翁珊珊，張文宏

偽狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV），又稱豬皰疹病毒1型，以豬為自然宿主，可感染多種家畜及野生動(dòng)物，引起以發(fā)熱、腦脊髓炎為特征的急性傳染病，因與狂犬病有相似表現(xiàn)，故命名為偽狂犬病。感染該病毒后，仔豬的病死率較高，還可引起母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等繁殖障礙，以及公豬不育，從而導(dǎo)致豬場(chǎng)繁殖率、育成率及生長(zhǎng)速度、料肉比等多方面指標(biāo)下降，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，是影響豬場(chǎng)生產(chǎn)的主要疫病之一[1]。研究者于1813年首次對(duì)該病進(jìn)行了詳細(xì)的描述[2]，引起了畜牧業(yè)界的重視，隨之對(duì)該病及PRV都進(jìn)行了較為全面的研究。若干年來(lái)，間或有以臨床表現(xiàn)及流行病學(xué)史為依據(jù)的人感染PRV的病例報(bào)道，但都缺乏確實(shí)證據(jù)。2018年，Ai等[3]首次報(bào)道了以眼內(nèi)炎為主要臨床表現(xiàn)，通過(guò)血清學(xué)及基因水平檢測(cè)鑒定的人感染PRV病例，證實(shí)了PRV跨物種感染人類的可能性?，F(xiàn)將該方面研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 PRV的特征及人感染PRV的理論依據(jù)

PRV是一種具有二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)的雙鏈DNA包膜病毒，屬于皰疹病毒科甲型皰疹病毒亞科水痘病毒屬。該亞科病毒的特征包括較廣的宿主范圍，相對(duì)短的病毒復(fù)制周期，以及在感覺神經(jīng)元中建立潛伏感染的能力。該病毒具有泛嗜性，可以在多種細(xì)胞系中繁殖，如腎臟來(lái)源的豬PK15細(xì)胞系、猴Vero細(xì)胞系、牛MDBK細(xì)胞系及雞胚成纖維細(xì)胞等[4]。也曾有文獻(xiàn)提及PRV可在若干個(gè)不同來(lái)源的人原代、傳代細(xì)胞系以及人肺成纖維細(xì)胞中復(fù)制[5-6]，然而具體內(nèi)容佚失。

PRV直徑約120～200 nm，呈球形?；蚪M大約有143 000個(gè)堿基對(duì)，由獨(dú)特的長(zhǎng)核苷酸序列及短核苷酸序列線性排列而成。其核衣殼的直徑大約為100～110 nm，由162個(gè)殼粒組成。病毒包膜為脂質(zhì)雙層膜，含有至少15種蛋白，其中11種為糖基化蛋白（gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN），與可感染人類的單純皰疹病毒（herpes simplex virus,HSV）-1的類似蛋白相對(duì)應(yīng)。研究顯示，編碼PRV gB與HSV-1 gB的DNA片段具有高度同源性，2種蛋白的結(jié)構(gòu)與功能也十分相似，提示人感染HSV-1后對(duì)PRV可能具有交叉保護(hù)作用[7]。在11種糖蛋白中，gB、gD、gH和gL對(duì)于病毒的復(fù)制是必需的。其他糖蛋白如gE、gI、被膜蛋白US9和非結(jié)構(gòu)蛋白胸腺嘧啶脫氧核苷激酶是非必需的，但它們的存在與毒力相關(guān)。這一特點(diǎn)可用于疫苗的設(shè)計(jì)，以區(qū)別減毒疫苗與野毒株。目前認(rèn)為PRV只有一種血清型，但不同分離毒株的毒力具有一定差異[8]。

糖蛋白gC、gB與gD均參與PRV進(jìn)入宿主細(xì)胞的過(guò)程：gC、gB與細(xì)胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖結(jié)合，介導(dǎo)病毒附著于細(xì)胞；隨后，gD可與幾種不同細(xì)胞受體結(jié)合。其中，細(xì)胞粘附因子nectin-1參與多種α皰疹病毒入侵宿主細(xì)胞的過(guò)程，被認(rèn)為是最有效的gD受體[9]。研究顯示，gD對(duì)人來(lái)源與豬來(lái)源的nectin-1具有相似的親和力[10]。此外，nectin-1受體中的部分氨基酸殘基（K61、T63、Q64、K75、Q76、N77、I80、N82、M85、S88、L90、A91、E125、A127、T128、F129、P130、N133和E135）在分子間接觸中起到的作用超過(guò)90%，而這些殘基在許多不同物種間都是保守的，包括小鼠（除了A91P突變）、牛、綿羊、山羊、貓、狗和蝙蝠等[11]。這為PRV的跨物種傳播提供了理論依據(jù)。

2 流行病學(xué)特征

豬是PRV的天然宿主。病毒的污染物是主要感染源，空氣傳播和接觸傳播為主要傳播方式，隱匿感染豬及康復(fù)豬可長(zhǎng)期攜帶病毒。在某些環(huán)境中，野豬是PRV的主要替代宿主，但其可能不會(huì)終生攜帶病毒[12]。除此以外的易感物種均為異常宿主。牛、羊、貓、狗、浣熊、水貂、歐洲棕熊、黑熊、臭鼬、大鼠及小鼠均可感染PRV而發(fā)病[2]。盡管實(shí)驗(yàn)顯示PRV可在家蠅的腸道中存活一定時(shí)間（半衰期3 h）[13]，但目前尚無(wú)證據(jù)證明昆蟲及鳥類參與了該病毒的傳播。此外，研究者曾在浣熊和幼齡黑熊中檢測(cè)到天然存在的PRV抗體[14]，提示在其他物種中PRV感染可能并不總是致命的。

對(duì)于PRV是否可以感染人類，之前一般認(rèn)為人對(duì)該病毒具有天然抵抗力[15]。但2018年以來(lái)，相繼有研究者在基因水平上證實(shí)了人感染PRV病例的存在，但尚無(wú)由其他動(dòng)物傳播至人或人間傳播的證據(jù)。

目前，在美國(guó)及歐洲等部分發(fā)達(dá)國(guó)家，偽狂犬病已在家豬中得到清除[16-18]，而在我國(guó)，情況仍不容樂(lè)觀。上世紀(jì)80年代，豬偽狂犬病曾在全國(guó)流行，推廣使用 Bartha-K61株疫苗（一種天然基因缺失疫苗）后，疫情一度得到控制。但由于疫苗接種并非強(qiáng)制實(shí)施且缺乏監(jiān)管，該病在全國(guó)仍有散發(fā)或流行。流行病學(xué)研究顯示，2011年以來(lái)，中國(guó)PRV野生毒株陽(yáng)性率呈逐年上升趨勢(shì)[19]。葉晶等[20]對(duì)2010 2014年中國(guó)境內(nèi)5省份1250份種豬血清進(jìn)行了PRV gE抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性率從2012年的11.3% 上升到2014年的 62.3%。自2011年豬偽狂犬病疫情再度暴發(fā)以來(lái)，國(guó)內(nèi)科研人員相繼從我國(guó)暴發(fā)疫情的豬場(chǎng)中分離到多株P(guān)RV，且證實(shí)新分離毒株存在變異，致病性較之前的PRV有所增強(qiáng)[21-22]。

3 疑似人感染病例報(bào)道

最早關(guān)于疑似人感染PRV的報(bào)告可回溯至1914年。Von Ratz等[23]報(bào)道了2名有PRV感染實(shí)驗(yàn)貓接觸史的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員在分別受到抓傷與針刺傷后，出現(xiàn)了不同于其他皰疹病毒感染的癥狀 傷口紅腫且瘙癢。對(duì)癥采用外用藥物治療后，該癥狀消失，但缺乏其他實(shí)驗(yàn)室證據(jù)支持該疑似診斷。1940年，Shukru-Aksel等[24]報(bào)道了類似的病例，2名實(shí)驗(yàn)室人員先后在處理確診PRV感染的狗尸體時(shí)受傷，隨后2者出現(xiàn)了皮疹、瘙癢、口炎等癥狀。雖然缺乏確診證據(jù)，但將其中1名患者的血清接種于家兔后，家兔出現(xiàn)偽狂犬病表現(xiàn)，高度提示該患者發(fā)生PRV感染且出現(xiàn)病毒血癥。1963年，Hussel等[25]報(bào)道了在一個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)出現(xiàn)偽狂犬病疫情后，4名具有接觸史的工作人員出現(xiàn)了咽痛、下肢乏力的癥狀，然而同樣缺乏進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)室診斷依據(jù)。Mravak等[26]隨后報(bào)道了3例具有血清學(xué)證據(jù)的PRV感染病例，分別發(fā)生在1983年及1986年。在這3例病例中，患者免疫功能正常，均具有疑似患病動(dòng)物接觸史，臨床表現(xiàn)為乏力、發(fā)熱、出汗、吞咽困難、煩躁不安、口腔及咽喉出現(xiàn)異常、不適等，其中1例患者進(jìn)食時(shí)唾液分泌增多，而另2例出現(xiàn)無(wú)痛性淋巴結(jié)腫大及嗅覺、味覺異常等癥狀。病毒分離未取得成功，但患者PRV抗體滴度均出現(xiàn)顯著升高。此外，也有農(nóng)場(chǎng)工人在接觸感染PRV的奶牛后出現(xiàn)持續(xù)數(shù)日手掌搔癢的報(bào)道[27]。

盡管不斷有疑似PRV感染的病例報(bào)道出現(xiàn)，但對(duì)于人感染PRV的可能性卻始終存在爭(zhēng)議，一方面是因?yàn)樗鶊?bào)道的病例缺乏確診依據(jù)，另一方面，曾有研究對(duì)455名疑似PRV感染或職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)高的志愿者進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查，顯示PRV特異性中和抗體陰性。此外，該研究的研究者進(jìn)行了自身接種 皮內(nèi)及皮下接種濃度為半數(shù)組織培養(yǎng)感染量的103.4倍及106.1倍的PRV后，均未出現(xiàn)相關(guān)臨床癥狀[28]。

4 確診人感染PRV病例報(bào)道

2018年，Ai等[3]報(bào)道了首例在基因水平上確診的人感染PRV病例。該患者為免疫功能正常的中年女性，發(fā)病前有豬場(chǎng)污水接觸史，急性起病后短期內(nèi)出現(xiàn)發(fā)熱、頭痛癥狀，并有視力進(jìn)行性下降表現(xiàn)。對(duì)患者病眼玻璃體液行二代測(cè)序及特異性PCR檢測(cè)，并結(jié)合患者血清學(xué)檢測(cè)PRV抗體陽(yáng)性結(jié)果，確證眼內(nèi)炎系PRV感染所致。進(jìn)一步進(jìn)行病毒進(jìn)化樹分析，發(fā)現(xiàn)測(cè)序所得病毒株與我國(guó)近年來(lái)流行的高毒力變異株高度同源[29-30]，提示了PRV變異所致人獸共患穩(wěn)定病毒株形成的可能。

同年，趙偉麗等[31]對(duì)不明原因腦炎患者進(jìn)行回顧性篩查，通過(guò)腦脊液二代測(cè)序結(jié)合流行病學(xué)史及臨床表現(xiàn)，臨床診斷4例人感染PRV腦炎散發(fā)病例。該4例患者均為從事生豬與生豬肉生產(chǎn)、加工與銷售的人員，臨床表現(xiàn)為急性起病，病前數(shù)日有發(fā)熱、頭痛和 感冒樣癥狀 的前驅(qū)期，此后迅速進(jìn)展為以癲癇發(fā)作、意識(shí)障礙為表現(xiàn)的重癥腦炎，預(yù)后不佳。其中1例患者伴有視網(wǎng)膜炎。

上述確診病例報(bào)道，提示變異株引起人感染PRV的可能性，然而經(jīng)典株本身是否具備跨物種傳播人類的能力尚須要進(jìn)一步研究。

5 臨床表現(xiàn)

PRV對(duì)于人類的致病性正處于被研究認(rèn)識(shí)的過(guò)程，對(duì)感染PRV的臨床表現(xiàn)尚不能作全面詳盡的描述。結(jié)合已報(bào)道病例，初步將臨床表現(xiàn)歸納如下。

5.1 前驅(qū)期表現(xiàn) 一般持續(xù)數(shù)日，以發(fā)熱為主要表現(xiàn)，可伴有頭痛或者感冒樣癥狀。

5.2 神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn) 主要表現(xiàn)為急性腦病或者腦炎綜合征：①癲癇發(fā)作，以全身強(qiáng)直陣攣發(fā)作為主，嚴(yán)重者呈癲癇持續(xù)狀態(tài)；②精神行為異常；③意識(shí)障礙，可進(jìn)行性加重，昏迷；④其他神經(jīng)體征，部分患者可有病理征、腦膜刺激征，一般無(wú)癱瘓?bào)w征。

5.3 視網(wǎng)膜炎或者眼內(nèi)炎 急性雙眼視力下降，直至失明，瞳孔不規(guī)則，光反射下降，眼底檢查可見視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜脫離、玻璃體渾濁等。視網(wǎng)膜炎可為人感染PRV的主要表現(xiàn)，也可與腦炎合并發(fā)生。當(dāng)與重癥腦炎合并存在時(shí)，可能被腦炎的癥狀掩蓋。

5.4 其他臨床表現(xiàn) 除了典型的腦炎和視網(wǎng)膜炎病例，也存在臨床表現(xiàn)相對(duì)較輕或者受累不全面的病例，可表現(xiàn)為發(fā)熱、乏力、皮疹、瘙癢、咽痛等，往往可自愈。

6 診斷與治療

我國(guó)偽狂犬病的國(guó)家診斷標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定病毒分離鑒定、PCR、家兔接種實(shí)驗(yàn)適用于家豬PRV的檢測(cè)；中和試驗(yàn)、ELISA適用于非免疫動(dòng)物PRV抗體的檢測(cè)及免疫后抗體的檢測(cè)；乳膠凝集試驗(yàn)適用于實(shí)驗(yàn)室和現(xiàn)場(chǎng)對(duì)PRV抗體的早期檢測(cè)[32]。

結(jié)合曾報(bào)道的疑似及確診病例，具有密切流行病學(xué)接觸史，以眼內(nèi)炎、腦炎為表現(xiàn)的急性起病患者，須高度關(guān)注PRV感染的可能性。同樣，也不能忽視臨床癥狀輕微但具有密切接觸史的患者。而進(jìn)一步確診，參考家豬診斷標(biāo)準(zhǔn)，須依賴核酸檢測(cè)及血清學(xué)檢測(cè)。核酸檢測(cè)可采用PRV特異性引物進(jìn)行PCR，也可通過(guò)二代測(cè)序方法直接對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)。血清學(xué)檢測(cè)方法亦可參照對(duì)家豬的診斷方法。

治療方面，對(duì)豬群，PRV感染目前沒(méi)有特效治療藥物，疫苗免疫接種是預(yù)防和控制豬偽狂犬病的最有效措施，可從根本上預(yù)防病毒的感染和傳播。對(duì)于感染PRV患者，癥狀輕微者無(wú)須治療即可自愈。

PRV與HSV-1、HSV-2及水痘帶狀皰疹病毒（varicella-zoster virus,VZV）同屬于甲型皰疹病毒亞科，與VZV同屬水痘病毒屬，與后者同源性更高。對(duì)于豬感染PRV，目前尚無(wú)有效的治愈方法，以免疫防控為主[33-34]；對(duì)于人感染PRV，由于確診病例報(bào)道少，目前尚缺乏臨床共識(shí)和經(jīng)驗(yàn)。對(duì)與該病毒親緣性較近的VZV感染所致急性視網(wǎng)膜壞死綜合征及其所致腦炎，臨床推薦阿昔洛韋抗病毒治療[35]。據(jù)此，我們建議對(duì)于人感染PRV，可在對(duì)癥治療的同時(shí)采用強(qiáng)化抗病毒治療方案并密切隨訪病情進(jìn)展。

7 小 結(jié)

經(jīng)病原學(xué)二代測(cè)序及特異性PCR結(jié)合血清學(xué)檢測(cè)方法確證了人感染PRV病例的存在，證明PRV具有跨物種傳播感染人類的能力。雖然目前這類病例還很少見，但其潛在的危害性卻不容忽視。更應(yīng)引起我們重視的是，除了家豬飼養(yǎng)及研究等相關(guān)行業(yè)因密切接觸具有暴露風(fēng)險(xiǎn)外，異種器官移植也可使PRV跨種間感染成為可能。究竟此類感染的發(fā)生是偶然還是普遍存在？是否存在其他皰疹病毒感染后的交叉保護(hù)作用？是否變異株較經(jīng)典株對(duì)人體致病力更強(qiáng)？這些問(wèn)題都有待于對(duì)PRV不同毒株的性狀、基因突變情況、致病機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步深入地研究。與此同時(shí)，進(jìn)一步防控策略的制定也勢(shì)在必行。