李娜

[摘要] 目的 探究GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)技術(shù)對(duì)利福平耐藥結(jié)核病的診斷效果。方法 便利擇取2017年1月—2019年1月期間該院收治的42例耐藥結(jié)核病患者為研究對(duì)象，開展利福平藥敏實(shí)驗(yàn)，比較GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)與傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)對(duì)耐藥結(jié)核病診斷陽性率95.24%，涂片鏡檢的診斷陽性率78.57%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.126，P<0.05）;GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)與金標(biāo)準(zhǔn)檢查結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.048，P>0.05）。GeneXpert Mtb/RIF診斷敏感度95.24%，特異度93.46%，涂片鏡檢診斷敏感度78.57%，特異度75.21%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.126、6.324，P<0.05）。GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)利福平耐藥敏感度為92.86%，特異度89.29%，與傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.055、0.460，P>0.05）。 結(jié)論 GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)對(duì)耐藥結(jié)核病診斷效果與金標(biāo)準(zhǔn)具有良好一致性，其檢測(cè)敏感度和特異度較高，對(duì)利福平耐藥結(jié)核病具有良好的診斷效果，因此其可用于臨床推廣。

[關(guān)鍵詞] GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè);耐藥結(jié)核病;診斷價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R825.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）11（b）-0181-03

[Abstract] Objective To investigate the diagnostic effect of GeneXpert Mtb/RIF detection technology on rifampicin-resistant tuberculosis. Methods 42 patients with drug-resistant TB who were admitted to the hospital from January 2017 to January 2019 were convenienty selected into the study. The rifampicin susceptibility test was performed to compare the results of GeneXpert Mtb/RIF test with traditional susceptibility test. Results The positive rate of GeneXpert Mtb/RIF detection for drug-resistant tuberculosis was 95.24%， and the positive rate of smear microscopy was 78.57%. The difference was statistically significant （χ2=5.126， P<0.05）. There was no significant difference in the results of GeneXpert Mtb/RIF test and gold standard examination（χ2=2.048， P>0.05）. The diagnostic sensitivity of GeneXpert Mtb/RIF was 95.24%， the specificity was 93.46%， the sensitivity of smear microscopy was 78.57%， and the specificity was 75.21%. The difference was statistically significant （χ2=5.126， 6.324， P<0.05）. GeneXpert Mtb/RIF showed rifampicin resistance sensitivity of 92.86% and specificity of 89.29%. There was no significant difference compared with traditional susceptibility test （χ2=0.055，0.460， P>0.05）. Conclusion The GeneXpert Mtb/RIF test has a good consistency with the gold standard for the diagnosis of drug-resistant tuberculosis. Its detection sensitivity and specificity are high. It has a good diagnostic effect on rifampicin-resistant tuberculosis， so it can be used for clinical promotion.

[Key words] GeneXpert Mtb/RIF detection; Drug-resistant tuberculosis; Diagnostic value

結(jié)核病是臨床常見慢性傳染病，對(duì)人類的健康具有嚴(yán)重危害。近年來耐藥結(jié)核病的發(fā)病率不斷提升，對(duì)我國(guó)結(jié)核病防控工作產(chǎn)生了新的挑戰(zhàn)。耐藥結(jié)核病相比于普通結(jié)核病具有治療耗時(shí)久、難度大且效果差等特點(diǎn)，是我國(guó)結(jié)核病防控部門關(guān)注的重點(diǎn)對(duì)象[1]。及早發(fā)現(xiàn)患者病情對(duì)其后續(xù)治療效果及預(yù)后具有積極影響，目前針對(duì)該疾病的診斷方式較多，包括涂片檢查、痰液培養(yǎng)和GeneXpert Mtb/RIF技術(shù)等。為探究GeneXpert Mtb/RIF對(duì)耐藥結(jié)核病的診斷效果，該次便利擇取2017年1月—2019年1月期間該院收治的42例耐藥結(jié)核病患者開展研究，報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

便利擇取該院收治的42例耐藥結(jié)核病患者，均行羅氏固體培養(yǎng)基檢查確診為陽性，其中包括男性患者30例，女性患者12例;年齡22～76歲，平均（53.8±3.6）歲。該次研究已經(jīng)過該院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有入組患者對(duì)研究?jī)?nèi)容、方法、目的等知情，并自愿簽署了同意書。同時(shí)研究已經(jīng)排除合并惡性腫瘤患者、其他傳染性疾病患者、臨床資料不全患者。

1.2? 方法

菌型篩查：在陽性培育管內(nèi)使用吸管序曲100 μL待檢樣本，并將其滴到檢測(cè)板上已有的樣本下方，靜置15 min后對(duì)檢測(cè)板上的情況進(jìn)行觀察，其中檢測(cè)線、質(zhì)控線均有紫紅色條帶時(shí)確定為陽性，即結(jié)核分枝桿菌;若見檢測(cè)線無則紅色條帶，質(zhì)控線處有紫紅色條帶，則確定為陰性，即非結(jié)核分枝桿菌。

后分別為該組患者行涂片鏡檢和GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)，①涂片鏡檢：按照衛(wèi)生部門發(fā)布的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行痰液標(biāo)本涂片檢測(cè)，以抗酸染色檢查報(bào)告為依據(jù)做出如下結(jié)果判定：陰性（-）為連續(xù)對(duì)300個(gè)視野進(jìn)行觀察無抗酸桿菌，300視野內(nèi)可報(bào)告1～8條抗酸桿菌;陽性（+）為100個(gè)視野內(nèi)可見3～9條抗酸桿菌;陽性（++）為10個(gè)視野內(nèi)可見1～9條抗酸桿菌;陽性（+++）為1個(gè)視野內(nèi)可見1～9條抗酸桿菌;陽性（++++）為1個(gè)視野內(nèi)可見至少10條抗酸桿菌。②GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)：按照檢測(cè)設(shè)備說明書加入試劑后進(jìn)行渦旋振蕩處理，靜置15 min后轉(zhuǎn)移至樣本反應(yīng)盒再放置樣本倉(cāng)，常規(guī)提出DNA、進(jìn)行PCR擴(kuò)增等，通過專業(yè)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行判讀。

質(zhì)量保證：以我國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃中固定的痰液涂片鏡檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作，按照防治規(guī)劃治療保證手冊(cè)中相關(guān)要求，對(duì)痰液涂片盲法復(fù)檢以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制進(jìn)行干預(yù)。每年各個(gè)季度上級(jí)實(shí)驗(yàn)室對(duì)本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行督導(dǎo)，開展現(xiàn)場(chǎng)評(píng)估，同時(shí)考核實(shí)驗(yàn)室內(nèi)盲法抽片的復(fù)查質(zhì)量。eneXpert Mtb/RIF檢測(cè)已經(jīng)經(jīng)過我國(guó)疾控中心開展的實(shí)驗(yàn)室殘幣測(cè)試獲取了良好的結(jié)果成績(jī)。

1.3? 觀察指標(biāo)

以羅氏固體培養(yǎng)基檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)比較兩種方法的診斷準(zhǔn)確率、敏感度和特異度。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析數(shù)據(jù)， 計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 3種診斷方法陽性率比較

GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)對(duì)耐藥結(jié)核病診斷陽性率95.24%，涂片鏡檢的診斷陽性率78.57%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.126，P<0.05）;GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)與金標(biāo)準(zhǔn)檢查結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.048，P>0.05）。見表1。

2.2? 涂片鏡檢和GeneXpert Mtb/RIF診斷方法敏感度及特異度比較

GeneXpert Mtb/RIF診斷敏感度95.24%，特異度93.46%，涂片鏡檢診斷敏感度78.57%，特異度75.21%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.126，P<0.05）。見表2 。

2.3? GeneXpert Mtb/RIF與傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)構(gòu)比較

42例患者傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示，對(duì)利福平耐藥患者14例，耐藥率33.33%;對(duì)利福平敏感患者28例，敏感率65.12%;GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)結(jié)果顯示，對(duì)利福平耐藥患者13例，耐藥率30.95%;對(duì)利福平敏感患者25例，敏感率59.52%，將傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)定為金標(biāo)準(zhǔn)，GeneXpert Mtb/RIF對(duì)利福平耐藥結(jié)核病的檢測(cè)敏感度為92.86%，特異度89.29%，與傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.055、0.460，P>0.05）。

3? 討論

結(jié)核病時(shí)慢性傳染性疾病之一，屬于可對(duì)人類健康造成嚴(yán)重危害的一類疾病。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)臨床耐藥性結(jié)核病在近年來的發(fā)病率不斷提升，對(duì)我國(guó)結(jié)核病防控工作產(chǎn)生了新的不良影響。我國(guó)涂陽肺結(jié)核患者耐藥率高達(dá)40%，其中耐多藥患者約占10%，該類結(jié)核病治療難度大，是我國(guó)近些年傳染病防控部門關(guān)注的重點(diǎn)問題[2]。

耐藥結(jié)核病會(huì)對(duì)患者的健康及生活質(zhì)量造成嚴(yán)重的負(fù)面影響，且具有治療難度、治愈率低的特點(diǎn)，因此及時(shí)發(fā)現(xiàn)疾病并及早開展針對(duì)性治療可有效提升患者的臨床療效。目前臨床中以羅氏固體培養(yǎng)基為診斷該疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，雖然其診斷效果確切，但是其檢測(cè)需要2～5周的時(shí)間才能獲得陽性檢測(cè)報(bào)告，陰性檢測(cè)報(bào)告則需要8周以上，耗時(shí)太久[3]。而痰涂片鏡檢敏感度差，且易受標(biāo)本質(zhì)量、檢查者技術(shù)水平和責(zé)任心的影響，同時(shí)檢出率與痰液樣本的形狀具有一定相關(guān)性，痰液樣本過度濃稠或帶有血液時(shí)，檢測(cè)結(jié)果與唾液痰相比具有更高陽性率，加之其操作技術(shù)受限較多，誤差性較大，具有較高的誤診率，不利于患者的治療[4-5]。近年來隨著我國(guó)醫(yī)療水平和檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用逐漸增多，該種檢測(cè)技術(shù)目前已經(jīng)在多個(gè)國(guó)家和地區(qū)的臨床中獲得良好的應(yīng)用效果，其診斷效果也已經(jīng)經(jīng)過了大量研究的證實(shí)[6]。GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)敏感度和特異度均較高，現(xiàn)已成為WHO推薦的對(duì)結(jié)核病以及耐藥結(jié)核病進(jìn)行檢測(cè)的主要方法。該次研究結(jié)果顯示GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)與金標(biāo)準(zhǔn)具相近，且GeneXpert Mtb/RIF診斷敏感度95.24%，特異度93.46%均顯著高于涂片鏡檢的診斷敏感度78.57%，特異度75.21%，藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)與傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;黃建斌等人[7]的研究結(jié)果顯示，GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)敏感度48.05%，高于涂片檢測(cè)的22.08%，特異度93.33%與涂片檢測(cè)100.00%差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），藥敏實(shí)驗(yàn)中GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)耐藥度為100.00%與傳統(tǒng)藥敏結(jié)果一致，且特異度為96.55%與傳統(tǒng)藥敏結(jié)果100.00%差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），與該次研究結(jié)果具有一致性，可見其對(duì)耐藥性結(jié)核病診斷效果理想。

GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)屬于一體化全自動(dòng)半巢式PCR檢測(cè)系統(tǒng)，對(duì)樣品準(zhǔn)備、提取DNA和擴(kuò)增等步驟進(jìn)行了整合，除樣本預(yù)處理環(huán)節(jié)外，其余檢測(cè)步驟均在反應(yīng)盒內(nèi)發(fā)生，檢測(cè)全過程僅需2 h，大大縮短了金標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)時(shí)間，且不受外界環(huán)境和因素的影響，誤差小。GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)設(shè)計(jì)了質(zhì)量控制點(diǎn)一共2個(gè)，包括探針信號(hào)和樣本質(zhì)量控制兩種，樣本質(zhì)量控制對(duì)DNA提取步驟的準(zhǔn)確性、樣本檢測(cè)過程對(duì)實(shí)時(shí)定量PCR產(chǎn)生的干擾性進(jìn)行監(jiān)測(cè)，而探針信號(hào)控制可對(duì)探針熒光信號(hào)干擾PCR反應(yīng)情況進(jìn)行檢測(cè)，以此保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性[8]。同時(shí)該種檢測(cè)方式與涂片鏡檢和藥敏培養(yǎng)檢測(cè)法相比，對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物的安全性要求比較低，可在各種級(jí)別實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)操作。

綜上所述，針對(duì)耐藥結(jié)核病實(shí)施GeneXpert Mtb/RIF檢測(cè)可有效縮短檢測(cè)時(shí)間，提升檢測(cè)效果，有利于幫助臨床醫(yī)生及時(shí)了解患者的病情，為患者臨床治療方案的制定提供了有效的依據(jù)，因此其可用于臨床推廣。

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（收稿日期：2019-08-17）