曹暉

[摘要] 目的 探討外周血結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對活動性結(jié)核病的診斷價值。方法 方便選取2017年1月—2018年12月醫(yī)院收治的疑似結(jié)核病患者125例為研究對象，按照患者的臨床診斷結(jié)果分成47例活動性肺結(jié)核組，22例活動性結(jié)核性胸膜炎組，14例非活動性結(jié)核組以及42例非結(jié)核肺部疾病組，另選取同期在該院接受健康體檢的45名對象作為對照組。根使用T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）對所有患者進(jìn)行檢查，對比4組實(shí)驗(yàn)對象的T-SPOT.TE檢查結(jié)果和肺結(jié)核肺部患者的T-SPOT.TB的檢測結(jié)果。結(jié)果 活動性結(jié)合患者的陽性率明顯高于非活動性肺結(jié)核組（95.45% vs 50.00%，t=21.167 ），非結(jié)核肺疾病患者陽性率高于對照組（28.57% vs 8.89%，t=4.213，P<0.05）;活動性肺結(jié)核組患者陽性率要明顯高于活動性胸膜炎組（95.45% vs 81.81%，t=5.107，P<0.05）。結(jié)論 外周血結(jié)核感染T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對結(jié)核病的敏感性較高，對于排除結(jié)核分枝桿菌感染有重要意義，可以減少不必要的抗結(jié)核治療，但是在實(shí)際應(yīng)用中還要結(jié)合患者的實(shí)際情況謹(jǐn)慎判斷。

[關(guān)鍵詞] 外周血結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn);活動性結(jié)核;胸膜炎

[中圖分類號] R52? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）11（b）-0178-03

[Abstract] Objective To investigate the diagnostic value of T cell spot test for peripheral blood tuberculosis infection in active tuberculosis. Methods A total of 125 suspected tuberculosis patients admitted to the hospital from January 2017 to December 2018 were convenienty selected into the study. According to the clinical diagnosis of the patients， 47 active pulmonary tuberculosis group， 22 active tuberculous pleurisy group， and 14 inactive patients were selected in tuberculosis group and 42 non-tuberculous lung disease group， 45 subjects who received a physical examination in the hospital at the same time were selected as the control group. All patients were examined by T-cell spot test （T-SPOT.TB）， and the results of T-SPOT.TE examination of four groups of subjects and T-SPOT.TB of pulmonary tuberculosis patients were compared. Results The positive rate of active combined patients was significantly higher than that of the inactive pulmonary tuberculosis group （95.45% vs 50.00%， t=21.167 ）. The positive rate of non-tuberculous lung disease patients was higher than that of the control group （28.57% vs 8.89%， t= 4.213， P<0.05）; the positive rate of patients with active tuberculosis was significantly higher than that of active pleurisy group （95.45% vs 81.81%， t=5.107， P<0.05）. Conclusion The T-cell spot test of peripheral blood tuberculosis infection is highly sensitive to tuberculosis， which is of great significance for the exclusion of mycobacterium tuberculosis infection and can reduce unnecessary anti-tuberculosis treatment. However， in practical application， the test should be carefully judged based on the actual situation of patients.

[Key words] Peripheral blood tuberculosis infection T cell spot test; Active tuberculosis; Pleurisy

肺結(jié)核疾病是常見的慢性傳染性疾病，且有很強(qiáng)的潛伏期，常規(guī)的痰涂片檢查需要合并大量的其它檢查項(xiàng)目來確診，浪費(fèi)時間，但結(jié)果不理想。結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）是一種以γ-干擾素釋放試驗(yàn)為基礎(chǔ)，通過檢測單細(xì)胞上的結(jié)核分枝桿菌來判斷疾病的新型檢驗(yàn)方式[1]。T-SPOT.TB中使用的特異性抗原主要集中在結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群中，而其他卡介苗中都沒有，所以該試驗(yàn)的特異性和敏感性比較高。近些年來在潛在性結(jié)核感染的篩查中廣泛應(yīng)用，但是對檢查活動性結(jié)核病患者的應(yīng)用還存在一定異議，該文方便選取2017年1月—2018年12月醫(yī)院收治的疑似結(jié)核病患者125例為研究對象，展開討論?，F(xiàn)報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取該院收治的疑似結(jié)核患者125例為研究對象，按照患者的臨床診斷結(jié)果分成47例活動性肺結(jié)核組，22例活動性結(jié)核性胸膜炎組，14例非活動性結(jié)核組以及42例非結(jié)核肺部疾病組，另選取同期在該院接受健康體檢的45名對象作為對照組。所有對象均接受生化檢查、免疫檢查和X線檢查，確診無結(jié)核病患者和結(jié)核病史。納入該次研究的所有對象均未感染嚴(yán)重器質(zhì)性疾病、無哺乳期、精神疾病。

1.2? 臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)

活動性肺結(jié)核?。禾低科Y(jié)果陽性，痰培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌陽性或痰培養(yǎng)結(jié)果陰性但是有結(jié)核病的臨床癥狀，影像學(xué)檢查結(jié)果能夠確診，使用抗結(jié)核藥物治療取得效果。非活動性肺結(jié)核：細(xì)菌檢查顯示為陰性，患者無任何癥狀和體征，存在肺結(jié)核病史和治療史，影像學(xué)檢查可見鈣化灶、空洞、結(jié)節(jié)性病灶、胸膜粘連等?；顒有孕啬ぱ祝盒厍环e液結(jié)核桿菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽性，組織病理檢查可見干酪樣壞死;痰涂片檢查陰性患者，存在胸腔積液滲出，腫瘤標(biāo)志物陰性;使用常規(guī)治療無效果，通過抗結(jié)核治療后癥狀減輕。潛伏性結(jié)核分枝桿菌：影像學(xué)和細(xì)菌學(xué)檢查無異常，無感染病史和治療史。非結(jié)核?。和ㄟ^檢查發(fā)現(xiàn)患者出現(xiàn)的癥狀是其他疾病造成的，經(jīng)過對癥治療后改善[2]。

1.3? 研究方法

使用人淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行外周血單個核細(xì)胞分離，按照T-SPOT.TB試劑盒操作說明書進(jìn)行操作。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

該次研究中收集的數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對比分析，計(jì)量資料使用（x±s）表示，應(yīng)用t檢驗(yàn);多組對比采用單因素方法進(jìn)行分析，應(yīng)用非參數(shù)秩和檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料[n（%）]使用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

活動性結(jié)合患者的陽性率明顯高于非活動性肺結(jié)核組，非結(jié)核肺疾病患者陽性率高于對照組（P<0.05）;活動性肺結(jié)核組患者陽性率要明顯高于活動性胸膜炎組（P<0.05）。見表1、2。

3? 討論

T-SPOT.TB試驗(yàn)是由γ-干擾素釋放試驗(yàn)發(fā)展而來的，通過RDI編碼中的CFP-10以及ESAT-6作為交換T細(xì)胞的特異性刺激原，使用γ-干擾素釋放技術(shù)來檢測人體外周血中結(jié)核分枝桿菌特有的T細(xì)胞，從而判斷疾病[3]。

我國結(jié)核病的發(fā)病率非常高，且有大量潛伏期結(jié)核感染人群，但是現(xiàn)在國內(nèi)外均沒有關(guān)于潛伏期結(jié)核感染的明確標(biāo)準(zhǔn)，也沒有指定的標(biāo)準(zhǔn)來檢驗(yàn)。T-SPOT.TB試驗(yàn)通過ELISPOT技術(shù)來檢測結(jié)核疾病患者的外周血，抗原ESAT-6、CFP-10肽段庫受到刺激后會釋放γ干擾素的T細(xì)胞，通過判斷T細(xì)胞的數(shù)量可以判斷結(jié)核疾病[4]。該方法是在2001年英國學(xué)者首次應(yīng)用使用，隨后在歐洲、美國等地大量使用，也取得良好的效果。從細(xì)菌學(xué)角度出發(fā)，是不存在真正的菌陰肺結(jié)核的，如果沒有結(jié)核分枝桿菌的侵襲，也就不會感染發(fā)病[5]。目前臨床上所說的菌陰肺結(jié)核患者通過檢測也同樣可以發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌，只是通過常規(guī)技術(shù)不能通過痰標(biāo)本檢測為陽性。如果進(jìn)行痰涂片檢查，還需要花費(fèi)大量時間和多種檢查先排除呼吸系統(tǒng)疾病后才能確診。T-SPOT.TB檢測能夠提供準(zhǔn)確結(jié)果，還可以減少檢查時間，為活動期肺結(jié)核患者的早期診斷提供依據(jù)。

T-SPOT.TB試驗(yàn)結(jié)果不會受到CD4-T細(xì)胞的影響，且絕大部分非結(jié)核分枝桿菌和卡介苗都沒有交叉免疫反應(yīng)，患者自身的免疫狀態(tài)對該試驗(yàn)的影響也非常小，所以檢測結(jié)果的敏感性較高。隨著近些年來T-SPOT.TB檢查應(yīng)用的逐漸廣泛，國外的學(xué)者對其開展了大量的樣本研究，得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，T-SPOT.TB在活動性結(jié)核病中診斷敏感性約為80%～100%，特異性約為60%。該次研究結(jié)果顯示的檢測靈敏度可達(dá)到95.74%，與文獻(xiàn)結(jié)果大致相同[6]。在該次研究中出現(xiàn)了5例假陽性患者，經(jīng)過二次檢查確認(rèn)，其中有2例患者肺癌、2例自身免疫系統(tǒng)疾病和1例糖尿病，分析原因提示這部分患者由于病情比較嚴(yán)重，基礎(chǔ)疾病和機(jī)體免疫功能低下會掩蓋潛伏的結(jié)核分枝桿菌感染，且臨床癥狀不明顯，不容易排除。且這部分患者檢查中兩個抗原均為低強(qiáng)度陽性，斑點(diǎn)數(shù)量也少于10個，可能與樣本質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)器械有一定關(guān)系，還需要加大樣本量繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

該次研究中采用T-SPOT.TB試驗(yàn)分別對非活動性結(jié)核患者和活動性結(jié)核病患者進(jìn)行檢測對比，結(jié)果顯示非活動性結(jié)核患者的陽性率為50.00%，明顯低于活動性結(jié)核患者的陽性率95.45%，這與羅丹等人[7]的研究結(jié)果大致相同。該次研究中沒有將陳舊性肺炎和潛伏感染患者排除，所以才會出現(xiàn)非活動性結(jié)核患者出現(xiàn)陽性，但是T-SPOT.TB在非活動性結(jié)核患者中的檢測結(jié)果是否可以提示結(jié)核的復(fù)發(fā)率有待于進(jìn)一步研究。韓利梅等人[8]的研究結(jié)果中肺結(jié)核患者與肺外結(jié)核患者的陽性率無明顯對比意義，這與該次研究結(jié)果類似，但是該次研究中肺外結(jié)核患者的陽性率略低，分析原因可能是由于該次研究收納的肺外結(jié)核患者多以結(jié)核性腦膜炎為主?；颊吒腥痉谓Y(jié)核后，活性T細(xì)胞會聚集在炎癥反應(yīng)位置，由于病變位置有免疫病理學(xué)隔室化效應(yīng)，所以T細(xì)胞數(shù)量對判斷疾病有重要意義。

綜上所述，外周血結(jié)核感染T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對結(jié)核病的敏感性較高，對于排除結(jié)核分枝桿菌感染有重要意義，可以減少不必要的抗結(jié)核治療，但是在實(shí)際應(yīng)用中還要結(jié)合患者的實(shí)際情況謹(jǐn)慎判斷。

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[1]? 吳瓊，王堃，丘世飏， 等.T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核感染診斷中的臨床應(yīng)用[J].中國醫(yī)師雜志，2018，20（1）：87-91.

[2]? 張少俊，楊馳，范琳.血清結(jié)核抗體診斷活動性結(jié)核病的價值[J].中國防癆雜志，2018，40（1）：20-25.

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[7]? 羅丹，潘建華.T淋巴亞群及T-SPOT.TB檢測對活動性結(jié)核病的鑒別診斷[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2015，15（4）：393-396.

[8]? 韓利梅，李新，穆清爽， 等.外周血結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)和胸水腺苷脫氨酶活性檢測在結(jié)核性胸腔積液診斷中的應(yīng)用評價[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2018，47（7）：940-953.

（收稿日期：2019-08-17）