張晶晶，彭瓊

(合肥市第一人民醫(yī)院,合肥230000)

胃癌具有高發(fā)病率、高轉移率、高病死率特點，在我國發(fā)病率逐年增高，其中腹膜轉移是晚期胃癌死亡的首要原因之一[1,2]。因此研究胃癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤轉移至腹腔的機制，對預防胃癌患者腹水生成，降低胃癌病死率具有重要意義。乙醛脫氫酶1(ALDH1)是新發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤干細胞標志物，在肺癌、食管癌等實體瘤中高表達[3,4]，在腫瘤轉移、復發(fā)及耐藥中起重要作用[5]。胃泌素17(G-17)為一種新型的腫瘤標志物，具有無創(chuàng)、簡便易行等優(yōu)點，常用于癌前病變及胃癌篩查，被稱為“血清學活檢”，在臨床應用中具有重要價值[6]。兩者在胃癌腹腔轉移機制方面的研究較少[7]。本研究采用ELISA法檢測胃癌伴腹水患者腹水及外周血中ALDH1、G-17水平，觀察其水平變化，并探討兩者在胃癌患者腹水及外周血中的相關性，為初步探討兩者在胃癌腹腔轉移中的作用機制提供基礎。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年8月～2018年8月合肥市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科門診及住院部確診的胃癌患者92例，入組前均未予放化療及手術治療，其中高分化癌5例、中分化癌49例、低分化癌38例。納入標準：入組胃癌患者均經(jīng)胃鏡及病理學檢查確診，腹水組均經(jīng)腹水穿刺脫落細胞學檢查陽性或經(jīng)病理診斷，并排除其他可以引起腹水的非惡性疾病。排除標準：①炎癥感染性疾病或自身免疫性疾??；②近期大量使用抑酸劑、抗生素、糖皮質(zhì)激素、非甾體藥物及胃黏膜保護劑；③合并有其他類型腫瘤；④孕婦或有嚴重心肺、肝腎功能不全；⑤經(jīng)過放化療的胃癌或精神疾病。按其有無腹腔轉移分為腹水組及無腹水組，其中腹水組43例，男23例、女20例，年齡27～75(50.4±7.1)歲；無腹水組49例，男26例、女23例，年齡28～77(47.7±6.8)歲。另選取本院同期體檢中心確診為慢性非萎縮性胃炎患者25例作為對照組，其中男14例、女11例，年齡33～70(52.8±5.3)歲，均經(jīng)胃鏡檢查提示正常胃黏膜，病理組織學檢查提示黏膜輕度慢性炎癥。三組性別、年齡有可比性。

1.2 腹水及外周血中ALDH1、G-17的檢測 晨起抽取研究對象空腹外周血6 mL，2 000 r/min離心8 min，取上層血清，-80 ℃冰箱保存待檢。抽取腹水組患者腹水200 mL，以3 000 r/min恒溫離心15 min，取上清液，-80 ℃冰箱保存待檢。采用ELISA法檢測腹水組腹水及各組外周血中的ALDH1、G-17水平。其中ALDH1試劑盒購自RayBiotech公司，G-17試劑盒購自芬蘭Biohit公司。

2 結果

2.1 腹水組腹水和各組外周血中ALDH1、G-17水平比較 腹水組腹水及外周血中ALDH1分別為(27.46±11.58)、(15.57±7.59 )ng/mL，G-17 分別為(50.53±25.47)、(35.36±20.68)pmol/L；無腹水組外周血中ALDH1、 G-17分別為(9.38±4.98) ng/mL、(23.65±8.79) pmol/L；對照組外周血中ALDH1、 G-17分別為(3.32±1.64) ng/mL、(7.67±6.23) pmol/L。 腹水組中腹水ALDH1、G-17水平高于外周血中(P均<0.05)；外周血中ALDH1、G-17水平比較，腹水組高于無腹水組和對照組(P均<0.05)，無腹水組高于對照組(P均<0.05)。

2.2 腹水組外周血及腹水中ALDH1、G-17水平的相關性 腹水組中，腹水和外周血中ALDH1水平與G-17水平呈正相關(r=0.592、P<0.05；r=0.523、P<0.05)；在無腹水組中，外周血ALDH1水平與G-17水平呈正相關(r=0.655、P<0.05)。

3 討論

胃癌是我國最常見的消化道腫瘤[8]，早期發(fā)現(xiàn)率低，易出現(xiàn)腹腔、肝、肺、骨等臟器轉移，根治性手術難度大，術后易復發(fā)，常年居我國惡性腫瘤病死率第一位。胃癌腹腔轉移時易出現(xiàn)腹水，是晚期胃癌的嚴重并發(fā)癥，也是導致患者死亡的重要原因，一旦患者出現(xiàn)腹水，5年生存率不到3%，平均生存時間和中位生存時間分別為6.5個月和3.1個月。

ALDH1是乙醛脫氫酶家族新發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤干細胞(CSC)標志物[9,10]，是各組織中正常干細胞和腫瘤干細胞生長、分化的必需物質(zhì)，在神經(jīng)系統(tǒng)、造血系統(tǒng)的干、祖細胞中明顯升高[11]。ALDH1在腫瘤組織中表達高于癌旁組織，臨床分期越高、淋巴結轉移越早、預后越差的患者，ALDH1表達水平越高[12]，ALDH1與腫瘤分期、有無轉移及預后有明顯相關性[5,13]。ALDH1在腫瘤轉移過程中的具體機制尚不明確，可能通過上皮間質(zhì)轉換(EMT)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)中導致腫瘤細胞浸潤轉移[14,15]。本研究發(fā)現(xiàn)，相對無腹水組，腹水組患者外周血中ALDH1表達升高，且腹水組患者腹水中ALDH1表達高于外周血中,提示ALDH可能通過某些機制，如EMT、VEGF，發(fā)揮CSC的作用，導致胃癌發(fā)展、轉移，腹水生成。

G-17是胃竇和十二指腸G細胞合成和分泌的一種胃泌素，在消化道腫瘤患者外周血及癌組織中高表達，臨床分期越高者其表達水平越高[16]。因此，目前認為G-17在胃癌疾病篩查及疾病早期診斷過程中可能發(fā)揮重要作用，臨床中廣泛用于癌前疾病及早期胃癌篩查[17,18]。G-17與進展期胃癌，特別是胃癌伴腹腔轉移關系的研究較少，其在腫瘤發(fā)展、侵襲、轉移中的作用機制尚未完全明確。目前研究認為，G-17可能通過與其受體，如胃泌素與膽囊收縮素-2受體(CCK-2R)結合，刺激多個信號傳導路徑，從而導致腫瘤細胞增殖。此外，G-17可通過激活混合譜系激酶3及INK1等激酶，活化金屬基質(zhì)蛋白酶[19]，降解細胞外基質(zhì)，進而促進腫瘤細胞的浸潤及轉移[20～22]。本研究發(fā)現(xiàn)，在腹水組患者中，其外周血中G-17表達水平較無腹水組及對照組升高，且腹水中G-17表達高于患者外周血，提示在胃癌腹水轉移過程中，G-17可能通過與CCK-2R等受體結合啟動信號傳導通路或者通過金屬基質(zhì)蛋白酶作用導致腫瘤發(fā)展、轉移。

腫瘤發(fā)展和轉移是一個漸進式的過程，涉及多級反應。在胃癌腹腔轉移形成惡性腹水過程中，ALDH1通過VEGF促進血管內(nèi)皮細胞增殖，導致腫瘤和新生組織中血管生成；而G-17通過與CCK-2R結合發(fā)揮作用，在血管生成中增強內(nèi)皮細胞活性，增加微血管和小靜脈的通透性從而促進腫瘤轉移[23]；由此考慮兩者可能通過相同或者相近的機制協(xié)同作用，促進和加速腫瘤發(fā)展、轉移。本研究發(fā)現(xiàn)，在腹水組中，腹水和外周血中ALDH1表達水平與G-17水平呈正相關；在無腹水組中，外周血ALDH1水平與G-17水平呈正相關；提示ALDH1和G-17可能通過上述機制或其他機制，共同促進和加速腫瘤發(fā)展、轉移。

綜上所述，胃癌患者腹水及外周血中ALDH1、G-17異常高表達，且具有高度相關性，可能通過某種協(xié)同機制，促進胃癌進一步轉移、惡化。