馬軍 張愛民 天津市中西醫(yī)結合醫(yī)院南開醫(yī)院 （天津 300100）

內容提要： 目的：研究全血標本肌鈣蛋白I（TnI）應用AQT90FLEX分析儀檢測的方法學。方法：隨機抽取2019年3月1日～5日本院急診患者的靜脈血標本63份。采用AQT90FLEX分析儀檢測全血標本肌鈣蛋白I，驗證分析測量范圍、攜帶污染率、功能靈敏度、參考區(qū)間。結果：0.010～16.0μg/L范圍內的線性良好，攜帶污染率、功能靈敏度分別為0.018%、0.010μg/L，TnI濃度通過參考區(qū)間驗證；63份全血標本中TnI濃度＜0.010μg/L的比例為80.95%，處于正常范圍內，19.05%的全血標本存在TnI濃度偏高情況。結論：AQT90FLEX分析儀應用在全血標本肌鈣蛋白I的檢測中具有線性良好的優(yōu)勢，且攜帶污染率、功能靈敏度可達到質量要求且參考區(qū)間驗證通過，針對全血標本TnI濃度高的患者應盡早進行心電圖檢查，便于早期發(fā)現及防治急性心肌梗死。

如何快速將急性心肌梗死患者與胸痛患者準確鑒別，對于及時進行對癥治療、改善預后具有重要作用。全血標本肌鈣蛋白I（Troponin I，TnI）在急性心肌梗死的診斷中具有較高的特異性和敏感度，可作為快速輔助診斷心肌梗死突發(fā)的有效指標，但是在臨床實際應用過程中，采用血漿標本對TnI進行檢測具有檢測耗時長的不足[1]，耽誤患者的治療時間。AQT90FLEX分析儀是一種全自動的床旁快速免疫分析儀，對全血標本TnI進行檢測的時間較短，有利于患者盡快接受對癥治療，本文旨在分析應用AQT90FLEX分析儀檢測TnI的方法學，正文詳細內容如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

研究對象：來自本院急診患者的靜脈血標本63份（屬于2019年3月1日～5日）。健康體檢者的臨床診斷結果正常，血液常規(guī)、免疫檢驗、生化、B超、心電圖檢查結果均正常。靜脈血標本均經乙二胺四乙酸二鉀（EDTA—K2）抗凝，靜脈血標本對應者的一般信息為：男28例，女35例；年齡為18～97歲，平均65.38歲。

1.2 方法

（1）分析測量范圍評價：以EP-6A文件為依據，將TnI濃度靠近線性范圍上限的患者全血標本作為高值濃度（H），TnI濃度低則表示為低值濃度（H），形成系列檢測標本，再使用AQT90FLEX分析儀檢測TnI，取每個濃度檢測兩次的平均值，分析試驗數據的可靠性之后，進行多項式回顧分析。

（2）攜帶污染率：對高濃度TnI全血標本、低濃度TnI全血標本分別檢測三次，得到H1、H2、H3、L1、L2、L3測定值，攜帶污染率為（L1-L3）×（H3-L3）×100.00%。

（3）功能靈敏度：以EP-7A文件為依據反復測定TnI低值標本，得到±s、變異系數（CV），功能靈敏度即為CV不足20%的試驗樣品所具有的分析物水平。

（4）參考區(qū)間：從在本院進行體檢的健康體檢者中隨機選擇5例進行驗證，均檢測TnI，統(tǒng)計檢測結果，當檢測結果在參考區(qū)間（TnI＜0.023μg/L）內的數量在90%及以上，則說明可接受，已通過驗證，針對未通過驗證的情況，需進行參考區(qū)間確認試驗。

1.3 觀察指標

觀察分析測量范圍、攜帶污染率、功能靈敏度、參考區(qū)間。觀察檢測結果。

1.4 統(tǒng)計學分析

將觀察指標數據錄入統(tǒng)計學軟件SPSS21.0、Microsoft Excel 2010中進行處理，用[n(%)]的形式表示計數資料，χ2檢驗，用±s的形式予以表示計量資料，t檢驗，采用多項式回歸分析，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2.結果

2.1 分析測量評價結果

直線回歸分析顯示線性范圍為0.010～16.0μg/L，提示線性良好（r=0.989）。

2.2 攜帶污染率

攜帶污染率為0.018%。

2.3 功能靈敏度

TnI濃度為0.010μg/L的CV值為16.00%，在20%以內，結果為可接受，表明TnI的功能靈敏度即為線性范圍最低值（0.010μg/L）。

2.4 參考區(qū)間

5名健康體檢者全血標本的TnI濃度為0.010μg/L以下，均在參考區(qū)間內，結果為通過。

2.5 檢查結果

經AQT90FLEX分析儀檢查結果顯示，63例急診患者的全血標本中TnI濃度＞0.010μg/L者有12例（19.05%），其余51例（80.95%）患者的全血標本中TnI濃度均＜0.010μg/L，提示51例患者的TnI濃度在正常區(qū)間內。

3.討論

在臨床全血肌鈣蛋白I的檢測中多采用免疫分析儀，且不同的廠家生產的免疫分析儀及配套的質控品存在差異，導致全血肌鈣蛋白I的檢測結果也出現差異，因此為了減少檢測結果的誤差，提高檢測準確率，選擇一種準確性高的儀器和檢測方法十分重要。

全血肌鈣蛋白I是診斷急性心肌梗死敏感性、特異性均較高的指標[2]，AQT90 FLEX分析儀應用在全血肌鈣蛋白I檢測中采用時間分辨熒光免疫分析法，其原理在于：預先固化生物素?；膯慰寺】筎nI抗體至檢測杯里的鏈霉素蛋白表面，并在捕獲抗體表面分別加入到分隔層和示蹤抗體，于分析過程中將標本、分析液自動進入至含有特應試劑的試杯中，示蹤抗體、捕獲抗體與TnI抗體形成一個三明治樣結構，孵育結束后利用時間分辨熒光免疫分析法對干燥試杯表面的銪標記示蹤抗體信號進行測定，通過銪標記信號直接測定被分析物質，將測得的信號直接向濃度轉化，便于工作人員直接觀察和記錄。同實驗室的大項檢驗設備進行比較，AQT90 FLEX分析儀可為用戶提供簡便和安全的操作，能夠連續(xù)隨機進樣，最快10min出結果，具有無污染的特點，特別適合應用在急診胸痛TnI的檢測中，從而有利于快速鑒別診斷胸痛、急性心肌梗死，便于患者及時接受對癥治療。

本文從多個方面對AQT90 FLEX分析儀的檢測價值進行了分析，以NCCLS EP5-A文件為參照，整體評估各個批次后發(fā)現AQT90 FLEX分析儀的分析測量范圍、攜帶污染率、功能靈敏度均能滿足臨床TnI檢測需要，參考區(qū)間能夠滿足性能要求。本次研究中檢出12例患者的TnI濃度不在正常范圍內，提示其存在急性心肌梗死發(fā)生風險，應盡早進行心電圖檢查。另外易火春，朱建輝，王思瑜，等[3]在《AQT90 FLEX分析儀檢測全血肌鈣蛋白I的方法學評價》一文中還提到，不同濃度質控品的TnI總CV在規(guī)定的允許誤差范圍內，提示總不精密度處于可接受范圍內；質評物檢測結果在規(guī)定允許的誤差范圍內，證明了AQT90 FLEX分析儀用于檢測全血肌鈣蛋白I具有較高的精密度和準確度，而本次研究中由于尚無質控品及質評物，因此無法進行精密度和準確度檢驗。

總而言之，在全血肌鈣蛋白I的檢測中采用AQT90 FLEX分析儀具有較高的臨床價值，可為臨床檢測急性心肌梗死提供科學、有效的參考依據。