如能在早期診斷，其規(guī)范化治療后的5年生存率可達80%[3]，這一數(shù)據(jù)較卵巢癌、宮頸癌等其他婦科惡性腫瘤要好，但由于其早期癥狀及其不典型，很多患者就診時往往錯過最佳治療時機[4]。目前除了子宮內(nèi)膜分段診刮術(shù)，還沒有較容易實施的早期篩查方法。因此，探索特異性及敏感性較高的血清特標志物則成為了當(dāng)前研究的重點。死亡相關(guān)蛋白激酶-3（DAPK3）屬于凋亡激酶家族，參與細胞的增殖、凋亡、炎癥反應(yīng)等各項進程，cMyc是一種癌基因，在腫瘤細胞的增殖、轉(zhuǎn)移及凋亡的過程中均發(fā)揮作用。本研究通過檢測子宮內(nèi)膜癌中兩者及ER、PR的表達情況，分析它們之間的相關(guān)性，探討其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后方面的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年6月—2018年6月收治的190例子宮內(nèi)膜癌患者作為研究對象，患者年齡52.38±12.44歲，其中子宮內(nèi)膜樣腺癌156例，腺鱗癌18例，棘腺癌9例，子宮乳頭狀漿液性腺癌5例，透明細胞腺癌2例。

納入標準：（1）入組患者均經(jīng)手術(shù)病理檢查明確診斷為子宮內(nèi)膜樣癌;（2）患者入組前未接受過包括內(nèi)分泌、放療或化療等可能影響腫瘤細胞的方案;（3）本實驗經(jīng)濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院倫理委員會批準，征得患者知情同意。

1.2 主要試劑

兔抗人DAPK3多克隆抗體，兔抗人cMyc多克隆抗體均自Abcam公司。免疫組化試劑盒及DAN試劑盒均購自北京中山金橋公司。

1.3 方法

操作步驟均嚴格按照試劑盒上的說明書進行，所有標本靜4%中性甲醛固定，石蠟包埋，3μm切片，HE染色后，抗原修復(fù)，修復(fù)后進行DAB顯色，蘇木精復(fù)染封片。

1.4 染色結(jié)果判定

由3名病理科副高級職稱醫(yī)師分別獨立閱片，取3人計分平均值。染色結(jié)果判讀采用半定量法，隨機選取10個高倍視野，每個視野觀察至少100個細胞，計算陽性細胞數(shù)百分比。結(jié)果分為胞質(zhì)染色和陽性細胞數(shù)兩部分，胞質(zhì)染色呈淡黃色、黃色、棕黃色分別計1分、2分、3分;每個高倍視野下陽性細胞數(shù)百分比以5%一下、5%～20%、21%～50%、51%～75%、75%以上分別計0分、1分、2分、3分、4分。將兩種方式的計分結(jié)果相乘，結(jié)果分為陰性（0分）、低表達（1～4分）、高表達（≥5分），低表達與高表達均為陽性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

計數(shù)資料采用樣本數(shù)表示，采用卡方檢驗，計量資料采用t檢驗，統(tǒng)計采用SPSS18.0錄入并分析結(jié)果，以P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

患者一般情況見表1：

2.2各分期ER、PR、DAPK3、c-Myc表達情況

本研究檢出FIGOI期121例、II期39例、III期30例，各分期ER、PR、DAPK3、c-Myc表達情況見表2：

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤，以腺癌最為常見，是女性生殖道三大惡性腫瘤之一，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%，近年來發(fā)病率呈上升趨勢。原癌基因、抑癌基因、激素代謝相關(guān)基因的突變和多態(tài)性均會增加子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病風(fēng)險。子宮內(nèi)膜在單一的雌激素持續(xù)作用下且缺乏孕激素對抗會發(fā)生癌變，雌、孕激素通過調(diào)節(jié)雌激素受體 （estrogen receptor，ER）、孕激素受體（prosgestogen receptor，PR）來發(fā)揮作用，ER主要以 ERα和ERβ兩種形式存在，當(dāng)前有研究發(fā)現(xiàn)，ERα可能作為治療靶點參與UCEC內(nèi)分泌治療[5]。同樣地，在多數(shù)激素依賴型UCEC患者子宮內(nèi)膜中可發(fā)現(xiàn)PR，但PR水平其在漿液性癌、透明細胞癌中幾乎不表達[6]。因此，通過降低子宮內(nèi)膜對雌、孕激素的敏感性，可降低子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生風(fēng)險。

死亡相關(guān)蛋白激酶-3（Death-associated protein kinase-3;DAPK3）隸屬于凋亡激酶家族，參與多種機體功能，如平滑肌收縮、細胞增殖、細胞凋亡、炎癥反應(yīng)等過程[7]，近年來作為腫瘤細胞凋亡因子而被廣泛研究[8]。由于DAPK3 具有促細胞凋亡作用，所以多數(shù)學(xué)者都認為DAPK3具有抑制腫瘤細胞進展的作用。有研究顯示[7]，低表達的DAPK-3與子宮內(nèi)膜癌患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。

C-myc基因是原癌基因Myc家族成員，在細胞核內(nèi)受異常Wnt信號通路調(diào)控，具有調(diào)控細胞增殖分化和凋亡過程的作用。在UCEC患者中，C-myc的過度表達與患者的病理分期、惡性程度、生存期等密切相關(guān)，C-myc高表達率與UCEC的惡變程度呈正相關(guān)[9]，F(xiàn)IGO分期越高，C-myc高表達率越高;并且C-myc高表達者5年生存率明顯低于低表達患者。這說明C-myc的過度表達參與了UCEC細胞分化、惡變及擴散等多個過程，對患者的預(yù)后有顯著影響[10]。

我們選取的子宮內(nèi)膜癌病例包括FIGOI期121例、FIGOII期39例、FIGOIII期30例，研究結(jié)果顯示，F(xiàn)IGO分級越高的病例ER、PR、DAPK3越趨向于低表達，c-Myc相對趨向于高表達。這與前述研究結(jié)果相符，說明ER、PR、DAPK3、c-Myc的異常表達與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其可能與細胞增殖、凋亡功能的異常有關(guān)。

【參考文獻】

[1]Morice P，Leary A，Creutzberg C，et al.Endometrial cancer[J].Lancet，2016，387（123）：1094-108.

[2]Matias Guiu X，Prat J.Molecular pathology of endometrial carcinoma[J].Histopathology，2013，62（1）：111-23.

[3]Baser E，Gungor T，Togrul C，et al.Preoperative prediction of poor prognostic parameters and adjuvant treatment in women with pure endometrioid type endometrial cancer：what is the significance of tumor markers[J].Eur J Gynaecol Oncol，2014，35（5）：513-8.

[4]Usui T，Okada M，Yamawaki H.Zipper interacting protein kinase（ZIPK）：function and signaling[J].Apoptosis，2014，19（2）：387-91.

[5]Li X，Gao Y，Tan M，et al.Expression of HE4 in endometrial cancer and its clinical significance[J].Biomed Res Int，2015（13）：437468.

[6]Li J，Deng Z，Wang Z，et al.Zipper-interacting protein kinase promotes epithelial-mesenchymal transition，invasion and metastasis through AKT and NF-k B signaling and is associated with metastasis and poor prognosis in gastric cancer patients[J].Oncotarget，2015，6（10）：8323-38.

[7]史艷平，史素娥.DAPK3、c-Myc在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達特征及對患者預(yù)后的影響[J].醫(yī)藥論壇雜志，2018，39（08）：88-90.

[8]程幸，陳小麗.子宮內(nèi)膜癌血流動力學(xué)參數(shù)與病灶內(nèi)惡性生物學(xué)分子表達量的相關(guān)性研究[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2017，23（19）：2732-2734+2738.

[9]陳晨，郭遂群.子宮內(nèi)膜癌組織中DAPK3和c-Myc的表達及其與患者預(yù)后的關(guān)系[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2016，36（06）：863-869.

[10]張金玲，李巖.子宮內(nèi)膜癌的分子生物學(xué)進展[J].中國婦幼保健，2018，33（15）：3588-3590.