藺俐仲，徐春志，方 英，張 海，陳 紅，袁翠霞，楊 峰

（1.貴陽(yáng)市草地站，貴州 貴陽(yáng) 550081；2.貴陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550081）

口蹄疫（Foot-and-mouth disease,FMD）是由口蹄疫病毒感染豬、牛、羊等偶蹄動(dòng)物引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，患病動(dòng)物臨床主要表現(xiàn)為口腔黏膜、舌面、唇、鼻鏡、蹄叉、乳頭等部位發(fā)生水泡，破潰形成爛斑，蹄痛臥地，嚴(yán)重者蹄殼邊緣潰裂或出現(xiàn)脫殼癥狀。該病在易感動(dòng)物中發(fā)病率可達(dá)100%，并形成大范圍流行[1]，嚴(yán)重影響畜牧業(yè)乃至整個(gè)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的健康持續(xù)發(fā)展，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，甚至還會(huì)帶來(lái)政治影響，素有“政治經(jīng)濟(jì)病”之稱[2]。由于FMD危害大，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織列為A類動(dòng)物傳染病之首[3]，我國(guó)也將其列為一類動(dòng)物疫病。

口蹄疫病毒共有7個(gè)血清型，不同血清型之間不能產(chǎn)生交叉免疫反應(yīng)，口蹄疫病毒的血清型與流行地域存在密切關(guān)系，我國(guó)發(fā)生的口蹄疫疫情中，已經(jīng)證實(shí)畜群主要遭受O型和A型流行毒株的侵襲[4]。為有效控制口蹄疫的發(fā)生與流行，目前國(guó)內(nèi)主要采取給易感動(dòng)物接種疫苗的措施，而疫苗免疫效果的好壞直接關(guān)系到口蹄疫的控制效果。為此，筆者開(kāi)展了豬O型口蹄疫母源抗體測(cè)定及其O型滅活疫苗免疫效果評(píng)價(jià)，旨在探索一套合理的免疫程序，以指導(dǎo)貴陽(yáng)市養(yǎng)豬場(chǎng)口蹄疫的防控工作，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 2017年10月16日至2018年5月18日，分別選取貴陽(yáng)富之源農(nóng)業(yè)科技有限公司（A豬場(chǎng)）和貴陽(yáng)臺(tái)農(nóng)種養(yǎng)殖有限公司（B豬場(chǎng)）同一欄舍剛分娩的仔豬各100頭，分成4個(gè)組，即A1、A2、B1、B2，每組50頭。A1和B1組用于測(cè)定母源抗體，A2和B2組用于測(cè)定疫苗免疫抗體，每次試驗(yàn)每組各隨機(jī)選取40頭采集樣本待檢。

1.1.2 疫苗 豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株）購(gòu)自中農(nóng)威特生物科技股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：P170510J。

1.1.3 檢測(cè)試劑盒 豬O型口蹄疫病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司，生產(chǎn)批號(hào)：170403。

1.2 方法

1.2.1 豬O型口蹄疫母源抗體消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)測(cè)定 新生仔豬出生后未吃初乳前進(jìn)行第1次采血，以后7、14、21、28、35、42、49 日齡采血分離血清，進(jìn)行 O 型口蹄疫抗體檢測(cè)，結(jié)果判定嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2 豬群首次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)測(cè)定 試驗(yàn)豬群首次免疫O型口蹄疫滅活疫苗后7、14、21、28、35、42、49 d采血分離血清，進(jìn)行O型口蹄疫抗體檢測(cè)，疫苗免疫劑量嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.3 豬群二次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)測(cè)定 試驗(yàn)豬群二次免疫O型口蹄疫滅活疫苗后7、14、21、28、40、60、90、120 d采血分離血清，進(jìn)行O型口蹄疫抗體檢測(cè)，疫苗免疫劑量嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 豬O型口蹄疫母源抗體消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果

表1檢測(cè)結(jié)果表明，新生仔豬出生后未吃初乳前具有一定的口蹄疫抗體保護(hù)水平，但抗體保護(hù)率較低，達(dá)不到保護(hù)水平；而吃初乳后抗體水平迅速上升，7日齡達(dá)到高峰，平均為85.0%，隨后維持在一個(gè)較高的水平，一直持續(xù)到28日齡，35日齡后抗體水平迅速降低，至42日齡回落近臨界值。

表1 豬O型口蹄疫母源抗體消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果 %

2.2 豬群首次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果

由于母源抗體水平過(guò)高會(huì)干擾疫苗免疫效果，因此，應(yīng)該在母源抗體水平不高的情況下對(duì)豬群進(jìn)行首次免疫。根據(jù)上述對(duì)仔豬母源抗體水平測(cè)定結(jié)果，42日齡時(shí)平均抗體水平接近臨界值，本試驗(yàn)選擇40日齡時(shí)進(jìn)行首次免疫，首次免疫后抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。表2檢測(cè)結(jié)果表明，仔豬群40日齡首免后抗體保護(hù)水平有所上升，首免后28 d抗體水平達(dá)到高峰，但抗體保護(hù)水平不高，平均抗體保護(hù)率為78.75%，42～49 d抗體水平下降至臨界值。

表2 豬群首次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果 %

2.3 豬群二次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果

經(jīng)分析豬群首次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果，將豬群二次免疫時(shí)間確定為首免后45 d進(jìn)行，二次免疫后抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。表3檢測(cè)結(jié)果表明，豬群85日齡二次免疫后抗體保護(hù)水平迅速上升，二次免疫后21～28 d抗體保護(hù)水平達(dá)到高峰，隨后緩慢下降，但一直能夠達(dá)到保護(hù)水平，直至二次免疫后120 d抗體保護(hù)水平回落近臨界值。

表3 豬群二次免疫抗體水平消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果 %

3 討論與小結(jié)

3.1 通過(guò)對(duì)仔豬母源抗體進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，新生仔豬未吃初乳前具有較低的抗體保護(hù)水平，這說(shuō)明在妊娠期間胎兒通過(guò)胎盤(pán)從母體獲得了部分母源抗體。吃初乳后抗體迅速上升，7日齡達(dá)到高峰，隨后維持在一個(gè)較高水平，一直持續(xù)到28日齡，35日齡后抗體水平迅速降低，至42日齡回落近臨界值，這說(shuō)明母乳是仔豬獲得高質(zhì)量母源抗體的主要途徑，由于規(guī)?；i場(chǎng)通常在30日齡斷乳，于是斷乳后母源抗體迅速下降。

3.2 仔豬群首次免疫后抗體保護(hù)水平雖有上升，但平均抗體保護(hù)水平不高，而二次免疫后抗體保護(hù)水平迅速上升，并長(zhǎng)時(shí)間維持在一個(gè)較高水平，這是由于首免后機(jī)體產(chǎn)生的抗體以IgM為主，能在短期內(nèi)中和大量抗原，但與抗原的結(jié)合力較弱，在體內(nèi)維持時(shí)間較短，因此建議首免后45 d進(jìn)行加強(qiáng)免疫。

3.3 規(guī)?；i場(chǎng)主要病毒性疫病綜合防控與凈化研究項(xiàng)目課題組考慮到不同豬場(chǎng)的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件有所不同，因此選擇了2個(gè)規(guī)模化程度較高豬場(chǎng)的豬群作為本次研究的試驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)對(duì)2個(gè)試驗(yàn)豬場(chǎng)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析，其差異不顯著，確保了試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

3.4 合理的疫苗免疫程序是預(yù)防豬口蹄疫的有效途徑。因此，為了探索一套適合于貴陽(yáng)市規(guī)?；i場(chǎng)O型口蹄疫滅活疫苗免疫程序，以指導(dǎo)貴陽(yáng)市規(guī)?；i場(chǎng)口蹄疫的防控工作，規(guī)?；i場(chǎng)主要病毒性疫病綜合防控與凈化研究項(xiàng)目課題組開(kāi)展了上述試驗(yàn)研究，通過(guò)對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，建議免疫程序如下：仔豬40日齡首免O型口蹄疫滅活疫苗，首免后45 d進(jìn)行二免，以后每4個(gè)月加強(qiáng)免疫1次。此外，豬場(chǎng)還應(yīng)該加強(qiáng)豬群的飼養(yǎng)與管理、疫苗的質(zhì)量與操作以及嚴(yán)格引種檢疫等，只有這樣才能有效減少豬場(chǎng)口蹄疫的發(fā)生，從而減少養(yǎng)豬業(yè)的損失。