□ 余曉波 劉 沖 枝江市公共檢驗檢測中心

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

在本次研究中，使用LC—20A高效液相色譜儀（紫外檢測器，LCsolution色譜工作站，日本島津公司）；HY—5回旋式振蕩器（金壇市鴻科儀器廠）；TG16—WS臺式高速離心機(jī)（長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；RE—52CS旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；AL204電子天平（梅特勒—托利多儀器（上海）有限公司）；0.22μm微孔濾膜（天津市津騰實驗設(shè)備有限公司）；Milli—Q direct8超純水機(jī)（密理博公司）。

1.2 材料與試劑

本次研究所使用果蔬的樣品均在本地的農(nóng)貿(mào)市場采購，進(jìn)行粉碎后備用。所使用的農(nóng)藥啶蟲脒、嘧霉胺、氟蟲腈、辛硫磷和噠螨靈標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（濃度為1 000μg/mL，青島捷世康生物科技有限公司）；甲醇、乙腈（色譜純，MREDA公司）；二氯甲烷（色譜純，MERCK公司；氯化鈉（分析純，南京化學(xué)試劑股份有限公司）；NH2小柱（500 mg/6 mL，上海安譜實驗科技股份有限公司）；在本次的實驗過程中所使用的水都是超純水[1]。

1.3 試驗方法

1.3.1 制備標(biāo)準(zhǔn)溶液

100 μg/mL農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備液：取1 000 μg/mL農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL，放在10 mL刻度管中，使用甲醇稀釋到刻度，再對其進(jìn)行搖勻。1 μg/mL的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作液：把0.1 mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液移入10 mL的刻度管中，使用甲醇將其稀釋到刻度，再對其進(jìn)行搖勻。標(biāo)準(zhǔn)工作液：根據(jù)要求使用甲醇—水（1∶1，V∶V）稀釋到合理的濃度。

1.3.2 對樣品進(jìn)行預(yù)處理

稱取10 g已經(jīng)粉碎好的蔬果樣品，放在50 mL的離心管里，再加入20 mL的乙腈，在恒溫?fù)u床上振蕩30 min后，再放入10 g的氯化鈉，蓋上蓋子，使用恒溫?fù)u床振蕩1 min，以4 000r/min的速度離心5 min，取上清液10 mL放入50 mL的梨形瓶里，在40 ℃下旋轉(zhuǎn)蒸干。加入4 mL的二氯甲烷—甲醇（97∶3，V∶V）洗脫液對殘渣進(jìn)行溶解，等候凈化。使用5 mL的洗脫液活化氨基小柱，拋棄洗脫液，當(dāng)液位將要達(dá)到氨基柱吸附層表面時，馬上把樣品溶液轉(zhuǎn)移到氨基小柱里，把流出的液體收集在50 mL的雞心瓶里，然后用洗脫液分兩次清洗梨形瓶，每次3 mL，也轉(zhuǎn)移到氨基柱中，將洗脫液混合進(jìn)雞心瓶中，在30 ℃環(huán)境下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)到接近干燥，再使用洗耳球?qū)⑵浯蹈桑褂? mL甲醇—水（1∶1，V∶V）進(jìn)行定容，旋渦混合均勻，使用0.22 μm的濾膜進(jìn)行過濾，再應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測定[2]。

1.3.3 液相色譜條件

使用Dikma Spursil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流速為1 mL/min；柱溫為35 ℃；進(jìn)樣量為20 μL；流動相A為水，流動相B為甲醇。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法的線性范圍和定量限

本次研究配置質(zhì)量濃度為0.1、0.25、0.5、1.0μg/mL 和 2.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)過測定之后發(fā)現(xiàn)，不同的農(nóng)藥在0.1～2.0 μg/mL的濃度范圍內(nèi)與色譜峰面積具有較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.999 4～0.999 7。按照儀器的靈敏度和加標(biāo)回收試驗，根據(jù)信噪比（S/N）≥10計算方法得出，定量限為0.006～0.02 mg/kg，能夠滿足國家限量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

2.2 方法回收率與精密度

對蔬果樣品進(jìn)行添加回收實驗，加標(biāo)的濃度分別為0.02、0.05、0.1 mg/kg， 不同農(nóng)藥的加標(biāo)回收率在70.4%～112.8%的區(qū)間內(nèi)，而RSD則為2.2%～11.7%。試驗結(jié)果說明，經(jīng)過氨基固相萃取柱的凈化，高效液相色譜紫外變波長檢測蔬菜和水果中多種農(nóng)藥殘留具有較高的準(zhǔn)確性[3]。

3 結(jié)語

本文提出了測定蔬菜和水果中啶蟲脒、嘧霉胺、氟蟲腈、辛硫磷以及噠螨靈等農(nóng)藥殘留的高效液相色譜方法。本研究所使用的樣品經(jīng)過乙腈提取，氨基固相萃取小柱富集和凈化。將樣品中的目標(biāo)化合物與干擾共提物分離的同時，將被分析物濃縮，方法定量限為0.006～0.02 mg/kg。這一方法較為簡潔和高效，符合多種農(nóng)藥殘留檢測的要求，因而具有適用性，值得在蔬果農(nóng)藥殘留檢測中進(jìn)行推廣。