曹陽月 王佳偉

視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病(NMOSD)是一種免疫介導(dǎo)的炎性脫髓鞘性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病[1-2]?，F(xiàn)有研究表明，自身免疫性抗體水通道蛋白4抗體(AQP4 Ab)[3]、白細(xì)胞介素(IL)-6[4]、IL-17[5]、炎性細(xì)胞等多種炎性因子均參與了NMOSD的發(fā)病過程[6-7]。近年來，許多研究者提出了新的炎性系統(tǒng)激活的敏感指標(biāo)——中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞計數(shù)比值(NLR)和血小板/淋巴細(xì)胞計數(shù)比值(PLR)，目前證實其與急性冠脈綜合征的嚴(yán)重程度[8-9]和各種惡性腫瘤的預(yù)后[10-11]有關(guān)。NLR也被證實與多種自身免疫性疾病，如多發(fā)性硬化[12]、系統(tǒng)性紅斑狼瘡[13]、白塞病[14]、干燥綜合征[15]等疾病相關(guān)。也有文獻(xiàn)報道NLR與NMOSD相關(guān)，且與其疾病活動度有關(guān)[16]。另有研究表明PLR與系統(tǒng)性紅斑狼瘡及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等多種自身免疫性疾病有關(guān)[17-18]。NLR和PLR值能夠反應(yīng)中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞以及血小板與淋巴細(xì)胞之間的平衡狀態(tài)，可能比白細(xì)胞、血小板計數(shù)更能反映機(jī)體的炎性狀態(tài)。同時，NLR及PLR比值是可通過血液細(xì)胞分析較為容易獲得的參數(shù)，檢測方法簡單便捷且成本較低。但由于NLR及PLR在NMOSD的評價方面研究較少，因此，本研究對25例NMOSD的NLR和PLR進(jìn)行觀察研究，旨在探討NLR和PLR在NMOSD中的評價意義。

1 對象和方法

1.1 觀察對象回顧性分析2018年1月至2019年3月北京同仁醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的NMOSD確診患者共25例，男5例、女20例，患者年齡17～77歲，平均(41.40±16.31)歲。其中AQP4 Ab陽性患者21例、陰性4例。急性期定義：臨床表現(xiàn)出現(xiàn)新的神經(jīng)功能缺損癥狀持續(xù)24 h以上或原有癥狀惡化24 h以上，MRI T2WI顯示與癥狀相關(guān)的新的或強(qiáng)化病灶。21例AQP4 Ab陽性患者中9例經(jīng)過隨訪，隨訪時間0.5～9個月。NMOSD診斷依據(jù)2015年國際視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病診斷小組制定的NMOSD診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，并排除入院前1個月內(nèi)應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療，既往患其他自身免疫性疾病、惡性腫瘤病史及心腦血管疾病、腎臟疾病、肝臟疾病、血液學(xué)疾病等的患者。

健康對照組(對照組)共25名，選取同期本院體檢健康人群，排除NMOSD疾病及上述其他疾病，年齡15～65歲，平均(40.92±15.05)歲。男8名、女17名。NMOSD組與對照組年齡和性別比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。

1.2 方法所有受試者清晨取空腹靜脈血2 mL檢測血常規(guī)，所有實驗室指標(biāo)均采用自動化標(biāo)準(zhǔn)方法。于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管中，混勻，使用日本Sysmex公司XN-1000型血細(xì)胞分析儀及其配套試劑檢測血細(xì)胞參數(shù)，分別計算NLR、PLR。于治療前采靜脈血2 mL于血清管中，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA法)檢測AQP4 Ab。

觀察指標(biāo)：檢測靜脈血血常規(guī)，記錄白細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞計數(shù)、血小板計數(shù)、淋巴細(xì)胞計數(shù)，計算NLR、PLR并進(jìn)行分析。

NMOSD組與對照組上述指標(biāo)進(jìn)行單因素分析，將單因素分析中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)納入二元Logistic回歸，分析影響NMOSD炎性變化的危險因素，同時納入其他文獻(xiàn)表明有意義的指標(biāo)NLR以進(jìn)一步驗證[16]。之后應(yīng)用受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線分析NLR、PLR以及二者聯(lián)合指標(biāo)NMOSD炎性變化的預(yù)測價值。

9例隨訪患者比較其急性期與緩解期NLR和PLR的變化。25例NMOSD患者中再按照血清AQP4-Ab陰性及陽性分組，比較NLR和PLR兩組間的差異。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。經(jīng)正態(tài)檢驗與方差齊性檢驗，呈正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。 NMOSD組與對照組(單因素分析)、血清AQP4 Ab陽性組與陰性比較均采用獨立樣本t檢驗；復(fù)發(fā)期與緩解期NLR和PLR比較采用配對t檢驗；以是否患有NMOSD為因變量(1=NMOSD患者，0=對照組)，以單因素分析中差異有統(tǒng)計限意義的指標(biāo)為自變量做二元Logistic回歸分析；采用 ROC曲線評價NLR、PLR以及兩者聯(lián)合指標(biāo)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NMOSD組與對照組各項指標(biāo)比較兩組患者白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板、NLR水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。NMOSD組中性粒細(xì)胞計數(shù)及PLR比值顯著高于對照組(均P<0.05)。具體見表1。

2.2 NMOSD二元Logistic回歸分析將上述單因素分析中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)中性粒細(xì)胞計數(shù)、PLR，以及NLR(既往研究文獻(xiàn)表明NLR對炎性反應(yīng)有意義)納入二元Logistic回歸分析，結(jié)果顯示PLR為NMOSD炎性變化的獨立危險因素(B=0.031，SE=0.010，Wald-χ2=9.176，P=0.002；EXP=1.032，95%CI：1.011～1.053)。具體見表2。

2.3 ROC曲線分析用于評價NMOSD綜合效能最高的炎性激活的敏感指標(biāo)是NLR聯(lián)合PLR，約登指數(shù)最大值=0.520，對應(yīng)的NLR和PLR聯(lián)合作用=0.399417，可以作為NLR和PLR聯(lián)合作用評價NMOSD炎性變化的臨界點，當(dāng)NLR和PLR聯(lián)合作用>0.399417時，提示NMOSD的炎性激活程度高，炎性狀態(tài)失衡明顯，可以評價對疾病有意義的炎性反應(yīng)，對應(yīng)敏感度=0.800，特異度=0.720。陽性預(yù)測值=74.07%，陰性預(yù)測值=78.26%。具體見圖1、表3。

圖1 NLR和PLR聯(lián)合評價NMOSD活動度的ROC曲線

2.4 NMOSD患者急性期及緩解期NLR和PLR比較緩解期NLR比值較急性期明顯降低(P<0.05)，PLR比值兩者間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具體見表4。

2.5 NMOSD急性期AQP4 Ab陽性與陰性患者 NLR和PLR比較AQP4 Ab陽性、陰性患者兩組間NLR和PLR差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。具體見表5。

表1 NMOSD組與對照組各項指標(biāo)比較

注：NMOSD：視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病；NLR：中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞計數(shù)比值；PLR：血小板/淋巴細(xì)胞計數(shù)比值；表2-5、圖1同

表2 影響NMOSD炎性變化的二元Logistic回歸分析

表3 對NMOSD炎性變化評估的各項指標(biāo)比較

表4 NMOSD患者急性期與緩解期NLR和PLR比較

表5 AQP4 Ab陽性與AQP4 Ab陰性的患者急性期NLR和PLR比較

注：AQP4 Ab：水通道蛋白4抗體.

3 討論

中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答中起重要作用。中性粒細(xì)胞作為免疫應(yīng)答的先驅(qū)，分泌大量炎性介質(zhì)，同時活化的淋巴細(xì)胞釋放超氧自由基和蛋白酶。它們之間的平衡遭到破壞是炎性反應(yīng)發(fā)生的基礎(chǔ)，并促進(jìn)組織損傷。許多研究表明NLR值可作為自身免疫性疾病(如多發(fā)性硬化[19]、干燥綜合征[20]、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[21])疾病炎性活動的評價指標(biāo)。NMOSD也是一種自身免疫性炎性疾病，其急性期出現(xiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤；淋巴細(xì)胞則通過分泌IL-6、B細(xì)胞激活因子、增殖誘導(dǎo)配體起到體液調(diào)節(jié)作用[22]，那么NLR對于NMOSD是否具有類似于其在其他自身免疫性疾病的炎性變化的預(yù)測價值？本研究對緩解期與急性期NLR值相比較，NLR水平顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，推測NLR或許可以用于評價NMOSD的炎性變化。單因素分析顯示NLR在NMOSD組及對照組無顯著差異，但既往文獻(xiàn)提示NLR與NMOSD關(guān)系密切，考慮到NLR可能在單因素分析中可能出現(xiàn)部分效應(yīng)被其他因素掩蓋，故二元Logical回歸分析仍納入NLR作為自變量。但本研究二元Logical回歸分析提示NLR不是評價NMOSD炎性變化的危險因素，這與之前的研究[16]不同，可能由于兩個研究的入選條件有所差別，且皆為回顧性小樣本研究。

目前研究發(fā)現(xiàn)PLR與系統(tǒng)性紅斑狼瘡[18]及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[17]等多種自身免疫性疾病的活動有關(guān)，本研究單因素分析發(fā)現(xiàn)PLR在NMOSD組顯著高于對照組(P<0.05)，考慮PLR可能與NMOSD急性期發(fā)病有關(guān)，另外二元Logical回歸提示PLR為NMOSD炎性變化的獨立危險因素，推測PLR或許也可以用于監(jiān)測NMOSD的疾病炎性變化。本研究通過ROC曲線分析NLR和PLR對NMOSD患者炎性變化的預(yù)測評價，結(jié)果顯示，用于評價NMOSD綜合效能最高的炎性激活的敏感指標(biāo)是NLR聯(lián)合PLR，約登指數(shù)最大值=0.520，對應(yīng)的NLR和PLR聯(lián)合作用=0.399417，可以作為NLR和PLR聯(lián)合作用評價NMOSD炎性變化的臨界點，當(dāng)NLR和PLR聯(lián)合作用>0.399417時，提示NMOSD的炎性活動度高，可以作為疾病活動程度有價值的判定指標(biāo)，對應(yīng)敏感度=0.800，特異度=0.720。陽性預(yù)測值=74.07%，陰性預(yù)測值=78.26%。但兩者聯(lián)合評價的敏感性和特異性仍不夠理想，可能與影響NMOSD炎性活動的因素較多有關(guān)，兩個指標(biāo)聯(lián)合仍不能充分反映整體情況，需要聯(lián)合兩種以上其他炎性指標(biāo)和炎性因子提高預(yù)測價值。

AQP4 Ab是視神經(jīng)脊髓炎特異性抗體，為其發(fā)病的靶點。本研究入組患者中AQP4 Ab陽性21例、陰性4例，血清AQP4 Ab陽性與陰性NMOSD患者NLR、PLR無顯著差異。不過目前的研究證實血清AQP4 Ab水平與疾病活動度無關(guān)[23]，所以本研究AQP4 Ab陰性陽性兩組間NLR、PLR無差異，并不影響NLR、PLR可以評價NMOSD炎性變化的推論。

綜上所述，本研究結(jié)果表明，NLR和PLR聯(lián)合對NMOSD的炎性變化具有評價意義，NLR可能是評價NMOSD疾病炎性變化的有效指標(biāo)。另外，NLR及PLR具有簡單、快捷、便捷、可重復(fù)性好等優(yōu)點，但由于避免相關(guān)治療對實驗的影響，排除已治療的樣本，導(dǎo)致例數(shù)較少，且本研究為回顧性研究，研究對象及實驗數(shù)據(jù)不可避免存在選擇偏倚。因此，有關(guān)影響NMOSD炎性變化的確切因素尚需今后進(jìn)一步驗證。