李瀟軒，李志輝，楊志強(qiáng)，朱 天，陳建清，黃鴻兵，韓 飛，潘建林，張翠林

(江蘇省淡水水產(chǎn)研究所，江蘇 南京 210017)

維生素C ，又稱抗壞血酸，作為動(dòng)物生長(zhǎng)所必需的微量營(yíng)養(yǎng)元素，在動(dòng)物機(jī)體生理代謝調(diào)節(jié)過(guò)程起著至關(guān)重要的作用，即在動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育、抗應(yīng)激、免疫等方面均具有促進(jìn)作用[1]。多數(shù)脊椎動(dòng)物自身具有合成維生素C的能力，但魚類體內(nèi)因缺乏L-2古洛內(nèi)酯氧化酶而不能自主合成維生素C，因此必須從食物中攝取，進(jìn)而滿足自身生長(zhǎng)發(fā)育的需求[2]。缺乏維生素C易導(dǎo)致魚類出現(xiàn)脊柱畸變、軟骨組織變異、體內(nèi)出血、鰭部腐爛及生長(zhǎng)減緩等癥狀[3-4]。

維生素C作為一種水溶性維生素，其晶體結(jié)構(gòu)非常不穩(wěn)定，易被氧化而失效，因此晶體維生素C不適合作為飼料添加劑直接使用[5]。因作為魚類生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)元素及自身的化學(xué)不穩(wěn)定性，維生素C一直是魚類飼料配方研究的重點(diǎn)。目前，魚類飼料添加維生素C的劑型包括維生素C鹽、包膜維生素C、維生素C衍生物。維生素C鹽(抗壞血酸鈉、抗壞血酸鈣)成本低、含量高，但穩(wěn)定性低；包膜維生素C是用一層膜(脂肪、乙基纖維素)包裹維生素C，以隔絕外界環(huán)境，穩(wěn)定性較高，含量在95%左右；維生素C衍生物(維生素C硫酸酯、維生素C多聚磷酸酯、維生素C單聚磷酸酯)是目前化學(xué)性質(zhì)最穩(wěn)定的化合物，可被動(dòng)物充分吸收利用[6]。

錦鯉(Cyprinuscarpio) 作為我國(guó)重要的觀賞魚養(yǎng)殖品種之一，因其體型優(yōu)美、色彩艷麗、花紋多樣、游姿健碩，故譽(yù)之為 “會(huì)游泳的藝術(shù)品”[7]。目前，對(duì)錦鯉飼料營(yíng)養(yǎng)的研究主要在蛋白質(zhì)、脂肪、增色劑等對(duì)錦鯉的生長(zhǎng)和體色的影響[8-10]。維生素C是常見的飼料添加劑之一，但魚類對(duì)不同劑型維生素C吸收利用的效果不同[11]。目前關(guān)于錦鯉對(duì)不同劑型維生素C的吸收利用效果未知。因此，本研究選取穩(wěn)定性較強(qiáng)的維生素C多聚磷酸酯和包膜維生素C作為維生素C劑型，探討不同劑型維生素C對(duì)錦鯉生長(zhǎng)的影響，旨在為錦鯉飼料選擇合適的維生素C劑型，并為錦鯉飼料維生素C添加劑的研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料與制備

參照孟素宣等錦鯉試驗(yàn)的飼料配方[12]配制試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料，基礎(chǔ)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)如表1所示。本試驗(yàn)以維生素C多聚磷酸酯(維生素C有效含量 35%)和包膜維生素C(維生素C有效含量 95%)作為飼料維生素C劑型。在試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料中，分別添加維生素C多聚磷酸酯142、285、428、571 mg/kg和包膜維生素C52、105、157、210 mg/kg，兩者折算成維生素C有效含量均為50、100、150、200 mg/kg(相關(guān)資料表明鯉魚對(duì)維生素C的需求量在100 mg/kg左右)。

表1 基礎(chǔ)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)[13]

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理

試驗(yàn)錦鯉選自江蘇省淡水水產(chǎn)研究所祿口基地繁育的同一批錦鯉苗種。挑選健康活潑、規(guī)格一致的錦鯉苗種于室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖池中，投喂基礎(chǔ)飼料馴化10 d，然后選擇大小一致、體重(121.41±1.83)g的錦鯉，隨機(jī)分為9組，每組35尾錦鯉幼魚，每組3個(gè)重復(fù)，每組分別投喂含有不同劑型和劑量的維生素C配制飼料，以投喂未添加維生素C的基礎(chǔ)飼料處理組為對(duì)照組，投喂添加維生素C飼料的處理組為試驗(yàn)組。試驗(yàn)在室內(nèi)水泥池(體積400 L)中進(jìn)行，飼養(yǎng)60 d。

養(yǎng)殖用水為曝氣后的自來(lái)水，試驗(yàn)期間水溫(26.3±2.5)℃，pH(7.6±0.3)，溶氧量>5.2 mg/L，氨氮含量<0.5 mg/L。每天早晚(08：00、18：00)各投喂1次，日投喂量占魚總體重的5%，每天根據(jù)錦鯉攝食、活動(dòng)水平適當(dāng)調(diào)整投喂量，并記錄錦鯉死亡數(shù)和重量。

1.3 樣品的采集與測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束后，并饑餓處理24 h后再分別稱取每組魚體質(zhì)量。每組隨機(jī)選取5尾錦鯉，取其肌肉和肝臟組織，然后根據(jù)南京建成生物研究所提供的試劑盒操作說(shuō)明測(cè)定組織維生素C含量。

1.4 計(jì)算公式

增重率(WGR，%)=(We+Wd-W0)/W0×100%

特定生長(zhǎng)(SGR，%/d)=(lnWe-lnW0)/T×100%

成活率(SR，%)=Ne/N0×100%

式中，We為結(jié)束時(shí)魚的體重量，g；Wd為死亡魚的體質(zhì)量，g；W0為魚的初始體質(zhì)量，g；T為試驗(yàn)天數(shù)，d；Ne為試驗(yàn)結(jié)束魚尾數(shù)；N0為試驗(yàn)初始魚尾數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析；

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的方法表示，并采用 SPSS 16.0軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中不同劑型和劑量維生素C對(duì)錦鯉生長(zhǎng)性能的影響

飼料中不同劑型和劑量維生素C對(duì)錦鯉生長(zhǎng)性能的影響見表2。錦鯉特定生長(zhǎng)率和增重率隨飼料中維生素C多聚磷酸酯和包膜維生素C添加量的增加而升高。試驗(yàn)組錦鯉的特定生長(zhǎng)率與對(duì)照組的差異不顯著(P>0.05)；添加維生素C多聚磷酸酯試驗(yàn)組錦鯉的增重率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，分別添加包膜維生素C 100、150和200 mg/kg 試驗(yàn)組的錦鯉增重率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。在添加維生素C有效劑量相同時(shí)，飼料添加維生素C多聚磷酸酯的錦鯉生長(zhǎng)速度快于添加包膜維生素C。錦鯉成活率隨飼料中維生素C多聚磷酸酯和包膜維生素C添加量的增加呈現(xiàn)先升高后趨于平穩(wěn)的趨勢(shì)，且試驗(yàn)組的錦鯉成活率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表2 飼料中不同劑型和劑量維生素C對(duì)錦鯉的生長(zhǎng)性能的影響

注：同行數(shù)據(jù)肩注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同此。

Notes：In the same row，values with different small letter superscripts meant significant difference(P<0.05).The same as below.

2.2 飼料中不同劑型和劑量維生素C對(duì)錦鯉肌肉和肝臟維生素C含量的影響

飼料中不同劑型和劑量維生素C對(duì)錦鯉肌肉和肝臟中維生素C含量的影響見表3。錦鯉肌肉和肝臟維生素C含量隨維生素C多聚磷酸酯和包膜維生素C添加量的增加呈先升高后趨于平穩(wěn)的趨勢(shì)(P<0.05)，肝臟的維生素C含量顯著高于肌肉(P<0.05)。在添加維生素C有效劑量相同時(shí)，飼料添加維生素C多聚磷酸酯組的錦鯉肌肉和肝臟中維生素C含量均高于包膜維生素C組。

表3 飼料中不同劑型和劑量維生素C對(duì)錦鯉肌肉和肝臟維生素C的影響

3 討論

維生素C衍生物和包膜維生素C具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性，是目前生產(chǎn)中常用的維生素C劑源。因理化性質(zhì)的不同，維生素C在魚類飼料中的應(yīng)用效果存在一定的差異。王道尊等通過(guò)向青魚飼料中添加維生素C-2-硫酸酯的研究發(fā)現(xiàn)，青魚會(huì)發(fā)生不同程度的維生素C缺乏癥，表明青魚不能通過(guò)攝取維生素C-2-硫酸酯來(lái)吸收維生素C[14]。冷向軍等研究發(fā)現(xiàn)，青魚攝食含有包膜維生素C和維生素C-2-多聚磷酸酯后，青魚畸形率可降至0，攝食添加維生素C-2-多聚磷酸酯飼料的青魚生長(zhǎng)速度要快于添加包膜維生素C[15]。由此可見，魚類對(duì)不同維生素C劑型的吸收利用存在差異性。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在維生素C有效含量同一水平條件下，攝食含有維生素C多聚磷酸酯飼料的錦鯉生長(zhǎng)速度比含有包膜維生素C快。這可能是由于包膜維生素C表面的包膜在飼料制作過(guò)程中，溫度、壓力和摩擦等因素一定程度上會(huì)氧化包膜維生素C，而維生素C多聚磷酸酯則是通過(guò)化學(xué)方法保護(hù)維生素C的有效活性，穩(wěn)定性高于包膜維生素C，因此飼料中添加維生素C多聚磷酸酯經(jīng)加工后的維生素C有效活性高于添加包膜維生素C。維生素C是多數(shù)魚類生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)元素。崔峰等研究表明，使用缺乏維生素C飼料投喂團(tuán)頭魴，團(tuán)頭魴表現(xiàn)為生長(zhǎng)發(fā)育緩慢[16]。本試驗(yàn)結(jié)果同時(shí)也證明魚類缺乏維生素C會(huì)導(dǎo)致魚類生長(zhǎng)減緩和死亡率升高。

魚類對(duì)不同劑型維生素C的吸收利用效果不同，因而魚類機(jī)體組織維生素C積累達(dá)到穩(wěn)定含量所需的維生素C劑型添加量也不同，且不同組織對(duì)維生素C的積累量存在一定的差異[17-18]。當(dāng)青魚飼料維生素C添加量在400 mg/kg(包膜維生素C)或200 mg/kg(維生素C-2-多聚磷酸酯)時(shí)，肝臟維生素C積累量達(dá)到穩(wěn)定[15]。本試驗(yàn)中，當(dāng)飼料中維生素C有效含量為150 mg/kg(維生素C多聚磷酸酯)或200 mg/kg(包膜維生素C)時(shí)，錦鯉肝臟和肌肉組織維生素C含量達(dá)到最高水平。這進(jìn)一步表明魚類對(duì)不同劑型維生素C的吸收利用效果不同。