徐 丹，蔡 錚，賈 彩，駱 靜，吳 鐳

（1.武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，湖北 武漢430071；2.南方醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥劑學(xué)系，廣東 廣州510515；3.中國(guó)科學(xué)院過程工程研究所多相復(fù)雜系統(tǒng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100190；4.北京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系，北京100875；5.國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)醫(yī)學(xué)科學(xué)部，北京100085）

阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD）是一種起病隱匿的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，臨床上主要表現(xiàn)為漸進(jìn)性記憶障礙、認(rèn)知功能障礙、人格改變及語言障礙等神經(jīng)精神癥狀，嚴(yán)重影響社交、職業(yè)和生活能力。AD 病因迄今未明。據(jù)目前的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界有4400 萬人患有AD［1］。預(yù)計(jì)到2050 年，隨著人口老齡化，這一數(shù)字將增加3倍以上，僅美國(guó)每年AD患者的相關(guān)費(fèi)用成本就超過6000億美元。我國(guó)是世界人口大國(guó)，目前AD發(fā)病率為0.5%?；颊呒s有600萬，而且每年新增大約30 萬。面對(duì)逐年增多的AD 患者，由AD 造成的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)不可低估，加強(qiáng)基金資助AD 的研究具有重要意義［2］。

2009-2018 年10 年間，國(guó)家自然科學(xué)基金（National Natural Science Foundation of China，NSFC）在醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)和化學(xué)等研究領(lǐng)域資助AD 研究各類申請(qǐng)項(xiàng)目共計(jì)1242 項(xiàng)，資助金額共計(jì)6.05241 億元。近10 年資助項(xiàng)目數(shù)總體呈快速增加趨勢(shì)，2018年較2009年資助項(xiàng)目數(shù)提高了5.1倍，資助金額增加了8.2倍。資助項(xiàng)目類別包括重大研究計(jì)劃、重點(diǎn)項(xiàng)目、國(guó)際（地區(qū)）合作與交流項(xiàng)目、聯(lián)合基金、面上項(xiàng)目、青年基金和地區(qū)基金，以及相關(guān)研究領(lǐng)域的國(guó)家杰出青年基金和優(yōu)秀青年基金等人才項(xiàng)目。此外，還有1項(xiàng)針對(duì)AD定量診斷檢測(cè)的國(guó)家重大科研儀器研制項(xiàng)目。資助的申請(qǐng)代碼主要集中在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病、老年醫(yī)學(xué)、藥物藥理學(xué)和中醫(yī)中藥學(xué)。本文主要分析近10 年NSFC資助下針對(duì)防治AD 藥物的基礎(chǔ)研究項(xiàng)目，重點(diǎn)總結(jié)AD防治藥物的新機(jī)制和新靶點(diǎn)，同時(shí)對(duì)AD動(dòng)物模型的新進(jìn)展、防治AD 藥物研究存在的挑戰(zhàn)和展望進(jìn)行分析和總結(jié)。

1 防治AD藥物機(jī)制和靶點(diǎn)研究的變化

AD 的特征性病理改變?yōu)槟X組織內(nèi)β 淀粉樣蛋白（amyloid β-protein，Aβ）沉積形成的細(xì)胞外老年斑（senile plaque，SP）和tau蛋白過度磷酸化形成的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangle，NFT），以及神經(jīng)元丟失伴膠質(zhì)細(xì)胞增生等。AD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，早期藥物研究主要是圍繞著Aβ 級(jí)聯(lián)學(xué)說和tau蛋白異常修飾學(xué)說［3-4］的相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行，但隨著研究的不斷深入，參與AD 發(fā)病過程的一些新調(diào)控機(jī)制，如自噬和炎癥、表觀遺傳修飾、長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）和微小RNA（microRNA，miRNA）調(diào)控及腸道菌群失衡等，也逐漸成為近年來AD防治藥物研究的新熱點(diǎn)。

1.1 抑制Aβ生成、聚合和促進(jìn)Aβ清除

AD 患者腦部有Aβ 產(chǎn)生過多和（或）對(duì)其清除有障礙。因此，基于“Aβ學(xué)說”的藥物研究主要集中在降低Aβ生成、阻斷Aβ聚合或增加Aβ的清除。病理狀態(tài)下AD 患者腦部的Aβ 來自于淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protein，APP），經(jīng)過β-分泌酶（β-secretase，BACE1）和γ-分泌酶降解途徑產(chǎn)生。為有效降低Aβ的生成，抑制BACE1和γ-分泌酶是關(guān)鍵。迄今針對(duì)BACE1和γ-分泌酶的臨床試驗(yàn)無一成功，可能與這些藥物不能穩(wěn)定地透過血腦屏障有關(guān)。前期BACE1 抑制劑維蘆司他（verubecestat，MK-8931）在針對(duì)輕到中度AD 患者的Ⅱ和Ⅲ期臨床試驗(yàn)中達(dá)到了安全性要求，進(jìn)而開展了一項(xiàng)針對(duì)尚未出現(xiàn)癥狀的AD高危患者的Ⅲ期臨床測(cè)試。然而，由于缺乏效果，默克公司于2018年2月宣布停止MK-8931 的臨床試驗(yàn)。針對(duì)Aβ 靶點(diǎn)，近10 年NSFC 資助的代表性項(xiàng)目有“分子伴侶AChE誘導(dǎo)Aβ 寡聚體形成的動(dòng)力學(xué)和膜離子通道改變的研究”（2009）、“白介素-1受體激活調(diào)控淀粉樣前體蛋白α剪切酶對(duì)阿爾茨海默綜合征神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究”（2013）和“基于淀粉樣蛋白代謝調(diào)控研究淫羊藿次苷Ⅱ阿爾茨海默病作用及機(jī)制”（2015）等。這些資助研究主要集中在2015 年之前，提示Aβ靶點(diǎn)如今在防治AD 藥物領(lǐng)域存在著巨大挑戰(zhàn)，研究者們對(duì)這一靶點(diǎn)也有了更加深刻的認(rèn)識(shí)和與時(shí)俱進(jìn)的研究思路。

1.2 抑制tau蛋白磷酸化和擴(kuò)散

神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的遞質(zhì)和突觸蛋白需要通過微管運(yùn)送到突觸部位，正常的tau 蛋白參與微管組裝和穩(wěn)定突觸傳遞機(jī)制。當(dāng)tau蛋白被過度磷酸化并在細(xì)胞內(nèi)聚積時(shí)，可抑制微管組裝，從而損傷軸突轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，導(dǎo)致突觸丟失及退行性變性。抑制tau蛋白過度磷酸化和聚積的化合物有可能成為防治AD的藥物，而特定蛋白激酶的抑制劑可能成為這類藥物的靶點(diǎn)。糖原合酶激酶（glycogen synthase kinase，GSK-3β）在tau蛋白的異常磷酸化過程中起至關(guān)重要的作用。一些公司在專利中已經(jīng)公開了GSK-3β抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)，但將其用于AD 的治療還處于基礎(chǔ)研究階段。另一種防止tau蛋白過度磷酸化的藥物靶點(diǎn)是細(xì)胞周期蛋白依賴激酶5（cyclin-dependent kinases 5，CDK5）。CDK5 與P25 結(jié)合后被活化，該復(fù)合物可以使tau 蛋白迅速過度磷酸化而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)不可逆性微管損壞，直至神經(jīng)元死亡。這類相關(guān)資助的代表性研究有“AAV-9介導(dǎo)的抑制肽在p25轉(zhuǎn)基因小鼠中對(duì)CDK5/p25病理活性的特異抑制及其對(duì)阿爾茨海默病的防治研究”（2012）、“αFGF 改構(gòu)體調(diào)控GSK3β 磷酸化及其靶標(biāo)分子治療AD的分子機(jī)制”（2013）和“具有抗阿爾茨海默癥活性的高選擇性GSK-3β 抑制劑的設(shè)計(jì)、合成與應(yīng)用研究”（2014）。然而，無論是GSK-3β還是CDK5的抑制劑均不能靶向于特定的神經(jīng)細(xì)胞發(fā)揮作用，對(duì)廣泛存在于多個(gè)組織器官的GSK-3β或CDK5 進(jìn)行非特異性抑制，可能會(huì)產(chǎn)生無法預(yù)測(cè)的不良后果。

異常修飾的tau 蛋白在神經(jīng)元之間的傳遞是AD 病情進(jìn)行性惡化的原因之一。近年的研究顯示，tau 病理呈朊樣傳播，而tau 抗體能有效抑制Tau 病理形成并改善AD 模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能［5］。因此，針對(duì)tau的免疫治療也是當(dāng)前AD研究的熱點(diǎn)，被業(yè)界認(rèn)為是治療的希望所在。近年資助的相關(guān)項(xiàng)目有“免疫治療阻斷tau 朊樣傳播及其分子機(jī)制研究”（2017）和“特異性tau單克隆抗體77G阻斷tau病理及其傳播的分子機(jī)制研究”（2018），這些研究對(duì)闡明tau 病理發(fā)生發(fā)展和傳播的分子機(jī)制，為基于特異性tau 被動(dòng)免疫治療藥物開發(fā)奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。但目前tau 抗體的臨床試驗(yàn)、研發(fā)推廣可行性不高，這也是限制其能否應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵因素，希望能夠有所突破。此外，近年的研究發(fā)現(xiàn)，胰島素及胰島素樣生長(zhǎng)因子信號(hào)通路也參與抑制tau病理擴(kuò)散［6］。相關(guān)資助項(xiàng)目有“胰島素改善阿爾茨海默病相關(guān)病變的分子機(jī)制研究”（2017）和“經(jīng)鼻吸入胰島素對(duì)阿爾茨海默病tau 病理擴(kuò)散的抑制作用及其機(jī)制研究”（2018），以深入探討胰島素抑制tau 病理擴(kuò)散的機(jī)制，為AD 治療提供新策略。

1.3 調(diào)控膠質(zhì)細(xì)胞功能

膠質(zhì)細(xì)胞的功能障礙與AD 早期病理改變有關(guān)，被認(rèn)為積極參與了AD 發(fā)生。小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫細(xì)胞。在AD 患者中，小膠質(zhì)細(xì)胞被Aβ激活成反應(yīng)性細(xì)胞，可以吞噬清除SP從而保護(hù)神經(jīng)元，但同時(shí)也可以分泌細(xì)胞毒因子和補(bǔ)體蛋白，促進(jìn)SP 和NFT 的形成而損害神經(jīng)元。星形膠質(zhì)細(xì)胞在AD患者中同樣發(fā)揮著損傷和保護(hù)的雙重作用。研究表明，AD患者A2反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生極化并可能產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用［7］。近年NSFC也資助了很多通過調(diào)控膠質(zhì)細(xì)胞功能來發(fā)揮抗AD 作用的藥物研究，如“蟲草素誘導(dǎo)MG-M2 表型轉(zhuǎn)化上調(diào)NGF 表達(dá)介導(dǎo)AD 神經(jīng)元保護(hù)作用的分子機(jī)制”（2015）、“蟲草素通過CAPS1-ERS途徑調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化抑制Aβ 誘導(dǎo)神經(jīng)毒性的機(jī)制研究”（2016）和“五味子醇甲靶向作用胱天蛋白酶1 雙向調(diào)控AS-M1/M2 表型轉(zhuǎn)化介導(dǎo)AD 神經(jīng)元保護(hù)作用的機(jī)制研究”（2017），這些研究探討了膠質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化介導(dǎo)神經(jīng)元保護(hù)作用的分子網(wǎng)絡(luò)，為靶向新型防治AD 藥物研發(fā)提供了新思路和方法。但目前認(rèn)為通過調(diào)控膠質(zhì)細(xì)胞功能治療AD并不具特異性，可能只是緩解癥狀或延緩AD病程發(fā)展，并不能成為治愈AD的核心思路和靶點(diǎn)。

1.4 調(diào)控自噬和炎癥

自噬是繼凋亡以后，生命科學(xué)的熱門研究領(lǐng)域之一。過去一直認(rèn)為自噬是細(xì)胞死亡的啟動(dòng)機(jī)制，但現(xiàn)在它被廣泛認(rèn)定為細(xì)胞自穩(wěn)的保護(hù)機(jī)制。最近的研究表明，自噬-溶酶體途徑可能是在Aβ 斑塊或NFT形成之前清除錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)或受損細(xì)胞器的重要系統(tǒng)。在自噬的所有調(diào)節(jié)因子中，哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）被廣泛認(rèn)為是自噬調(diào)節(jié)的藥理學(xué)靶標(biāo)。近年來的研究也揭示了mTOR 相關(guān)蛋白酶可作為抗AD 藥物靶標(biāo)的潛在作用［8］。NSFC 近年資助的代表性項(xiàng)目有“mTOR-STAT3-Notch 信號(hào)通路介導(dǎo)的自噬在ALDH2 改善阿爾茨海默病認(rèn)知障礙中的作用”（2014）、“地黃飲子及其有效成分五味子醇甲通過PI3K/Akt/mTOR 通路誘導(dǎo)自噬修復(fù)神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷機(jī)制研究”（2016）和“N-亞油酰酪氨酸靶向脂肪酰胺水解酶誘導(dǎo)神經(jīng)元自噬抗AD的作用及機(jī)制研究”（2018）等。這些研究從調(diào)控自噬的角度闡明藥物抗AD的生物學(xué)機(jī)制，為新型抗AD藥物研發(fā)提供新思路、新靶點(diǎn)。但是，自噬與多種神經(jīng)精神性疾病都存在密切關(guān)聯(lián)，如何區(qū)分疾病的特異自噬蛋白并深入解析其潛在作用，如帕金森病與α-突觸核蛋白、癲癇與自體吞噬蛋白Beclin1、舞蹈癥與亨廷頓蛋白氨基端片段Htt-552等，尤具挑戰(zhàn)性。

自噬與炎癥也密切相關(guān)，炎癥介質(zhì)中的細(xì)胞因子、活性氧和相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子可調(diào)控自噬反應(yīng)，而自噬又可通過Toll樣受體和Nod樣受體信號(hào)通路來調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，且自噬具有雙向調(diào)節(jié)功能，在促炎和抗炎反應(yīng)中都發(fā)揮至關(guān)重要的作用。AD患者中過度激活的小膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)誘發(fā)炎癥反應(yīng)，并釋放大量的神經(jīng)炎癥因子如一氧化氮、白細(xì)胞介素6 和腫瘤壞死因子α 等，這些炎癥因子的堆積被認(rèn)為與自噬功能衰退相關(guān)。相關(guān)資助研究有“水飛薊賓對(duì)阿爾茨海默病及衰老過程中活性氧/活性氮-線粒體-自噬-炎癥小體途徑調(diào)控作用機(jī)制研究”（2012）和“磷酸二酯酶4 抑制劑抗阿爾茨海默病的新機(jī)制：調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞自噬介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥”（2017）。這些研究明確了自噬與小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥之間的關(guān)系，對(duì)發(fā)現(xiàn)抗AD藥物的新機(jī)制和新靶點(diǎn)具有極大的促進(jìn)作用，但仍需深入研究探索其機(jī)制。

1.5 調(diào)控表觀遺傳修飾機(jī)制

表觀遺傳修飾是可逆的，并可能通過藥理學(xué)和飲食來靶向干預(yù)。因此，調(diào)控表觀遺傳修飾的藥物就可能作為治療AD的潛在候選藥物。目前研究已經(jīng)涉及的可能用于治療AD的表觀遺傳調(diào)控藥物包括DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）抑制劑、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑和非編碼RNA等［9］。例如，HDAC抑制劑丙戊酸能通過組蛋白修飾促進(jìn)神經(jīng)元新生，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中具有改善認(rèn)知的作用；但不幸的是，Ⅰ類HDAC 抑制劑（EVP-0334）用于治療AD 的Ⅱ期臨床試驗(yàn)在2018 年2 月也停止了。NSFC 近年資助的代表性研究包括“DNA 甲基化和PI3K/AKT 信號(hào)通路在五味子木脂素抗阿爾茨海默病中的作用及機(jī)制”（2015）、“異菝葜皂苷元治療阿爾茨海默病的組蛋白乙酰化調(diào)控機(jī)制研究”（2015）和“雷公藤單體T10 和T4 對(duì)AD 模型海馬神經(jīng)元neuroligin-1 表達(dá)的影響及其表觀遺傳調(diào)控機(jī)制（2016）”、“原阿片堿（protopine）通過特異性抑制HDAC6用于治療阿爾茲海默病的實(shí)驗(yàn)研究”（2017）。

非編碼RNA 是指不能翻譯為蛋白的功能性RNA分子，其中常見的具有調(diào)控作用的非編碼RNA包括小干擾RNA、miRNA、piRNA以及IncRNA。大量研究表明，非編碼RNA在表觀遺傳學(xué)的調(diào)控中扮演了越來越重要的角色［10］。其中，比較明確的參與AD發(fā)生的非編碼RNA包括IncRNA和miRNA。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，涉及AD的IncRNA主要有BACE1-AS，17A1，NDM29和BC200等。涉及AD的miRNA 則種類更廣，研究比較確切的包括miR-21，miR-124，miR-132，miR-146a 和miR-155 等。NSFC 目前針對(duì)AD 非編碼RNA 調(diào)控的資助研究主要還是集中在發(fā)病機(jī)制方面，相關(guān)藥物研究還十分有限，主要有“基于LncRNA 調(diào)控Aβ 誘導(dǎo)自噬探討維生素D3對(duì)阿爾茨海默病作用機(jī)制”（2015）和“miR-148a-3p 特異性調(diào)控RAGE/α7nAChR 通路及逆轉(zhuǎn)AD 神經(jīng)炎癥損傷的機(jī)制研究”（2018）。這也提示，隨著非編碼RNA 與AD 發(fā)生機(jī)制的深入闡明，靶向非編碼RNA 的抗AD 藥物將是未來的研究趨勢(shì)。但表觀遺傳修飾是個(gè)極其復(fù)雜的生物學(xué)工程，還具有時(shí)空廣泛性，涉及個(gè)體全身甚至群體的代間遺傳，所以針對(duì)這一靶點(diǎn)的防治AD 藥物研究仍然任重而道遠(yuǎn)。

1.6 調(diào)節(jié)腸道菌群失衡

腸道微生態(tài)是近年來的研究熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，腸道微生物與中樞神經(jīng)緊密相關(guān)，可能是中樞神經(jīng)系統(tǒng)與腸道之間對(duì)話新機(jī)制的重要節(jié)點(diǎn)?！拔⑸?腸-腦軸”可能通過多種途徑將腸道微生物與神經(jīng)退行性疾病聯(lián)系起來，并為通過腸道微生物靶向性治療神經(jīng)退行性疾病提供理論依據(jù)。宿主的無菌狀態(tài)、抗生素干擾、益生菌干預(yù)和飲食習(xí)慣等都會(huì)影響腸道微生物的組成和腸道的生理功能，同時(shí)也會(huì)影響宿主的認(rèn)知行為，增加或降低患AD 的風(fēng)險(xiǎn)。由腸道微生物群干擾引起的腸道和血腦屏障的滲透性增加將提高AD的發(fā)生率，表明AD發(fā)病可能始于腸道，與腸道微生物群的不平衡密切相關(guān)。已有研究證實(shí)，在無菌APP轉(zhuǎn)基因AD小鼠模型中，以及口服抗生素治療的正常AD 轉(zhuǎn)基因小鼠中，腸道微生物群的缺失或減少會(huì)導(dǎo)致腦中淀粉樣斑塊沉積的降低［11］。來自非臨床和體外實(shí)驗(yàn)的研究發(fā)現(xiàn)，口服葡萄籽多酚提取物可通過腸道微生物群轉(zhuǎn)化為多種酚酸，后者可穿透血腦屏障并積聚在大腦中，顯著降低Aβ沉積和tau蛋白磷酸化，從而有效調(diào)節(jié)AD發(fā)生和進(jìn)展［12］。這些證據(jù)表明，藥物干預(yù)、個(gè)性化飲食或有益微生物群調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)可成為AD的新治療方法。NSFC 目前相關(guān)的資助研究?jī)H有1 項(xiàng)，“基于腸道菌群、Aβ 和tau 探討槲皮素聯(lián)合維生素D改善AD的機(jī)制研究”（2018）。但毫無疑問，靶向腸道微生態(tài)將是未來抗AD 藥物研究的新靶點(diǎn)。

1.7 其他機(jī)制靶點(diǎn)

膽堿能神經(jīng)受損學(xué)說是最早的AD發(fā)病機(jī)制學(xué)說，認(rèn)為膽堿能神經(jīng)破壞會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿及谷氨酸水平失衡，引起神經(jīng)元興奮性毒性和死亡。AD 患者膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)活性低，膽堿酯酶抑制劑被認(rèn)為通過減少乙酰膽堿的分解而發(fā)揮作用。同時(shí)，促進(jìn)和增強(qiáng)谷氨酸的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)，增加谷氨酸作為神經(jīng)遞質(zhì)的利用效率，改善突觸傳遞和神經(jīng)環(huán)路的功能，也能減輕或延緩AD 的認(rèn)知功能障礙。此類資助項(xiàng)目有“M1 膽堿受體對(duì)AMPA 受體GluA1 亞基的調(diào)控及其在突觸長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)和學(xué)習(xí)記憶中的作用及機(jī)制”（2014）、“乙酰膽堿酯酶新基序AChE7-20非酶活性依賴的海馬神經(jīng)元毒性調(diào)控機(jī)制”（2015）和“M1 受體選擇性激活和Gaq-PKC 信號(hào)偏好的變構(gòu)新位點(diǎn)發(fā)掘及調(diào)控機(jī)制研究（2018）”。有趣的是，隨著抗Aβ 研究的陸續(xù)失敗，傳統(tǒng)的抗膽堿能神經(jīng)損傷研究越來越受到重視，保護(hù)膽堿能神經(jīng)、預(yù)防突觸結(jié)構(gòu)和功能異常對(duì)AD 治療仍具有肯定的研究意義。

神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的平衡會(huì)影響Aβ 生成，tau蛋白的過度磷酸化，以及膽堿能突觸的形態(tài)和功能等。已經(jīng)比較明確的，神經(jīng)細(xì)胞跨膜膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)障礙與AD 發(fā)病密切相關(guān)，且ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1（ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1）跨膜膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)起關(guān)鍵作用，是治療AD的有效靶點(diǎn)［13］。此類資助項(xiàng)目有“curcumin通過HO-1/PPARγ調(diào)控ABCA1跨膜膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)在AD中發(fā)揮腦保護(hù)作用的分子機(jī)制”（2012）。載脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）的等位基因ε4 是與AD發(fā)病最相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)因子。研究表明，增加AD 大腦ApoE 及其受體水平會(huì)促進(jìn)大腦Aβ清除，提高膽固醇運(yùn)輸，保護(hù)突觸和防止炎癥反應(yīng)。還有研究將ApoE鑒定為小膠質(zhì)細(xì)胞受體TREM2的配體，并表明ApoE 可能影響TREM2 介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬作用。因此，ApoE 也被認(rèn)為是抗AD有希望的治療靶點(diǎn)［14］。近年相關(guān)資助項(xiàng)目包括“靶向ApoE的AD藥物篩選及相關(guān)作用機(jī)制研究”（2013）和“基于PPARγ-ApoE 的酸棗仁抗阿爾茨海默癥協(xié)同成分發(fā)現(xiàn)與作用機(jī)制研究”（2015）。

雌激素發(fā)揮AD保護(hù)作用的潛在機(jī)制包括降低Aβ水平、延緩tau 的過度磷酸化和減少神經(jīng)細(xì)胞死亡?？诜萍に乜梢酝ㄟ^其親脂性進(jìn)入血腦屏障是雌激素療法的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)。但雌激素治療的最大問題是其潛在的不良后果，如增加乳腺癌和子宮癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。因此，尋找最大化雌激素治療和減少雌激素風(fēng)險(xiǎn)的策略值得研究。近年相關(guān)的資助項(xiàng)目包括“丙戊酸鈉聯(lián)合雌激素通過影響雌激素受體對(duì)去卵巢癡呆小鼠的作用及機(jī)制研究”（2013）和“基于雌激素/受體靶點(diǎn)效應(yīng)的補(bǔ)腎中藥治療阿爾茨海默病的藥效物質(zhì)和作用機(jī)理研究”（2016）。

2 AD動(dòng)物模型的研究進(jìn)展

近年來，抗AD藥物研發(fā)不斷宣告失敗，據(jù)統(tǒng)計(jì)約99.6%的防治AD 候選藥物在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中取得了好的效果，但在臨床上療效欠佳，其主要原因就是缺乏能反映AD疾病機(jī)制及本質(zhì)的動(dòng)物模型。因此建立理想的AD 動(dòng)物模型對(duì)促進(jìn)AD 治療藥物的研發(fā)至關(guān)重要［15］。根據(jù)AD 發(fā)病特點(diǎn)和機(jī)制，目前國(guó)內(nèi)外已建立的模型主要包括Aβ型、衰老型、腦缺血型、復(fù)合型和轉(zhuǎn)基因型等。Aβ型通過向腦內(nèi)直接注射Aβ 誘發(fā)SP、NFT 和腦細(xì)胞死亡等病理特征，行為學(xué)上也可出現(xiàn)認(rèn)知障礙等，但易出現(xiàn)病理特點(diǎn)集中在給藥部位及病程與臨床不符等缺點(diǎn)。衰老型是根據(jù)年齡老化為AD 的重要危險(xiǎn)因素而建立的，這類模型動(dòng)物會(huì)表現(xiàn)出認(rèn)知障礙等老化征象，但沒有典型的AD病理改變。腦缺血型是根據(jù)老年動(dòng)物慢性腦缺血可以產(chǎn)生類似AD病理生理改變這一特點(diǎn)建立的永久性結(jié)扎左右頸總動(dòng)脈模型，其行為學(xué)和病理改變與AD 相符，但發(fā)病啟動(dòng)因素和AD完全不同。轉(zhuǎn)基因型AD 小鼠模型是研究家族遺傳型AD 的重要模型，但是遺傳型AD 患者只占總AD 患者的5%左右，因此不完全適合于散發(fā)型AD 的研究。復(fù)合型AD 動(dòng)物模型是利用多種方法綜合作用以盡可能模擬AD 的多因素發(fā)病機(jī)制，但目前尚未有一種復(fù)合型模型能基本符合人類AD的特點(diǎn)。

隨著對(duì)基因型AD和散發(fā)型AD的深入研究，研究者已認(rèn)識(shí)到，雖然遺傳型AD 動(dòng)物模型在為認(rèn)識(shí)AD 的發(fā)病機(jī)制上取得了許多喜人的成果，但在篩選評(píng)價(jià)抗AD 藥物即臨床轉(zhuǎn)化過程中卻頻頻受挫。因此，建立散發(fā)型AD動(dòng)物模型對(duì)于促進(jìn)AD治療藥物的研發(fā)更應(yīng)受到重視。NSFC 在AD 動(dòng)物模型研究方面也給予了大量的資助，前期的資助項(xiàng)目主要集中在Aβ動(dòng)物模型，如“阿爾茨海默病樹鼩模型建立的可行性探討”（2011）、“可溶性Aβ42寡聚物誘導(dǎo)的食蟹猴阿爾茨海默病擬臨床模型的構(gòu)建和評(píng)估”（2012）和“條件性BACE1基因敲除鼠指導(dǎo)BACE1抑制劑的合理設(shè)計(jì)及對(duì)老年性癡呆發(fā)病的臨床應(yīng)用”（2016），近期逐漸過渡為綜合考慮AD自身發(fā)病因素和AD 發(fā)病的一些特征或危險(xiǎn)因素（如胰島素耐受、炎癥、毒物、高膽固醇血癥、自然衰老和腦外傷等），以更大程度建立可靠的模型驗(yàn)證評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，如“基于內(nèi)源性甲醛升高誘導(dǎo)的獼猴AD 模型”（2015）、“基于丙烯醛的新型散發(fā)性AD大鼠和食蟹猴模型的建立、鑒定和標(biāo)準(zhǔn)化”（2016）、“阿爾茨海默病（AD）獼猴自發(fā)模型的篩選鑒定”（2017）和“阿爾茨海默病非人靈長(zhǎng)類模型建立和多病理生理特征之間關(guān)系研究”（2018）。其支持建立的模型動(dòng)物種屬也逐步從小型哺乳動(dòng)物如樹鼩、嚙齒類大鼠和小鼠，轉(zhuǎn)變?yōu)榉侨遂`長(zhǎng)類如食蟹猴、獼猴和狨猴等。這些變化充分體現(xiàn)了AD模型研究領(lǐng)域的不斷更替和創(chuàng)新，相信這些支持項(xiàng)目對(duì)AD的機(jī)制研究、藥物新靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)以及非臨床藥效學(xué)評(píng)價(jià)都將有極大的促進(jìn)意義。

3 AD藥物研究存在的挑戰(zhàn)和展望

美國(guó)藥品研究與制造商聯(lián)合協(xié)會(huì)（PhRMA）發(fā)布報(bào)告，截至目前僅有6種抗AD藥物獲美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，分別為他克林（1993 年）、多奈哌齊（1996年）、卡巴拉汀（2000年）、加蘭他敏（2001年）、鹽酸美金剛（2003年）和美金剛/多奈哌齊復(fù)方制劑（2014年），但這些藥物都只是對(duì)癥治療，尚無一種藥物能夠阻止或延緩AD 病情的進(jìn)展。在1998-2017 年，全球已有146 種抗AD 藥物在臨床中遭遇失敗，僅有4種藥物成功上市，臨床成功率僅為2.7%。分析目前抗AD候選藥物研究的挑戰(zhàn)，主要包括AD診斷困難、缺乏有效的非侵入性生物標(biāo)志物、非臨床模型的局限性和開展臨床試驗(yàn)的挑戰(zhàn)等［16］。

雖然AD 防治藥物研究尚存在著巨大的挑戰(zhàn)，但隨著醫(yī)學(xué)和生物學(xué)等基礎(chǔ)學(xué)科的飛速發(fā)展，研究人員也在不斷刷新對(duì)AD 的認(rèn)識(shí)，先前失敗的經(jīng)驗(yàn)也為未來的藥物研發(fā)提供了新線索。可喜的是現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)很多企業(yè)和研究單位都在積極投身于AD藥物的研發(fā)中，如中國(guó)原創(chuàng)抗AD 新藥甘露寡糖二酸（GV-971）已完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)，現(xiàn)已進(jìn)入新藥上市申請(qǐng)階段，有望成為全球首個(gè)糖類多靶抗AD 創(chuàng)新藥物?？笰D新藥琥珀八氫氨吖定片已進(jìn)入對(duì)輕中度AD 的Ⅲ期臨床，AD-35 片和苯磷硫胺片加載鹽酸多奈哌齊片也進(jìn)入了對(duì)輕中度AD的Ⅱ期臨床等，這些研究主要是針對(duì)改善AD 患者記憶障礙的。在基礎(chǔ)研究方面，清華大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)2019 年已先后在Nature 和Science 雜志報(bào)道了針對(duì)γ-分泌酶的新型原子結(jié)構(gòu)在降解APP 中的作用［17-18］。這些預(yù)示，研究人員在不斷調(diào)整藥物研究方向和轉(zhuǎn)變思路，抗AD藥物研發(fā)仍充滿希望。

近年NSFC針對(duì)AD發(fā)病機(jī)制、診斷、治療和藥物研究的資助力度也在逐年增加，這些研究基本反映了我國(guó)目前抗AD 基礎(chǔ)研究的現(xiàn)狀，即能緊跟國(guó)際前沿和熱點(diǎn)問題，但缺乏針對(duì)某一方向的連續(xù)、深入的研究資助，缺乏系統(tǒng)性；其次，在一定程度上缺乏有創(chuàng)新性和獨(dú)特構(gòu)思的工作。在資助策略上，更應(yīng)該鼓勵(lì)學(xué)科交叉，鼓勵(lì)基礎(chǔ)和臨床結(jié)合的轉(zhuǎn)化研究。雖然該領(lǐng)域存在著失敗和挫折，但這些不成功的嘗試卻是至關(guān)重要的墊腳石。不可否認(rèn)的是，抗AD基礎(chǔ)研究為推動(dòng)和加深對(duì)復(fù)雜神經(jīng)系統(tǒng)疾病的認(rèn)識(shí)和其他神經(jīng)精神性疾病的研究提供了新思路。抗AD研究的模式只是人類健康探索之路的一小部分，但它可能成為一個(gè)關(guān)鍵的突破口，可以帶領(lǐng)其他領(lǐng)域多方面的后續(xù)進(jìn)步。