鄭教雀

（寧德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,福建 寧德 352100）

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室作為獸醫(yī)工作的基礎(chǔ)，是動(dòng)物疫病防控機(jī)構(gòu)的根基，承擔(dān)著動(dòng)物疫病診斷、檢測、動(dòng)物免疫狀況監(jiān)測等工作，為動(dòng)物疫病防控部門提供技術(shù)保障，因此加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)非常重要。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對工作在加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中有著重要作用，它不僅能加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制、提高實(shí)驗(yàn)室檢測能力，同時(shí)還能提高專業(yè)技術(shù)人員的業(yè)務(wù)水平，進(jìn)而提高實(shí)驗(yàn)室的綜合能力。

目前，我國獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室采用的比對方案多為：將若干個(gè)已知結(jié)果或數(shù)值（真實(shí)值）的樣品作為盲樣分發(fā)給各實(shí)驗(yàn)室；之后收集各實(shí)驗(yàn)室的比對試驗(yàn)結(jié)果，與真實(shí)值比較；通過結(jié)果符合數(shù)量與比對總數(shù)，計(jì)算出符合率；最后以符合率評價(jià)各參與比對實(shí)驗(yàn)室的檢測能力。此次我中心組織的比對試驗(yàn)所采用的比對方案與以往相比有所不同，本文將此次比對的其中一個(gè)項(xiàng)目做如下分析，以供同行參考。

1 比對范圍及項(xiàng)目

本次實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對試驗(yàn)共8個(gè)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參與；檢測項(xiàng)目為豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體（PRRSX3 Ab）檢測ELISA試驗(yàn)。

2 材料與方法

2.1 儀器與耗材

試驗(yàn)所需要的儀器及設(shè)備由參與比對的實(shí)驗(yàn)室各自準(zhǔn)備，耗材（含緩沖液）由組織方統(tǒng)一準(zhǔn)備。

2.2 試劑

豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒（PRRS X3 Ab）由北京愛德士元亨生物科技有限公司提供。

2.3 樣品

2.3.1 制備。樣品由北京愛德士元亨生物科技有限公司制備、分裝、編號。做到各盲樣的血清量相同、保證可進(jìn)行重復(fù)性檢測，盲樣外觀顏色無明顯差異，并標(biāo)定各樣品的參考值。為保證比對的科學(xué)性，組織方對比對樣品再次統(tǒng)一編號后，作為盲樣發(fā)放使用。

2.3.2 保存與發(fā)放。在比對試驗(yàn)開始前，盲樣由組織方密閉、低溫保存。待各參比實(shí)驗(yàn)室人員、儀器設(shè)備到位后，統(tǒng)一發(fā)放。

2.4 試驗(yàn)方法

比對試驗(yàn)所采用的方法為依據(jù)《豬繁殖與呼吸綜合診斷方法》（GB/T 18090-2008），并參照試劑盒使用說明書進(jìn)行。8份盲樣具體布局，按下表進(jìn)行。

表1 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗(yàn)布局表

依據(jù)上表，要求各參比實(shí)驗(yàn)室，對提供的8份盲樣進(jìn)行3次重復(fù)試驗(yàn)，設(shè)置內(nèi)部質(zhì)控品4份，同時(shí)設(shè)立陰、陽性對照各2份；具體試驗(yàn)方法按照試劑盒使用說明書操作。完成試驗(yàn)后，立即出具、提交正式檢測報(bào)告。

2.5 評判（分）標(biāo)準(zhǔn)

2.5.1 試驗(yàn)結(jié)果

雄安“新”區(qū)，“新”在創(chuàng)新。它著眼于培養(yǎng)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)，發(fā)展前沿科技，打造京津冀協(xié)同化創(chuàng)新發(fā)展平臺。首先，新取得建設(shè)規(guī)劃吸引了一批來自北京的高校、科研機(jī)構(gòu)以及醫(yī)療機(jī)構(gòu)等創(chuàng)新引擎，有利于雄安新區(qū)多元化科技城的打造。其次，雄安新區(qū)致力于發(fā)展包括如3D打印、機(jī)器人、芯片、高端裝備、生物、新材料、新能源、航空、航天、交通、電子等在內(nèi)的新興產(chǎn)業(yè)，打造新的經(jīng)濟(jì)增長極。除此之外，雄安新區(qū)的建設(shè)也體現(xiàn)著可持續(xù)發(fā)展的新思維，其通過加強(qiáng)資源節(jié)約與環(huán)境保護(hù)，來促進(jìn)區(qū)域的持續(xù)發(fā)展。雄安新區(qū)的創(chuàng)新不只局限于科技產(chǎn)業(yè)，它在教育、政府職能、機(jī)制體制方面的創(chuàng)新也在推動(dòng)著京津冀地區(qū)的進(jìn)一步發(fā)展[4]。

2.5.1.1 樣品檢測值。查看盲樣豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測值是否在給定的參考值區(qū)間內(nèi)，落在參考值區(qū)間內(nèi)，判為結(jié)果準(zhǔn)確并得分；檢測值落在參考值區(qū)間外，則判為結(jié)果存在較大偏差，不得分。

2.5.1.2 樣本重復(fù)性。根據(jù)3次重復(fù)試驗(yàn)檢測值，計(jì)算出變異系數(shù)，查看變異系數(shù)的大小。如果變異系數(shù)≤10%，則判定為樣本重復(fù)性好，得分；如果變異系數(shù)＞10%，則判定為樣本重復(fù)性較差，不得分。

2.5.1.3 內(nèi)部質(zhì)控品。查看4個(gè)質(zhì)控樣品檢測值是否滿足限定區(qū)間。如果滿足限定區(qū)間，得分；否則不得分。

2.5.1.4 陰陽性對照。陰陽性對照OD值在確保試驗(yàn)成立后，再驗(yàn)證其是否滿足參考標(biāo)準(zhǔn)要求。如果滿足要求，得分；否則不得分。

2.5.2 檢測報(bào)告。查看各參比實(shí)驗(yàn)室所出具的正式檢測報(bào)告。報(bào)告中每出現(xiàn)1個(gè)錯(cuò)誤，扣除一定分?jǐn)?shù)。比對試驗(yàn)具體分?jǐn)?shù)評定標(biāo)準(zhǔn)，詳見下表。

表2 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗(yàn)評分標(biāo)準(zhǔn)

3 結(jié)果分析

3.1 總體結(jié)果

參與此次比對的8個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室都能在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成檢測并提交正式報(bào)告。根據(jù)比對結(jié)果評判（分）標(biāo)準(zhǔn)，7個(gè)實(shí)驗(yàn)室的所有OD值在區(qū)間范圍內(nèi)，正確率為87.5%；6個(gè)實(shí)驗(yàn)室的所有變異系數(shù)（CV%）都小于10%，比例為75%。這說明大部分獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室具備相應(yīng)的檢測能力，且技術(shù)操作穩(wěn)定、重復(fù)性好、水平較高。

3.2 具體結(jié)果

8個(gè)實(shí)驗(yàn)室共檢測樣品192份·次，獲得192個(gè)OD值，其中189個(gè)OD值處于給定的參考區(qū)間范圍內(nèi)，合格率達(dá)98.4%；樣本重復(fù)性試驗(yàn)，共計(jì)獲得64個(gè)變異系數(shù)（CV%），其中61個(gè)CV%值小于10%，重復(fù)性良好率達(dá)95.3%；陽性對照均合格。此外，3個(gè)實(shí)驗(yàn)室的4個(gè)質(zhì)控樣品檢測值不在限定區(qū)間內(nèi)、3個(gè)實(shí)驗(yàn)室的3個(gè)陰性對照未達(dá)參考標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 檢測報(bào)告

收到檢測報(bào)告8份，每份報(bào)告均存在或大或小的問題。主要問題有：簽、蓋章不夠規(guī)范，報(bào)告內(nèi)容存在對應(yīng)英文翻譯錯(cuò)誤，診斷試劑未寫明具體廠家，未實(shí)行2級簽字等。

具體得分結(jié)果詳見表3。

表3 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗(yàn)得分統(tǒng)計(jì)表

4 討論

血清學(xué)檢測是目前基層獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的基本檢測手段，本次比對的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測項(xiàng)目采用了ELISA檢測方法，能客觀的反應(yīng)基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)水平；且此次比對試驗(yàn)采用統(tǒng)一的試劑、樣品及標(biāo)準(zhǔn)，并現(xiàn)場立即收回檢測結(jié)果，加以統(tǒng)計(jì)分析，更能真實(shí)地反映出各實(shí)驗(yàn)室的檢測能力水平。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，7個(gè)實(shí)驗(yàn)室的合格率為100%，1個(gè)實(shí)驗(yàn)室的合格率為87.5%，說明該市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測人員的實(shí)際操作技能較強(qiáng)，整體檢測能力較高。但通過此次比對試驗(yàn)的評比，也發(fā)現(xiàn)了各實(shí)驗(yàn)室存在的一些問題。

4.1 未嚴(yán)格按照規(guī)程操作。D實(shí)驗(yàn)室在收到樣品后，未及時(shí)對樣品進(jìn)行編號登記，使得在后續(xù)試驗(yàn)過程中將樣品弄混，是導(dǎo)致其出現(xiàn)檢測不合格的主要原因。

4.2 檢測報(bào)告不規(guī)范。各實(shí)驗(yàn)室出具的檢測報(bào)告，存在格式不規(guī)范，內(nèi)容存在瑕疵，表述不準(zhǔn)確、審核程序不夠健全等問題。

4.3 實(shí)驗(yàn)記錄不規(guī)范。個(gè)別實(shí)驗(yàn)室檢測報(bào)告所附的原始實(shí)驗(yàn)記錄信息不完整，存在未使用正規(guī)試驗(yàn)表格，試驗(yàn)記錄涂改、未實(shí)行二級簽字等情況。

5 小結(jié)

檢測能力比對工作具有極其重要的意義，因?yàn)闄z測能力不僅是動(dòng)物防控部門建設(shè)的基礎(chǔ)、更是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生存之基，而且出具的檢測報(bào)告是作為政府相關(guān)部門制定政策、執(zhí)行決策的依據(jù)。各動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)要不斷提高檢測人員的技術(shù)水平，使得實(shí)驗(yàn)室檢測更加科學(xué)、準(zhǔn)確、規(guī)范，為重大動(dòng)物疫病防控和食品衛(wèi)生安全提供有力的技術(shù)支持。