趙楠，巫愛(ài)軍，趙桂華,3

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按照小龍蝦病理學(xué)和病原學(xué)的觀點(diǎn)，引起小龍蝦生病或生長(zhǎng)衰弱的生物被稱為病原生物，主要被分為 6 大類，即真菌（fungi）、細(xì)菌（bacteria）、病毒（viruses）、類立克次體（Rickettsia-like organism，RLOs）、原生生物(protests)和后生動(dòng)物（metazoans）[1]，小龍蝦是它們的共同寄主（host），它們引起小龍蝦病害的癥狀、發(fā)生規(guī)律和傳播途徑各異，應(yīng)根據(jù)小龍蝦生病的實(shí)際情況加以診斷，在一般情況下，難以準(zhǔn)確鑒別。任何一種有害生物的致病性都取決于寄主的生理學(xué)狀態(tài)，真菌菌株的侵染能力與毒性，以及小龍蝦生存的水體環(huán)境。

真菌是眾多生物中的一類，也被分為不同的類群。在每一個(gè)類群中的任何一種真菌與小龍蝦的關(guān)系各異，有寄生、共生、內(nèi)生和腐生4種形式，后3種形式不引起小龍蝦的病害。寄生真菌會(huì)引起小龍蝦的病害；共生真菌與小龍蝦長(zhǎng)期生活在一起，互為有利，小龍蝦可為真菌提供養(yǎng)分，而真菌菌絲從外界吸收養(yǎng)分，有利于小龍蝦的生長(zhǎng)；共生是二者長(zhǎng)期進(jìn)化到高級(jí)階段的結(jié)果，在動(dòng)植物上共生現(xiàn)象普遍存在；內(nèi)生真菌生長(zhǎng)在小龍蝦體內(nèi)，特別是腸道內(nèi)真菌，有利于維持小龍蝦腸道內(nèi)微生物群體的微生態(tài)平衡，促進(jìn)小龍蝦的生長(zhǎng)；腐生真菌把小龍蝦作為它們的宿主，隨著小龍蝦的移動(dòng)和傳播，這類腐生真菌也同樣進(jìn)行移動(dòng)和傳播，對(duì)小龍蝦無(wú)害。

在每一類病原生物中都有一種對(duì)小龍蝦危害嚴(yán)重的代表，如病毒中的白斑綜合征病毒病、卵菌中的瘟疫?。ˋphanomyces astaci）、細(xì)菌中的嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）與副溶血弧菌（Vibrio parahemolyticus）引起的敗血癥、真菌中黑鰓?。‵usarium spp.）和灼斑病,這些病害都是養(yǎng)殖者重點(diǎn)防治的對(duì)象。小龍蝦灼斑病的發(fā)生，其危害程度雖然不像水霉病和黑鰓病那樣嚴(yán)重，但也是一種重要的真菌病害，在歐洲愛(ài)沙尼亞大陸和薩阿雷馬島引起流行病，威脅著當(dāng)?shù)氐臍W洲高貴小龍蝦（A.astacus）；在澳洲也發(fā)生較普遍[2]。

到目前為止，報(bào)道了危害小龍蝦的真菌（鞭毛菌、接合菌、擔(dān)子菌、半知菌）有36屬70余種[3-5]，分別進(jìn)行介紹。

1 壺菌目（Chytridiales）

在傳統(tǒng)的真菌分類中，壺菌隸屬于單鞭毛菌[6]，大部分生于水中，少數(shù)生于土壤，腐生或寄生于藻類和水生小動(dòng)物上[7]，有110屬575種。由壺菌引起的病害叫做壺菌病。薩拉曼巴特拉壺菌（Batrachochytrium salamandrivorans）導(dǎo)致火蠑螈（Salamandra salamandra）的死亡。

蛙壺菌（Batrachochytrium dendrobatidis）能引起全世界的兩棲類動(dòng)物群體衰弱，已證明，在蛙壺菌的傳播中包含了許多非兩棲類寄主[8-9]。小龍蝦、維里利斯鰲蝦（Orconectes virilis）和弗洛里達(dá)鰲蝦（Procambarus alleni）都能攜帶侵染源，傳播到當(dāng)?shù)仳蝌絒9]；McMahon等[9]建議，該真菌可釋放化學(xué)物質(zhì)毒害小龍蝦，出現(xiàn)小龍蝦的死亡，也能降低小龍蝦的生長(zhǎng)率，說(shuō)明在過(guò)濾水中仍含有蛙壺菌的游動(dòng)孢子。Brannelly等[8]記載了壺菌感染養(yǎng)殖和野生小龍蝦有明顯季節(jié)性。在自然界，小龍蝦已收到蛙壺菌嚴(yán)重威脅。

蛙壺菌生長(zhǎng)溫度范圍為4～25℃，最適溫度為17～25℃。在長(zhǎng)江以南地區(qū)養(yǎng)蝦池底部水溫能保持在5℃左右，因此，它們可以在小龍蝦身上過(guò)冬。在25℃以上它們的生長(zhǎng)較差，若高于28℃，生長(zhǎng)就會(huì)停止。受感染的紅眼雨濱蛙（Litoria chloris）只要留在37℃的環(huán)境就可以痊愈，這給小龍蝦養(yǎng)殖者一個(gè)提示，25℃以上不會(huì)發(fā)生壺菌病。

壺菌病是一種兩棲類動(dòng)物的傳染病，是由一種稱為蛙壺菌的非菌絲游離孢子真菌所引起的疾病。壺菌病與北美洲西部、中美洲及澳大利亞?wèn)|部多種兩棲類數(shù)量大幅下降或滅絕有關(guān)，全世界約30%的兩棲類都受到這病的影響。壺菌病能夠造成兩棲類零星的死亡，甚至完全滅絕，目前在野外并無(wú)有效的控制方法。

2 接合菌亞門(mén)（Zygomycotina）

危害小龍蝦的接合菌分別為接合菌綱（Zygomycetes）和毛菌綱（Trichomycetes）種類。

2.1 接合菌綱（Zygomycetes）

由接合菌綱病原真菌引起的小龍蝦病害被稱為接合菌?。╖ygomycosis）；包含被孢霉目（Mortierellales）和毛霉目（Mucorales）的9種真菌，如褐犁頭霉（Absidia fusca）、灰綠犁頭霉（A.glauca），被孢霉（Mortierella sp.），沼澤被孢霉（M.turficola），毛霉（Mucorsp.），凍土毛霉（M.hiemalis），羽裂毛霉（M.plumbleus），根霉（Rhizopus sp.）和匍枝根霉（R.stolonifer）[4-5,10-11]。Garzoli et al.(2014)[10]認(rèn)為，從小龍蝦消化系統(tǒng)中分離到的許多真菌是潛在的小龍蝦病原，有些真菌有助于腸道中植物組織的分解，有利于選擇廣泛的食物。小龍蝦被認(rèn)為是潛在的植物病害傳播媒介，已分離到的一些真菌被認(rèn)為是潛在的病原菌。此外，毛霉（Mucor sp.）和蠅卷霉（Circinella muscae）已從Pacifastacus leniusculus中被分離到[12]。而凍土毛霉（Mucor hiemalis）和總狀毛霉（M.racemosus）已從歐洲高貴小龍蝦（Astacus astacus）上分離到[13]。

2.2 毛菌綱（Trichomycetes）

毛菌綱是昆蟲(chóng)和水生動(dòng)物上的寄生菌或共生菌，菌絲體以固著器附著在宿主消化道內(nèi)或角質(zhì)層上，并不侵入到寄主組織內(nèi)[6]，是小龍蝦腸道內(nèi)的一種微生物[14-16]，一般被認(rèn)為是節(jié)肢動(dòng)物的非病原菌，也有少數(shù)種類例外。Strogman&White（2008）[17]在加拿大命名了毛菌綱的7種新真菌，其中Arundinula opeongoensis是在小龍蝦上發(fā)現(xiàn)的。毛菌是世界性分布的真菌，凡有節(jié)肢動(dòng)物的地方都能找到毛菌，多數(shù)毛霉與宿主是一種共生或共棲關(guān)系。

真菌學(xué)家依據(jù)無(wú)性繁殖器官的類型，將毛菌綱分為4目7科，約40屬。具毛孢子的屬于鉤孢毛菌目，具孢囊孢子的屬于囊孢毛菌目，具節(jié)孢子的屬于節(jié)孢毛菌目，具變形細(xì)胞的屬于變形毛菌目。長(zhǎng)期以來(lái)，毛菌的分類地位在真菌分類學(xué)家之間，一直存在著分歧。

毛菌綱菌體形態(tài)為多核、不分枝或具隔膜而分枝，接合孢子為雙錐形，有些接合孢子具有附屬絲。無(wú)性繁殖產(chǎn)生毛孢子、孢囊孢子、節(jié)孢子和變形細(xì)胞。接合孢子僅在鉤孢毛菌目中被發(fā)現(xiàn)。

3 擔(dān)子菌

擔(dān)子菌有性繁殖產(chǎn)生擔(dān)子和擔(dān)孢子，無(wú)性繁殖產(chǎn)生分生孢子、粉孢子、節(jié)孢子和芽孢子，大多屬于半知菌；分布廣泛，有極少數(shù)種類是小龍蝦的病原菌。一些真菌是根據(jù)有性繁殖是否被發(fā)現(xiàn)確定其分類地位，如酵母類的真菌可能會(huì)存在有性階段的拉丁學(xué)名和無(wú)性階段的拉丁學(xué)名，但是有性階段不易被發(fā)現(xiàn)，而看到最多的是無(wú)性階段。

4 半知菌

4.1 酵母類

Goodrich[18]認(rèn)為，革蘭隱球菌（Cryptococcus gammari）對(duì)小龍蝦雖有致病性，但未見(jiàn)到引起小龍蝦大規(guī)模死亡的報(bào)道。在小龍蝦上僅分離到4種酵母菌，即來(lái)自白爪小龍蝦（Austropotamobius pallipes）的革蘭隱球菌（C.gammari）[18]，小龍蝦上的月牙隱球菌（C.laurentii）和紅酵母菌（Rhodotorula sp.）[11]，以及高貴小龍蝦（Astacus astacus）上的白吉利絲孢酵母（Trichosporon beigelii（=T.cutaneum絲孢酵母）[19]。

白吉利絲孢酵母[Trichosporon beigelii(Küchenm.&Rabenh.)Vuill.1902]分布于全世界，常在土壤、水或其他基質(zhì)上以腐生的方式生活，但在人和動(dòng)物體內(nèi)也常作為一種寄生菌（或病原菌）。Domsch等[20]對(duì)該菌的發(fā)生和分布進(jìn)行了系統(tǒng)調(diào)查，白吉利絲孢酵母發(fā)現(xiàn)于高貴小龍蝦的外殼上，是一種新病原真菌，菌絲侵染小龍蝦外殼后會(huì)出現(xiàn)明顯的黑化反應(yīng)[19]，但也曾從其他蝦（shrimps）、蟾蜍（toads）和兩棲動(dòng)物組織上分離到[20]。

該真菌在小龍蝦的表皮（或角質(zhì)層）內(nèi)生長(zhǎng)時(shí)可引起組織黑變，但面積很小。黑化菌絲直徑約5～8 μm，而未黑化的菌絲直徑為 3～4 μm。該真菌在歐洲高貴小龍蝦角質(zhì)層內(nèi)生長(zhǎng)模式，很類似于小龍蝦瘟疫病菌（Aphanomyces astaci）在小龍蝦體內(nèi)生長(zhǎng)模式，給病原真菌鑒定帶來(lái)困難。

寄主和寄生物之間的關(guān)系是可以轉(zhuǎn)換的。如通過(guò)應(yīng)力培養(yǎng)，攜帶侵染源的小龍蝦會(huì)死亡，因?yàn)閼?yīng)力培養(yǎng)可降低免疫保衛(wèi)反應(yīng)[21]。

在營(yíng)養(yǎng)較豐富的麥芽-酵母浸出物蛋白胨培養(yǎng)基上，或在麥芽酵母浸出物瓊脂培養(yǎng)基上，菌落為酵母狀，波浪狀或有皺紋，灰色-橙色。研究證明，在麥芽-酵母浸出物蛋白胨培養(yǎng)基上，芽生分生孢子（Blastoconidia）比在玉米粉瓊脂培養(yǎng)基（CMA）或麥芽浸出物瓊脂（MA2）產(chǎn)生的更多，除了生長(zhǎng)稍微快，形態(tài)學(xué)和生長(zhǎng)特性穩(wěn)定[22-23]。

在MEA培養(yǎng)基上，20℃下10 d的菌落直徑為2.0 cm，白色-乳白色，光滑或有皺紋，節(jié)孢子圓筒型-橢圓形，大小為（5～20）×（3～4）μm；菌絲斷裂成節(jié)孢子，處產(chǎn)生亞球形的小芽孢子，3.0～4.5 μm；在產(chǎn)孢菌絲上有明顯的孢子痕。大芽孢子球形、卵形或橢圓形無(wú)色，壁厚（9～27）×（8～21）μm，類似于厚垣孢子，偶爾被發(fā)現(xiàn)[23]。

實(shí)驗(yàn)證明，使用100 mg/L氯化鎂（MgCl2）可阻止白吉利絲孢酵母在高貴小龍蝦和小龍蝦之間的傳播，可延長(zhǎng)小龍蝦壽命，處理小龍蝦大約有50%存活率；沒(méi)有評(píng)估白吉利絲孢酵母對(duì)小龍蝦的毒性。白吉利絲孢酵母是在小龍蝦的免疫能力下降時(shí)侵染高貴小龍蝦的，此外，生理應(yīng)力因素以及其他侵染因素也是導(dǎo)致高貴小龍蝦生病的原因之一[19]。

4.2 鐮刀菌及其他半知菌種類

4.2.1 鐮刀菌（Fusarium）

引起小龍蝦病害的鐮刀菌（Fusarium spp.）有5種：由茄鐮刀菌[Fusarium solani(Mart.)Sacc.1881]引起的病害被稱為真菌?。╢ungal disease），真菌甲殼?。╢ungal shell disease）和褐腹?。╞rown abdomen disease）[24]；煙鐮刀菌[F.tabacinum（J.F.H.Beyma）W.Gams 1968]能引起白爪小龍蝦（Austropotamobius pallipes）的黑鰓病；以及由燕麥鐮刀菌[F.avenaceum(Fr.)Sacc.1886][25]、茄鐮刀菌[25]引起的歐洲高貴小龍蝦（A.astacus）和叉肢螯蝦（Orconectes limosus）的灼斑?。╞urn spot disease）。尖孢鐮刀菌（F.oxysporum Schltdl.1824）、層生鐮刀菌[F.proliferatum(Matsush.)Nirenberg 1976]、串珠鐮刀菌[F.verticillioides(Sacc.)Nirenberg 1976]也報(bào)道于小龍蝦上[5]。

4.2.2 其他半知菌

小龍蝦上最常見(jiàn)的病原真菌種類有：腎球葉點(diǎn)霉[Phoma glomerata(Corda)Wollenw.&Hochapfel 1936]、枝狀枝孢菌（Cladosporium cladosporioides Bensch,Crous&U.Braun 2010）、青霉（Penicillium spp.）、曲霉（Aspergillus spp.）、鏈格孢（Alternaria alternata(Fr.)Keissl.1912）、厚垣鏈格孢（A.chlamydospora）、淡紫擬青霉[Paecilomyces lilacinus(Thom)Samson 1974]、束梗霉（Graphium sp.）和內(nèi)生刺孢殼菌（Chaetomella raphigera Swift 1930）[5]。

根據(jù)作者從小龍蝦上分離到的鐮刀菌及其他真菌，有的是我國(guó)小龍蝦真菌的新種類和中國(guó)真菌新記錄種，將會(huì)陸續(xù)報(bào)道。