倪婕 劉峰 楊華

【摘要】目的 為查明村民家中聚餐發(fā)生食源性疾病爆發(fā)的病原。方法 根據(jù)《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)》[1]的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行食品及腹瀉標(biāo)本的沙門氏菌、致泄大腸埃希氏菌、副溶血弧菌、金黃色葡萄球菌等項(xiàng)目的檢驗(yàn)。結(jié)果 從剩余飯菜（兩份豬耳朵）中檢測(cè)出希林登沙門氏菌。結(jié)論 該起食源性疾病爆發(fā)由希林登沙門氏菌引起。

【關(guān)鍵詞】食源性疾病爆發(fā);希林登沙門氏菌;生物檢驗(yàn)

【中圖分類號(hào)】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095.6681.2019.28..02

1 材料與方法

2018年2月17日晚，謝X紅過70歲生日，邀請(qǐng)親戚在自家聚餐。2月18日1時(shí)薛X兵出現(xiàn)腹瀉、腹痛、發(fā)熱、頭痛等癥狀。到2月18日20時(shí)，聚餐的23人中有18人出現(xiàn)相同或類似癥狀。患者出現(xiàn)癥狀后到醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診，或用藥，經(jīng)治療后除謝X霞癥狀較重轉(zhuǎn)縣人民醫(yī)院治療外，其余人癥狀緩解。

1.1 樣品

采集到肛拭子1份，嘔吐物1份，剩余飯菜樣品9份，共11份標(biāo)本。未采集到其余發(fā)病人員嘔吐物、糞便或肛拭子。

1.2 培養(yǎng)基試劑與儀器

所用培養(yǎng)基中，7.5%Nacl肉湯、緩沖蛋白胨水、伊紅美藍(lán)瓊脂、B-P瓊脂、SS瓊脂來自杭州微生物試劑有限公司，乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基來自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，半固體瓊脂培養(yǎng)基、堿性蛋白胨水、TCBS培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)肉湯、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基來自上海博微生物科技有限公司，三糖鐵瓊脂來自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。全自動(dòng)微生物鑒定儀為BD公司Phoenix100，培養(yǎng)箱為上海智誠(chéng)分析儀器有限公司ZSD1300，均質(zhì)為寧波江南儀器廠JN-400i。

1.3 方法

根據(jù)《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)》[1]的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行食品及腹瀉標(biāo)本的沙門氏菌、致泄大腸埃希氏菌、副溶血弧菌、金黃色葡萄球菌等項(xiàng)目的檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

在兩份豬耳朵中檢出沙門氏菌。共分離出兩株菌種。其余標(biāo)本中均未檢測(cè)出致病菌。

2.1 分離培養(yǎng)

2.1.1 樣品處理

剩余飯菜（包括2份豬耳朵）分別稱取25 g至分別裝有225mL 7.5%Nacl肉湯、225 mL BPW緩沖蛋白胨水、225 mL營(yíng)養(yǎng)肉湯、225 mL 3%Nacl堿性蛋白胨水的均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器均質(zhì)2 min。制備成1：10的樣品均液。

2.1.2 初步培養(yǎng)鑒定

將制備好的樣品均液及腹瀉標(biāo)本按照《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)》[1]分別進(jìn)行沙門氏菌、致泄大腸埃希我菌、金黃色葡萄球菌及副溶血弧菌的鑒定。所有樣品中除兩份剩余豬耳朵外，均未檢測(cè)出致病菌。兩份豬耳朵從SS瓊脂平板中初步分離出兩株疑似沙門氏菌菌落，并接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板純培養(yǎng)保存菌種以備后續(xù)鑒定。

2.2 生化反應(yīng)鑒定

挑取的兩株疑似沙門氏菌落分別接種三糖鐵瓊脂，先在斜面劃線，再于底層穿刺;接種針不滅菌，直接接種賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，于36℃±1℃培養(yǎng)24小時(shí)，同時(shí)分別接種蛋白胨水（供做靛基質(zhì)試驗(yàn)）、尿素瓊脂（PH：7.2）、氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基，于36℃±1℃培養(yǎng)24小時(shí)，結(jié)果如表1。

初步生化鑒定表面該菌種為典型沙門氏菌。挑取營(yíng)養(yǎng)瓊脂純培養(yǎng)的菌落用生理鹽水制備成濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙河萌詣?dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。結(jié)果為沙門菌氏屬，可信度99%。

2.3 血清學(xué)鑒定

用衛(wèi)生部蘭州生物制藥所生產(chǎn)的沙門氏菌診斷血清進(jìn)行血清學(xué)鑒定，A-F多價(jià)O血清（+）、生理鹽水對(duì)照（-）、O2（-）、O4（-）、O9（+）、O3（-）、HMA（-）、HMC（-）、HMD（-）、HE（-）、HG（+）、Hf（-）、Hm（+）、Hs（-）、Ht（-）、Hx（-）、H7（-）。經(jīng)查抗原表該菌株符合希林登沙門氏菌。

3 討 論

2018年2月17日發(fā)生的一起在謝X紅家生日聚餐食用豬耳朵引起的食源性疾病爆發(fā)事件。此次流行病學(xué)調(diào)查主要有以下幾方面特點(diǎn)：中毒患者均有共同的進(jìn)餐史;潛伏期短，發(fā)病急，病程進(jìn)展快;發(fā)病癥狀主要為腹瀉、腹痛、惡心、嘔吐等;恢復(fù)較快，預(yù)后良好，無死亡病例，無續(xù)發(fā)病例。認(rèn)為符合食源性疾病爆發(fā)的特點(diǎn)，并查出危險(xiǎn)暴露食品。人員的發(fā)病與否和豬耳朵的食用與否吻合，確認(rèn)危險(xiǎn)暴露食品為豬耳朵，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR值為14.667，95%Cl（1.161，185.235）P=0.038<0.05）。實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢驗(yàn)，在剩余豬耳朵中檢驗(yàn)出沙門氏菌，與流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相吻合。

參考文獻(xiàn)

[1] 《GB 4789.10-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（食品微生物學(xué)檢驗(yàn)，金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)）;《GB 4789.7-2013食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn)）;《GB 4789.4-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)）;《GB 4789.6-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)）.

本文編輯：趙小龍