劉景喜，蘆 娜，劉連超，彭傳文，周 娟，馮晉芳，王文杰，南春朋，云 水，潘振亮

（1.天津市畜牧獸醫(yī)研究所，天津 300381；2.天津嘉立荷畜牧有限公司，天津 300404）

隨著我國畜牧業(yè)集約化和現(xiàn)代化水平的提高以及可持續(xù)發(fā)展的要求，安全、綠色、高效的飼料添加劑的應(yīng)用更加廣泛。植物提取物中含有生物堿、皂苷、揮發(fā)油、單寧、多糖等多種生物活性物質(zhì)，具有促生長、抗氧化、殺菌等多種生物學(xué)功能。辣椒油樹脂是從辣椒中提取的一種黑紅色粘稠狀液體，含有辣椒紅色素、辣椒堿、二氫辣椒堿、棕櫚酸、亞麻酸乙酯等成分，廣泛應(yīng)用于多種領(lǐng)域[1]。在豬、肉雞上的研究發(fā)現(xiàn)，辣椒油樹脂能夠緩解氧化應(yīng)激[2]，促進(jìn)腸道健康[3-4]。此外，辣椒油樹脂的辛辣味能夠刺激肉牛大量飲水從而促進(jìn)采食[5-6]。丁香酚提取自丁香樹的花朵、莖和葉，丁香酚植物精油作為香味劑添加到動物日糧中能夠起到誘食作用，增加采食量，提高動物生產(chǎn)性能[7]。肉桂醛系醛類化合物，在肉桂等植物中含量較多，天然產(chǎn)物主要存在于肉桂油、桂皮油、風(fēng)信子油、霍香油、玫瑰油等中，肉桂醛也可被人工合成[8]。研究發(fā)現(xiàn)，肉桂醛能夠顯著提高奶牛尿中嘌呤衍生物的排出量，減少氮排泄、提高奶牛產(chǎn)奶性能[9]。

目前，辣椒油樹脂、丁香酚、肉桂醛三者復(fù)合物對奶牛產(chǎn)奶量、乳成分和血液指標(biāo)的影響尚未見報道。本試驗旨在研究日糧添加復(fù)合植物提取物（辣椒油樹脂、丁香酚、肉桂醛）對奶牛產(chǎn)奶量、乳成分和血液生理生化指標(biāo)的影響，為奶牛健康、高效養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)合植物提取物（XTRACT?7065潘牛樂—反芻動物專用型）每克含辣椒油樹脂3.5%、肉桂醛5.5%、丁香酚9.5%，購自瑞士Pancosma公司。

1.2 試驗設(shè)計 試驗于2017年11月—2018年1月在天津嘉立荷畜牧有限公司山東分公司進(jìn)行。選擇25～27月齡、1胎、泌乳天數(shù)（67±1）d、產(chǎn)奶量（32±5）kg/d且健康的泌乳高峰期荷斯坦奶牛40頭，隨機(jī)分為對照組和試驗組，每組20個重復(fù)，每個重復(fù)1頭牛，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組飼喂基礎(chǔ)日糧+1 g/（d·頭）復(fù)合植物提取物（廠家推薦用量）。試驗預(yù)試期3 d，正試期60 d。預(yù)試期間復(fù)合植物提取物添加量由0.25 g/d逐漸增加至1 g/d，由基礎(chǔ)日糧過渡至試驗日糧。全混合日糧（TMR）組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 TMR組成及營養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 采用散欄飼養(yǎng)，每日飼喂3次TMR（04:00，12:30，20:30），牛只自由采食，控制每天的飼喂量使剩料量在3%～5%。每日機(jī)械擠奶3次（06:00，14:00，22:00）。

1.4 樣品采集及指標(biāo)測定

1.4.1 血液樣品采集及指標(biāo)測定 試驗正試期第60天，于晨飼后3 h采用真空采血管從尾靜脈采血4 mL。其中2 mL血液裝入含有肝素鈉的抗凝管內(nèi)，用于檢測血液常規(guī)指標(biāo)。另外2 mL血液裝入不含肝素鈉的真空采血管，血凝后在4 條件下，以3 500 r/min離心10 min，分離血清，置于-20 冰箱凍存，待測。

血液常規(guī)指標(biāo)測定：利用全自動血液分析儀測定全血中的白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞百分比（LYM%）、中值細(xì)胞百分比（MID%）、中性粒細(xì)胞百分比（GRA%）、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血小板（PLT）、降鈣素原（PCT）。

血清生理生化指標(biāo)測定：總蛋白（TP）采用雙縮脲法，白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法，球蛋白（GLB）、葡萄糖（GLU）采用葡萄糖氧化酶法，尿素氮（BUN）采用紫外-谷氨酸脫氫酶法，鉀（K）采用電極法，鈉（Na）采用焦銻酸鉀比濁法，氯（Cl）采用硫氰酸汞法，鈣（Ca）采用偶氮胂III法，磷（P）采用紫外法，鎂（Mg）采用甲基麝香草酚藍(lán)法，游離脂肪酸（NEFA）采用ACS-ACOD法，β-羥丁酸采用β-羥丁酸脫氫酶法。

1.4.2 奶樣采集及指標(biāo)測定 試驗正試期第60天采集奶樣。采樣前，向每份樣品瓶中加入防腐劑重鉻酸鉀0.03 g，按照早、中、晚4:3:3的比例混合成40 mL。采用多功能乳制品分析儀CombiFoss FT+（丹麥FOSS）檢測乳脂率、乳蛋白率、體細(xì)胞數(shù)（SCC）、乳尿素氮（MUN）。

1.5 統(tǒng)計分析 使用Excel軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理。使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行獨立樣本t檢驗，以P＜0.05表示差異顯著，以P＜0.01表示差異極顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合植物提取物對奶牛產(chǎn)奶量及乳成分的影響 由表2可知，與對照組相比，試驗組奶牛產(chǎn)奶量提高2.37%（P＞0.05）。日糧添加復(fù)合植物提取物有降低牛奶體細(xì)胞數(shù)、尿素氮含量的趨勢（P＞0.05），對乳脂率、乳蛋白率、脂蛋比無顯著影響（P＞0.05）。

表2 復(fù)合植物提取物對奶牛產(chǎn)奶量及乳成分的影響

2.2 復(fù)合植物提取物對奶牛血液常規(guī)指標(biāo)的影響 由表3可知，對照組與試驗組奶牛血液WBC、LYM%、MID%、GRA%、RBC、HGB、PLT、PCT差異均不顯著（P＞0.05）。

表3 復(fù)合植物提取物對奶牛血液常規(guī)指標(biāo)的影響

2.3 復(fù)合植物提取物對奶牛血清生化指標(biāo)的影響 由表4可知，對照組和試驗組TP、ALB、GLB、GLU、BUN、K、Na、Cl、Ca、P、Mg、NEFA、β-羥丁酸含量無顯著差異（P＞0.05）。

表3 復(fù)合植物提取物對奶牛血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 復(fù)合植物提取物對奶牛產(chǎn)奶量的影響 目前，尚未見有關(guān)辣椒油樹脂、丁香酚、肉桂醛三者復(fù)合物對奶牛產(chǎn)奶量影響的報道，僅有添加單種或2種成分的少量研究。奶牛日糧中添加250、500、1 000 mg/kg辣椒油樹脂對產(chǎn)奶量無顯著影響[10]。日糧添加瘤胃保護(hù)辣椒油樹脂，能夠在一定程度上提高產(chǎn)奶量，但影響不顯著[11]。而采用灌注方式，向奶牛皺胃中灌注2 g/d辣椒油樹脂，產(chǎn)奶量顯著降低[12]。Benchaar[13]研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加50 mg/kg肉桂油或肉桂醛對產(chǎn)奶量均無顯著影響。日糧添加525 mg/d丁香酚和肉桂醛的復(fù)合物對奶牛產(chǎn)奶量無顯著影響[14]。Wall等[15]報道，日糧添加200、600 mg/d丁香酚和肉桂醛的復(fù)合物可顯著提高初產(chǎn)牛的產(chǎn)奶量，而在經(jīng)產(chǎn)牛上顯著降低產(chǎn)奶量。本試驗中，日糧添加1 g/（d·頭）復(fù)合植物提取物有提高奶牛產(chǎn)奶量的趨勢，這可能與使用劑量、飼喂時間以及奶牛生理階段有關(guān)。

3.2 復(fù)合植物提取物對奶牛乳成分的影響 植物提取物對奶牛乳成分的影響不盡相同。張成喜等[9]研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加12、18 g/（d·頭）肉桂醛極顯著提高奶牛乳脂率，添加12、18、24 g/（d·頭）肉桂醛可極顯著提高乳蛋白率、極顯著降低體細(xì)胞數(shù)。日糧添加350 mg/d丁香酚和肉桂醛的復(fù)合物，飼喂6周后，乳蛋白率顯著提高，乳尿素氮含量顯著降低[15]。Wall等[15]報道，日糧添加200 mg/d丁香酚和肉桂醛復(fù)合物可極顯著提高初產(chǎn)牛的乳脂率。然而，其他研究表明植物提取物對奶牛乳成分無顯著影響。日糧添加50 mg/kg肉桂油或肉桂醛對乳脂率、乳蛋白率、乳尿素氮含量均無顯著影響[13]。無論灌服還是日糧添加辣椒油樹脂，對乳脂率、乳蛋白含量、乳尿素氮含量、體細(xì)胞數(shù)均無顯著影響[10,12]。

本試驗中，日糧添加該復(fù)合植物提取物有降低乳脂率、脂蛋比、體細(xì)胞數(shù)及尿素氮含量的趨勢。試驗組奶牛乳脂率的降低可能與產(chǎn)奶量升高、乳脂被稀釋有關(guān)[16]。本試驗中試驗組奶牛的體細(xì)胞數(shù)有降低趨勢，與張成喜等[9]的報道類似，這可能是由于丁香酚、肉桂醛具有抗菌、消炎作用[7-8]，能夠減少乳房中的病原微生物，從而降低體細(xì)胞數(shù)。乳尿素氮含量反映日糧蛋白質(zhì)利用率。本試驗中，試驗組奶牛乳尿素氮含量有降低趨勢，提示該復(fù)合植物提取物能夠在一定程度上提高蛋白質(zhì)利用率。

3.3 復(fù)合植物提取物對奶牛血液常規(guī)指標(biāo)的影響 血液對保證機(jī)體正常的功能調(diào)節(jié)、新陳代謝及體內(nèi)外環(huán)境平衡起重要作用，因此血常規(guī)檢測和分析對了解各種早期病變、疾病性質(zhì)發(fā)生發(fā)展及治療具有一定意義[17]。在奶牛生產(chǎn)中，血液指標(biāo)通常用來估測奶牛的健康和代謝狀況。研究發(fā)現(xiàn)，灌服辣椒油樹脂僅顯著提高LYM%，對其他血常規(guī)指標(biāo)無影響[12]。日糧添加辣椒油樹脂線性提高GRA%、LYM%[10]。在本試驗中，日糧添加復(fù)合植物提取物對奶牛血常規(guī)各項指標(biāo)均無顯著影響，且各項指標(biāo)均維持在正常范圍內(nèi)，說明該種復(fù)合植物提取物在奶牛血液中具有很快的代謝和吸收速率，對血細(xì)胞的正常數(shù)量無影響。

3.4 復(fù)合植物提取物對奶牛血清生化指標(biāo)的影響 血清中蛋白質(zhì)的作用在于維持血漿滲透壓，參與營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運和保持組織蛋白質(zhì)的動態(tài)平衡等[18]。血清TP、ALB及GLB濃度的變化可反映肝臟功能、機(jī)體代謝水平以及免疫功能的狀況，血清ALB濃度高有利于提高動物機(jī)體的代謝水平和免疫力[19]。本試驗中，試驗組奶牛血清TP、ALB及GLB含量較對照組并無顯著變化，且均在正常范圍內(nèi)[20]，說明該種復(fù)合植物提取物對奶牛機(jī)體代謝水平和免疫功能無顯著影響。

血清中的GLU含量反映動物機(jī)體對糖的吸收、轉(zhuǎn)運和代謝的動態(tài)平衡，通常情況下，血清GLU含量保持穩(wěn)定[21]。奶牛血清GLU正常值范圍2.3～4.1 mmol/L[22]。本試驗中，日糧添加復(fù)合植物提取物對奶牛血清GLU含量影響不顯著，并且2組奶牛GLU含量均在正常范圍內(nèi)，提示該種復(fù)合植物提取物不影響奶牛糖代謝。

血清BUN與體內(nèi)蛋白質(zhì)利用率相關(guān)，在體內(nèi)當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)利用率降低時，BUN含量增加，而BUN含量低表明機(jī)體蛋白質(zhì)合成率較高[23]。本試驗中，試驗組BUN含量與對照組差異不顯著，提示該復(fù)合植物提取物不影響機(jī)體蛋白質(zhì)利用率。

盡管動物體內(nèi)的礦物質(zhì)元素只占其體重的4%～5%，卻發(fā)揮著重要作用，包括構(gòu)成機(jī)體組織和器官、參與維持和調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)環(huán)境，還是體內(nèi)多種酶系統(tǒng)中的構(gòu)成成分或激活劑[24]。奶牛血清離子濃度與飼料供給量、奶牛的泌乳階段、健康狀況、產(chǎn)奶量、繁殖性能、鈣磷代謝及代謝病的發(fā)生與否等密切相關(guān)[25-26]。本試驗中，日糧添加復(fù)合植物提取物對奶牛血清礦物元素濃度無顯著影響，并且所有指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)[20]。

血液中的NEFA廣泛參與機(jī)體循環(huán)代謝，其濃度的提高是機(jī)體動用體脂的重要標(biāo)志，同時也伴隨甘油三酯濃度的增加[27]。β-羥丁酸主要由NEFA在肝臟中氧化合成以及經(jīng)瘤胃吸收的丁酸轉(zhuǎn)化而來，反芻動物可利用β-羥丁酸作為乳脂合成的部分前體物[21]。奶牛血清中的NEFA和β-羥丁酸含量不同程度提高，表明奶牛體脂動員增加，可提高乳脂率。本試驗中，試驗組奶牛NEFA、β-羥丁酸含量均無顯著變化，提示該復(fù)合植物提取物不影響奶牛脂肪代謝。

天然植物提取物中含有的免疫活性成分具有改善血液生化指標(biāo)、增強(qiáng)抗病能力的作用。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加不同水平辣椒油樹脂能夠顯著提高BUN含量，顯著降低血K含量，對NEFA、胰島素、GLU、CREA、TP、ALB、GLB、CHOL、AMY、Ca、Na、Cl等含量無顯著影響[10]。本試驗中，日糧添加復(fù)合植物提取物對奶牛血清各項生理生化指標(biāo)無顯著影響，這可能是由于通常情況下奶牛血液成分及理化性質(zhì)較為穩(wěn)定，且整個試驗期內(nèi)的飼養(yǎng)條件和日糧結(jié)構(gòu)未發(fā)生較大改變，因此，奶牛血液各項指標(biāo)無顯著變化。

綜合分析，辣椒油樹脂、丁香酚和肉桂醛復(fù)合植物提取物應(yīng)用效果優(yōu)于單種或2種成分的植物提取物，推測可能是由于植物原料間經(jīng)過復(fù)合提取發(fā)揮了組合效應(yīng)。植物種類的繁雜以及提取方法的不同導(dǎo)致植物提取物的有效活性成分及含量差別較大[28]。此外，辣椒油樹脂、丁香酚和肉桂醛復(fù)合物富含生物堿、多酚及醛類化合物，這些生物活性物質(zhì)具有抑菌、消炎等功能，可以提高動物機(jī)體免疫力進(jìn)而提高生產(chǎn)性能[7-8,29]。因此，推測辣椒油樹脂、丁香酚和肉桂醛3種成分通過協(xié)同作用，從而提高奶牛生產(chǎn)性能。

4 結(jié) 論

在本試驗條件下，日糧添加1 g/（d·頭）復(fù)合植物提取物能夠在一定程度上提高奶牛產(chǎn)奶量、降低牛奶體細(xì)胞數(shù)和MUN含量，但不影響血液生理狀態(tài)。