李風梅 張龔敏 吳林蔚 廣東省藥品監(jiān)督管理局審評認證中心 （廣東 廣州 510080）

內(nèi)容提要： 參考《體外診斷試劑注冊管理辦法》《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》及《免于進行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》等一系列法規(guī)的要求，對二類診斷試劑細菌性陰道病檢測試劑盒的審評關(guān)注點性能指標、臨床評價、研究資料進行總結(jié)分析。

由多種病原菌導(dǎo)致的陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)，即生殖道正常菌群數(shù)量減少，代之以一組厭氧菌數(shù)量增加，從而引發(fā)的陰道炎性病變，臨床上稱之為細菌性陰道?。˙acterial Vaginosis，BV）?；颊咧饕憩F(xiàn)為白帶增多、異味、外陰不適等[1]。

因此，監(jiān)測生殖道內(nèi)正常菌群的數(shù)量，以保持其菌群生態(tài)平衡尤為重要。臨床上一般將培養(yǎng)并檢出病原體作為微生物感染性疾病的“金標準”，但由于BV表現(xiàn)為菌群失調(diào)，培養(yǎng)會造成干擾。故培養(yǎng)法不是BV可靠的診斷方法?，F(xiàn)階段常見的檢測方法為多胺法、氣－液相色譜分析法、唾液酸酶法這三大類。氣－液相色譜分析法陽性率偏低，且對檢測設(shè)備及操作人員要求高，現(xiàn)未廣泛適用于臨床；多胺法、唾液酸酶法則操作簡單，無需特殊設(shè)備，敏感性及特異性均良好，結(jié)果判斷快速直觀，適合臨床篩查[2]。

本文結(jié)合注冊技術(shù)審評關(guān)注點，對使用唾液酸酶法原理進行檢測的細菌性陰道病檢測試劑盒的安全有效性評價關(guān)注點進行研究分析。

1.預(yù)期用途

參照《體外診斷試劑注冊管理辦法》[3]第三章的描述，細菌性陰道病檢測試劑盒屬于二類試劑“用于微生物檢測/蛋白質(zhì)檢測試劑”的范疇。參照《6840體外診斷試劑分類子目錄（2013）版》[4]的描述，該產(chǎn)品屬于二類體外診斷試劑“細菌唾液酸酶檢測”的范疇。主要用于檢測陰道分泌物樣本中的唾液酸酶活性，臨床上主要用于細菌性陰道病的輔助診斷。為定性產(chǎn)品。

2.性能指標

參照《體外診斷試劑注冊管理辦法》（總局令第5號）及《國家食品藥品監(jiān)督管理總局關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（2014年第44號）》[5]的要求，試劑的注冊申報資料需包含產(chǎn)品技術(shù)要求[6]。其中，產(chǎn)品技術(shù)要求中主要涉及的性能指標及檢驗方法應(yīng)結(jié)合申報注冊產(chǎn)品的實際情況來制定，并不低于現(xiàn)行相關(guān)法規(guī)及國、行標的要求，從而以達到控制產(chǎn)品質(zhì)量，以確保后續(xù)臨床使用的有效性。

目前細菌性陰道病試劑盒尚無相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)性文件發(fā)布，結(jié)合其他已上市定性產(chǎn)品的技術(shù)要求，注冊申請人制定產(chǎn)品性能指標至少應(yīng)包括外觀、陰/陽性符合率、靈敏度、批內(nèi)/批間精密度。具體要求推薦如下：

2.1 外觀

液體型試劑/試紙型試劑應(yīng)分別描述其顏色、性狀、pH等要求，液體型試劑還應(yīng)包括試劑裝量的要求。

2.2 陰/陽性符合率

同時抽取多個檢測試劑，分別對陰/陽性參考品進行檢測，各自符合率均應(yīng)滿足企業(yè)要求。

注：應(yīng)明確產(chǎn)品陰/陽性結(jié)果的判讀標準及統(tǒng)計方法，建議各自至少選取10個檢測試劑，結(jié)果判斷應(yīng)明確要求顯色反應(yīng)無差異，且符合率應(yīng)不低于95%。

2.3 靈敏度

結(jié)合產(chǎn)品實際使用的方法，列出產(chǎn)品顯色陽性結(jié)果所需的最低檢測濃度。

注：建議選擇從高到低多個濃度參考品進行探索研究，從而確定出最敏感合適的檢測濃度。

2.4 批內(nèi)/批間精密度

同時取一批多個/三批多個檢測試劑，分別對高、低不同濃度的參考品進行檢測，按照各自結(jié)果的判讀標準進行統(tǒng)計，批內(nèi)/批間結(jié)果均應(yīng)顏色反應(yīng)無差異。

注：建議批內(nèi)精密度研究至少選取10個檢測試劑，批間精密度至少選擇三批，每批建議至少10個檢測試劑進行試驗。

3.臨床評價

“細菌唾液酸酶檢測”已于2018年9月被納入二類免臨床體外診斷試劑的范疇，故細菌性陰道病檢測試劑盒則可選擇適宜的途徑進行臨床評價[7-9]。

3.1 臨床評價

注冊申請人可參照《免于進行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》[8]的要求提交臨床評價資料。該產(chǎn)品為定性產(chǎn)品，應(yīng)選擇陰/陽性樣本各自均不低于50例的樣本量進行臨床研究，最終形成完整的臨床評價報告。報告內(nèi)容應(yīng)至少包括試驗過程、統(tǒng)計方法、樣本的溯源情況等信息。

3.2 臨床試驗

細菌性陰道病檢測試劑盒雖已免臨床，注冊申請人仍可選擇臨床試驗的方式進行研究，具體可參照2014年發(fā)布實施的《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開展臨床試驗。申請人在注冊申報時，應(yīng)提交臨床試驗方案和臨床試驗報告。具體臨床試驗時建議考慮以下幾方面內(nèi)容：

3.2.1 臨床機構(gòu)

應(yīng)在至少2家國家藥品監(jiān)督管理局備案的臨床單位進行試驗，并提交醫(yī)學倫理委員會意見及知情同意書，同時應(yīng)向當?shù)毓芾聿块T做好臨床試驗備案工作。

注：2018年處于過渡期，既可按照老法規(guī)要求選擇省級臨床單位進行試驗，也可選擇國家藥品監(jiān)督管理局備案的臨床單位進行試驗。

3.2.2 臨床試驗

應(yīng)選擇性能更優(yōu)，臨床認為較好的產(chǎn)品進行同步盲法比對研究?？倶颖緮?shù)不低于200例，建議包含一定數(shù)量的干擾樣本。兩家臨床單位應(yīng)保證臨床試驗方案的一致性。

3.2.3 統(tǒng)計分析

定性產(chǎn)品的統(tǒng)計分析應(yīng)至少包括陰/陽性符合率、總符合率及一致性（如Kappa）的統(tǒng)計分析，且Kappa值應(yīng)滿足醫(yī)學統(tǒng)計學的要求。

3.2.4 臨床試驗報告

臨床評價資料應(yīng)至少包括試驗方案和試驗報告兩部分內(nèi)容，且試驗報告中所述試驗方法內(nèi)容應(yīng)與方案中的描述相一致，并詳細列出整個試驗的操作過程及整體設(shè)計關(guān)鍵點。此外，試驗報告應(yīng)包括試驗的原始數(shù)據(jù)及其他關(guān)鍵性的附件信息內(nèi)容，如臨床比對產(chǎn)品注冊相關(guān)信息及說明書等。

4.研究資料

體外診斷試劑的研究資料主要包括主要原材料、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究。細菌性陰道病檢測試劑盒為定性產(chǎn)品，原材料中一般涉及到質(zhì)控品、參考品，建議注冊申請人在申報資料中明確質(zhì)控品、參考品的制備方法及詳細來源信息[6]。生產(chǎn)工藝中則建議注冊申請人明確產(chǎn)品的反應(yīng)原理，提交申報產(chǎn)品涉及反應(yīng)體系關(guān)鍵控制點（如加樣量、試劑量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間）的詳細研究資料。再者，該產(chǎn)品為體外診斷試劑，原材料中會涉及到某些生物活性物質(zhì)，應(yīng)提供相應(yīng)的生物安全性研究，至少應(yīng)包括HIV、HBV、HCV、TP這四項傳染病病原體的檢測信息。

5.結(jié)語

本文結(jié)合現(xiàn)行體外診斷試劑法律法規(guī)及國、行標的要求，參考二類體外診斷試劑的注冊審評規(guī)程，結(jié)合細菌性陰道病檢測試劑的實際產(chǎn)品特點，僅列明該類產(chǎn)品的幾個核心審評關(guān)注點[6]。體外診斷試劑注冊資料的編寫遠不限于該幾項列明內(nèi)容，注冊申請人應(yīng)嚴格參照法規(guī)要求提交其他注冊資料，如綜述、分析評估、穩(wěn)定性研究、生產(chǎn)記錄、檢測報告、說明書等。

此外，注冊申請人亦可根據(jù)產(chǎn)品的實際情況編寫上述探討的幾項內(nèi)容。如技術(shù)要求性能指標可增加“特異性”的要求；臨床評價增加干擾性樣本的相關(guān)研究等等。

綜上所述，本文的撰寫，目的是統(tǒng)一相關(guān)審評人員的審評尺度，以便更系統(tǒng)地評價該類產(chǎn)品的安全有效性。此外，亦可對一些生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品注冊資料的編寫工作起到一定的指導(dǎo)作用。