趙戈昱，王金花，劉慧

1內蒙古醫(yī)科大學研究生院，呼和浩特 010059

2內蒙古自治區(qū)腫瘤醫(yī)院病理科，呼和浩特 010020

卵巢癌的病死率居婦科惡性腫瘤的首位，目前，卵巢癌患者的5年生存率僅為30%～50%[1]，缺乏靈敏度和特異度高的早期診斷技術及長期有效的治療方案，是卵巢癌病死率居高不下的主要原因。因此，尋找新的腫瘤標志物和治療靶標一直都是卵巢癌研究領域的熱點。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）可調控基因的表達情況，成為近年來臨床研究的熱點。本文就lncRNA在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過程中的作用機制及研究進展進行綜述。

1 lncRNA的作用機制

lncRNA是一類長度為200～100 000 nt但不具備編碼蛋白能力的RNA片段。與微小RNA（microRNA，miRNA）等小分子非編碼RNA相比，lncRNA近年來才開始逐漸受到關注。lncRNA能夠在染色質修飾、轉錄過程中或轉錄后調控下游基因的表達，進而參與細胞增殖、侵襲及凋亡等多種生物學過程，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。lncRNA主要通過其二級結構和參與基因表達的表觀遺傳水平，對特定蛋白質復合物間的相互作用進行調控，如多梳家族蛋白（polycomb group protein，PcG）可抑制多梳蛋白抑制性復合物1（polycomb repressive complex 1，PRC1）、多梳蛋白抑制性復合物 2（polycomb repressive complex 2，PRC2）和三胸家族（trithorax group，TrxG）復合物MLL的表達[2-4]。lncRNA與PRC1、PRC2或MLL復合物結合，能夠靶向特定基因的基因座，雖然這種靶向特定目標的確切機制尚未完全明確[5]。Mondal等[6]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA母系表達基因3（maternally expressed gene 3，MEG3）可將zeste 2多梳抑制復合物2亞基增強子（enhancer of zeste 2 polycomb repressive complex 2 subunit，EZH2）靶向特定的基因組位點。MEG3中富含的“GA”序列可識別轉化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β），并在TGF-β途徑基因遠端的調控元件中形成DNADNA-RNA三聯(lián)體結構。MEG3和EZH2具有共同的靶基因，即TGF-β途徑基因，MEG3和EZH2結合使組蛋白H3第27位賴氨酸三甲基化（histone H3 trimethyl at edatlysine 27，H3K27me3）抑制標記在這些基因座上，抑制TGF-β途徑基因的表達。研究顯示，三聯(lián)體可能通過參與染色質修飾的lncRNA靶向OSF特異性基因而形成[7]。

2 BMI 1和EZH 2在卵巢癌中的作用

原癌基因B細胞特異性小鼠白血病病毒插入位點1[B lymphoma Mo-MLVinsertion region 1 homolog(mouse)，BMI1]是PRC1復合物的重要因子，可調控lncRNA的表達。研究顯示，BMI1在上皮性惡性腫瘤中發(fā)揮原癌基因的作用，在乳腺癌、宮頸癌、子宮內膜癌和卵巢癌中過表達[8-9]。BMI1的表達情況與卵巢癌組織學分級和臨床分期密切相關，并與化療藥物（如順鉑）的耐藥性有關[10]。此外，卵巢癌中miRNA-15a和miRNA-16的表達下調，且BMI1是二者的直接靶標。研究顯示，卵巢癌患者miRNA-15a和miRNA-16的表達與BMI1呈負相關[9]，并可通過抑制BMI1的表達，抑制卵巢癌細胞的增殖能力。

EZH2是PRC2復合物的重要因子，研究顯示，EZH2表達上調與晚期卵巢癌患者的總生存期較短密切相關[11]。抑制EZH2的表達，可抑制卵巢癌細胞的增殖能力，以及體外細胞的侵襲和（或）遷移能力。卵巢癌組織中miRNA-101表達情況與國際婦產科聯(lián)盟（International Federation of Gynecolo-gy and Obstetrics，F(xiàn)IGO）分期相關，但與組織學分級無關。miRNA-101表達下調甚至缺失可導致機體組織細胞周期紊亂，促進細胞分裂和增殖，最終形成腫瘤。Semaan等[12]研究顯示，F(xiàn)IGO分期為ⅡB～Ⅳ期的卵巢癌患者中，miRNA-101表達下調，且其表達與組織學分級呈負相關。此外，miRNA-101在卵巢癌中也可直接靶向EZH2，并與其表達呈負相關。與對順鉑敏感的卵巢癌細胞相比，miRNA-101在順鉑耐藥的卵巢癌細胞中表達下調，且其異常表達可使順鉑耐藥的卵巢癌細胞重新敏化[13]。上調miRNA-101的表達，可上調H3K27me3（通常由EZH2沉積的染色質標記）在抑癌基因p21啟動子處的表達，抑制其在p21轉錄處的表達[12,14]。表明miRNA-101通過調控EZH2的表達在卵巢癌中發(fā)揮生物學作用。

3 H19在卵巢癌中的作用

雖然lncRNA的功能多樣，但僅少數(shù)功能涉及卵巢癌生物學，且僅部分lncRNA被認為是可能的生物標志物。H19是被研究最廣泛的lncRNA之一，H19通過多種途徑與多種miRNA密切相關，形成一個復雜的調控網(wǎng)絡。正常情況下，H19在胚胎和胎盤組織以及成年人的肌肉組織中表達水平較高[15]。H19是在胎兒體內中表達水平較高的癌胚基因，但在嬰兒出生后，其表達多被抑制。除在胚胎發(fā)育中發(fā)揮作用[16]，H19還可通過對胰島素樣生長因子 2（insulin like growth factor 2，IGF2）基因的順式作用和轉染印記基因網(wǎng)絡來調控腫瘤的生長[17]，正常表達的H19可抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展，而IGF2基因的突變可上調H19的表達，從而促進腫瘤進展。研究發(fā)現(xiàn)，H19在包括卵巢癌在內的多種惡性腫瘤中表達水平較高[18-21]，表明H19的異常表達可能在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[22]。H19表達上調與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、腫瘤細胞的周期進展和細胞遷移有關，H19可通過miRNA let-7促進腫瘤細胞的遷移和侵襲，在部分miRNA let-7靶基因調控腫瘤細胞轉移的模型中，H19具有miRNA let-7競爭性內源RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）的作用[23]。由此可見，H19可能通過抑制miRNAlet-7家族成員來促進卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。

H19作為miRNA-675的前體，在不同來源的腫瘤細胞中發(fā)揮致癌作用。miRNA-675可直接靶向結直腸癌和肝細胞癌中的抑癌基因RB[24-26]。miRNA-675通過靶向鈣黏蛋白13促進神經(jīng)膠質瘤細胞的遷移和侵襲[27]。H19在化學抗性A2780卵巢癌細胞系中的表達水平高于敏感性卵巢癌細胞系，且與耐藥細胞系中的間充質表型相關[28]，H19可通過miRNA-675抑制上皮標志物E-鈣黏蛋白（E-cadherin）的表達，并在誘導上皮-間充質轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）過程上調鋅指蛋白轉錄因子家族中的SLUG基因的表達。此外，H19表達上調可促進小鼠肺癌細胞的遷移和轉移能力。卵巢癌患者易產生化療耐藥性，且易侵襲腹膜，因此，進一步探討H19或miRNA-675的作用具有重要意義。

4 lncRNA在卵巢癌中的應用

隨著微陣列和深度測序等技術的不斷發(fā)展，部分研究試圖對卵巢癌中表達失調的lncRNA進行檢測。依據(jù)癌癥基因組圖譜（The Cancer Genome Atlas，TCGA）數(shù)據(jù)庫[29]的10 207個lncRNA的表達譜，結果顯示，1749個lncRNA對卵巢癌免疫反應型、間充質型、增殖型和分化型4種轉錄亞型之一可特異性表達。另一項研究重新分析了TCGA數(shù)據(jù)庫的數(shù)據(jù)，結果顯示，455個lncRNA以轉錄亞型特異性的方式向上或向下調節(jié)，這455個lncRNA包括核富集轉錄體1（nuclear paraspeckle assembly transcript 1，NEAT1）和尿路上皮癌相關1（urothelial cancer associated 1，UCA1）[30]。NEAT1可參與paraspeckles的形成過程[31]，并在Ⅲ期漿液性卵巢癌患者的113個其他基因中表達上調[32]。上調UCA1的表達，可能通過上調絲氨酸/精氨酸蛋白激酶1（serine/arginine protein kinase 1，SRPK1）的表達增加卵巢癌細胞對順鉑的耐藥性[33]，SRPK1是一種剪接因子蛋白激酶，但其對卵巢癌細胞對順鉑耐藥性的作用仍存在爭議[34]。

Perez等[35]研究結果顯示，lncRNA在卵巢癌組織和正常組織中的表達情況存在差異，但未顯示出功能差異。另一項對115個lncRNA的研究結果顯示，卵巢癌SKOV3細胞系中，lncRNA可被雌激素誘導，并在雌激素信號傳導的過程中調控細胞的遷移和侵襲[36]。表明lncRNA在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

5 小結與展望

與miRNA一樣，lncRNA也顯示了基因表達調控的復雜性。雖然僅有一小部分lncRNA的功能被驗證，但lncRNA在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中仍具有關鍵作用。lncRNA在卵巢癌中的作用已被證實，并將發(fā)揮越來越重要的作用。此外，通過ceRNA的基因表達調控模式使miRNA與lncRNA相互作用，這是另一個潛在的重要調控機制，需要進一步探索和定性。

從臨床角度來看，卵巢癌不同亞型之間的表達模式不同，lncRNA表達譜可能有助于區(qū)分卵巢癌組織學亞型。lncRNA單獨或與其他類型的標志物（miRNA、mRNA、蛋白質）結合，可進行抗腫瘤治療。lncRNA的表達情況可用于臨床療效或總反應率的預測，從而調整治療和護理方案，改善卵巢癌患者的預后。miRNA存在于血液和其他體液中，循環(huán)miRNA可作為卵巢癌診斷或預后的潛在預測標志物，為其他易獲得的生物標志物的應用開辟了新視角。目前，尚沒有研究報道卵巢癌患者的血清或血漿中存在lncRNA的表達，但前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平作為前列腺癌的診斷工具，以及循環(huán)中的長鏈非編碼RNA預測心臟重構（long intergenic non-coding RNA predicting cardiac remodeling，LIPCAR）水平可作為預測心肌梗死預后的評估指標[37-38]，已經(jīng)獲得了體液中l(wèi)ncRNA有意義使用的概念證據(jù)。

綜上所述，lncRNA為更好地探索卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機制創(chuàng)造了新機會。盡管目前的研究較少，大量lncRNA的作用和功能也尚未被證實，但對lncRNA的研究仍對包括卵巢癌在內的惡性腫瘤的治療具有深遠意義。