■陳學(xué)豪 翟少偉* 楊 偉

（1.集美大學(xué)鰻鱺現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)教育部工程研究中心，福建廈門361021；2.廈門嘉康飼料有限公司，福建廈門361021）

鰻魚為高蛋白質(zhì)高脂肪的優(yōu)質(zhì)食用魚類，其味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，具有一定的藥用功能，自古以來(lái)都是我國(guó)民間珍貴的滋補(bǔ)食物，被視為“水中人參”[1]。我國(guó)是世界第一養(yǎng)鰻大國(guó)，已形成集鰻苗捕撈與培育、成鰻養(yǎng)殖、飼料生產(chǎn)、烤鰻及鰻魚副產(chǎn)品加工、出口貿(mào)易和配套服務(wù)為一體的完整產(chǎn)業(yè)鏈。隨著水環(huán)境惡化和人工過(guò)度捕撈鰻魚苗種，使得鰻魚苗種資源逐年衰退，價(jià)格不斷提高，鰻魚養(yǎng)殖成本也不斷上升[2-3]。因此，為了控制鰻魚養(yǎng)殖成本，大多通過(guò)降低占鰻魚養(yǎng)殖成本比重大的飼料成本。傳統(tǒng)的鰻魚粉狀飼料具有投喂不方便、殘餌多和成本高等缺點(diǎn)，還容易造成養(yǎng)殖水質(zhì)惡化、浪費(fèi)水源和增加用工等問(wèn)題。浮性顆粒飼料具有節(jié)水、省工、節(jié)約成本和鰻魚生長(zhǎng)均勻度高等優(yōu)點(diǎn)[4-7]，但其在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用較少。本課題組針對(duì)以往鰻魚浮性顆粒料出現(xiàn)的問(wèn)題，結(jié)合目前飼料添加劑和飼料加工工藝的最新成果，開(kāi)發(fā)鰻魚浮性顆粒料，研究其對(duì)美洲鰻鱺（Anguilla rostrata）生長(zhǎng)性能、部分血液生化及腸道健康指標(biāo)的影響，為鰻魚浮性顆粒料的研發(fā)及推廣提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)動(dòng)物為美洲鰻鱺幼苗，隨機(jī)將投放鰻苗的四口土池分為兩個(gè)組，分別飼喂鰻魚幼鰻粉料和幼鰻浮性顆粒料，每個(gè)組兩口池。每口池放養(yǎng)的鰻苗數(shù)量因其面積的不同略有差異，粉料組兩口池分別投放規(guī)格為33尾/kg和32尾/kg的幼鰻785 kg和915 kg；浮性顆粒料組兩口池分別投放規(guī)格為34尾/kg和35尾/kg的幼鰻780 kg和652 kg，試驗(yàn)期為6個(gè)月。

1.2 試驗(yàn)飼料及投喂

鰻魚粉狀飼料由福州大昌盛飼料有限公司生產(chǎn)，鰻魚浮性顆粒料由廈門嘉康飼料有限公司生產(chǎn)。

粉狀飼料與浮性顆粒料的配方及主要營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 粉狀飼料與浮性顆粒料配方及主要營(yíng)養(yǎng)成分(%)

本次試驗(yàn)所用鰻魚先前攝食粉狀飼料，浮性顆粒料組鰻魚正式試驗(yàn)前鰻魚停食1 d，再連續(xù)3 d將膨化飼料在5%～10%原鰻魚粉料的稀釋液中浸泡后投喂，先按正常飼料投喂量的三分之一投喂，之后逐步增加投喂量，一周左右即可正常攝食。浮性顆粒料在試驗(yàn)開(kāi)始后，于投喂前將飼料用凈水浸泡2～3 min軟化后再進(jìn)行投喂，有助于鰻鱺攝食。粉料組投喂前先將飼料稱重，添加5.0%的魚油后，按飼料與水比例為1∶1.2使用攪拌機(jī)攪拌成團(tuán)狀，再用刀將其切成小塊投喂。試驗(yàn)期間根據(jù)鰻魚生長(zhǎng)狀況、水質(zhì)情況、殺蟲、食欲及天氣變化情況酌情增減投喂量，并進(jìn)行記錄。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)土池水深1.2 m左右，每池中設(shè)有兩臺(tái)增氧機(jī)，24 h不間斷供氧，采用半流水的養(yǎng)殖方式。鰻魚入土池前，把池中的淤泥暴曬后用膠漿機(jī)抽出，保留約10 cm的淤泥，然后用200 mg/kg石灰水浸泡消毒。每周檢測(cè)水質(zhì)，使其維持在pH值6.6～7.6，亞硝酸鹽低于0.005 mg/l，溶解氧大于4.0 mg/l，氨氮低于0.40 mg/l。適時(shí)潑灑底質(zhì)改良劑和微生態(tài)制劑可以減少亞硝酸和氨氮含量；盡量調(diào)整水色接近淡綠色。鰻魚養(yǎng)殖土池中，一般根據(jù)水質(zhì)情況每周要排水換水一次，每次10 cm；根據(jù)鰻魚的活力和狀況，每周定期潑灑低刺激性的消毒藥如殺菌紅、二氧化氯和碘制劑等進(jìn)行水體消毒；每周定期殺蟲，以預(yù)防疾病發(fā)生。

1.4 樣品采集與處理

試驗(yàn)期結(jié)束時(shí)，稱取每口池的美洲鰻鱺總重；每口池隨機(jī)挑取體重接近的10尾魚，丁香酚麻醉后用干紗布拭干鰻鱺體表，經(jīng)尾靜脈取血。血液樣本取樣完畢后立即放置在4℃冰箱中，第二天在4℃離心機(jī)下以3 000 r/min速度離心10 min。將所得血清分裝到1.5 ml離心管內(nèi)并保存于-80℃冰箱中，用于血液生化指標(biāo)分析。將抽血后的鰻鱺解剖并取出肝臟和腸道，稱肝臟重，將腸道樣品放入凍存管置于液氮中，帶回實(shí)驗(yàn)室后置于-80℃冰箱中長(zhǎng)期保存。按照翟少偉等[8]的方法對(duì)腸道樣品進(jìn)行處理，用于測(cè)定腸道抗氧化指標(biāo)。另每口池隨機(jī)取3尾體重接近的美洲鰻鱺置于-20℃冰箱中保存以測(cè)定全魚體成分。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能

1.5.2 血液生化指標(biāo)

血液中的堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，AKP）、酸性磷酸酶（Acid phosphatase，ACP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Glutamic-pyruvic transaminase，GPT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（Glutamic-oxalacetic transaminease，GOT）采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒，按照說(shuō)明書的步驟進(jìn)行測(cè)定。

1.5.3 腸道健康有關(guān)指標(biāo)

腸道蛋白酶的測(cè)定采用福林-酚法進(jìn)行測(cè)定；淀粉酶和脂肪酶的測(cè)定方法分別為碘-淀粉比色法和化學(xué)比濁法，采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定，測(cè)定過(guò)程參照說(shuō)明書進(jìn)行操作。

腸道超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathion peroxidase，GSH-Px）、AKP活性和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量等均使用南京建成生物工程研究所的試劑盒，按照相關(guān)說(shuō)明書進(jìn)行測(cè)定。

1.5.4 體成分

美洲鰻鱺全魚水分采用(105±2)℃常壓烘箱干燥恒重法測(cè)定；粗蛋白質(zhì)的測(cè)定采用凱氏定氮法（總氮×6.25），用FOSS公司生產(chǎn)的Kjeltec8400型全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行測(cè)定；粗脂肪的測(cè)定采用索氏抽提法測(cè)定；粗灰分采用馬福爐(550±20)℃灼燒法測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)先用Excel進(jìn)行整理，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）”表示。其中增重率、肝體比和成活率等指標(biāo)經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)化后，再用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件的獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)?zāi)K進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 生長(zhǎng)性能（見(jiàn)表2）

由表2可以看出，粉料組和浮性顆粒料組的試驗(yàn)期末體重、投料量、增重率、飼料系數(shù)、肝體比以及成活率等指標(biāo)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。粉料組的肝體比有高于浮性顆粒料組的趨勢(shì)（0.05＜P＜0.10）。

表2 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺生長(zhǎng)性能的影響

2.2 血液生化指標(biāo)（見(jiàn)表3）

表3 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺部分血液生化指標(biāo)的影響

由表3可以看出，與粉料組相比，浮性顆粒料組美洲鰻鱺的AKP水平和GPT水平顯著升高（P＜0.05），GOT水平和GOT/GPT顯著降低（P＜0.05），ACP水平差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 肝臟顏色（見(jiàn)圖1）

圖1 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺肝臟顏色的影響

由圖1可見(jiàn)，粉料組的鰻魚肝臟顏色較淺，有些發(fā)白，體積較大，浮性顆粒料組的鰻魚肝臟紅色較深，體積也較小。

2.4 腸道健康有關(guān)指標(biāo)（見(jiàn)表4）

由表4可以看出，與粉料組相比，浮性顆粒料組的脂肪酶活性顯著降低（P＜0.05），淀粉酶和蛋白酶活性無(wú)顯著差異（P＞0.05）；CAT和GSH-Px活性顯著升高（P＜0.05），SOD活性顯著降低（P＜0.05），MDA水平顯著降低（P＜0.05）；腸道AKP水平無(wú)顯著變化（P＞0.05）。

2.5 體成分（見(jiàn)表5）

由表5可以看出，粉料組和浮性顆粒料組的全魚水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和灰分含量接近，無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)中，粉料組和浮性顆粒料組的生長(zhǎng)性能接近，這可能是兩種不同形態(tài)飼料的主要營(yíng)養(yǎng)成分接近所致。說(shuō)明美洲鰻鱺經(jīng)過(guò)馴化后完全可以正常采食浮性顆粒料，且不會(huì)對(duì)生長(zhǎng)性能造成負(fù)面影響。由于在馴化采食浮性顆粒料需要一定時(shí)間，這在某種程度上影響了鰻鱺生長(zhǎng)，使其在試驗(yàn)初始的體重略低于粉料組，但試驗(yàn)期末的體重仍與粉料組接近。目前，還鮮見(jiàn)粉狀飼料和浮性顆粒料在鰻鱺養(yǎng)殖中的對(duì)比效果研究。在鰻鱺養(yǎng)殖過(guò)程中使用浮性顆粒料，在水體中的散失率低，對(duì)水體污染小，特別在缺水或循環(huán)水的養(yǎng)鰻場(chǎng)效果更明顯；不需要攪拌就直接投喂，節(jié)約攪拌的機(jī)器費(fèi)用及電費(fèi)，減少用工人數(shù)；無(wú)需價(jià)高且營(yíng)養(yǎng)作用差的α-淀粉作為黏合劑，飼料成本較低，浮性顆粒料為膨化工藝制作，易消化吸收，飼料效率高；浮性顆粒料投喂時(shí)的散開(kāi)面積大，鰻魚無(wú)需擠壓易攝食，減少應(yīng)激反應(yīng)，強(qiáng)弱鰻魚攝食均勻[4-7]，這一點(diǎn)在表1中各生長(zhǎng)指標(biāo)的變異程度中也可以看出。本試驗(yàn)結(jié)果與林仕梅等[9]報(bào)道湘云鯽對(duì)膨化飼料的利用并沒(méi)有顯示出優(yōu)勢(shì)性結(jié)論類似。但賈艷菊等[10]發(fā)現(xiàn)，在中華鱉稚鱉中使用膨化飼料的適口性和誘食性較差，中華鱉的攝食量和生長(zhǎng)率較低，而在蛋白質(zhì)效率和飼料轉(zhuǎn)化效率方面優(yōu)于粉狀飼料。魏旭光[11]研究也表明，與非膨化飼料相比，大菱鲆飼喂膨化飼料后生長(zhǎng)性能下降；抗氧化能力下降；膨化組的消化酶活性都升高，非膨化飼料對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)代謝更具有促進(jìn)作用。這可能是試驗(yàn)動(dòng)物的品種、飼料組成、養(yǎng)殖條件等方面的差異導(dǎo)致的。

表4 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺部分腸道健康指標(biāo)的影響

表5 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺體成分的影響(%)

3.2 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺血液生化指標(biāo)及肝臟顏色的影響

AKP和ACP是機(jī)體生長(zhǎng)代謝、保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和維持機(jī)體健康所必需的酶，反映體內(nèi)非特異性免疫能力的變化[12-13]。本試驗(yàn)中浮性顆粒料組AKP水平顯著升高，表明使用該形態(tài)的飼料可增強(qiáng)美洲鰻鱺的部分非特異性免疫能力。當(dāng)魚類動(dòng)物肝細(xì)胞受損后，轉(zhuǎn)氨酶會(huì)釋放到血液里，血清中轉(zhuǎn)氨酶活性會(huì)隨之升高。GPT和GOT兩種轉(zhuǎn)氨酶活性升高意味著肝臟損傷，GOT水平升高的危害更大，也常用GOT/GPT比例升高表示肝臟受損傷的程度加劇[14-15]。本試驗(yàn)中雖然浮性顆粒料組的美洲鰻鱺血液中GPT水平升高，但GOT水平和GOT/GPT比值降低，說(shuō)明該組美洲鰻鱺的肝臟功能得到了改善。這可能是由于浮性顆粒料中添加了保肝利膽的中草藥添加劑所致。這與添加中草藥在鯽[16-17]、鯉[18]、史氏鱘[19-20]飼料中改善肝臟功能的結(jié)果類似。也與中草藥添加劑提高草魚[21-22]、羅非魚[23]、鯉[24]、黃鱔[25]等的非特異性免疫能力的結(jié)果接近。此外，肝臟顏色和肝體比的變化，說(shuō)明了肝臟中脂肪沉積較少，且炎癥程度較低，進(jìn)一步說(shuō)明了浮性顆粒料組的肝臟功能得到改善。由于中草藥的活性成分復(fù)雜，具體的作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

3.3 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺腸道健康指標(biāo)的影響

研究表明，魚類腸道的消化酶活性能夠反映機(jī)體腸道的消化生理狀態(tài)[26]；魚類消化酶的活性與其餌料中營(yíng)養(yǎng)成分的種類和含量有密切的關(guān)系[27]。粉料組和浮性顆粒料組的腸道消化酶活性僅脂肪酶活性降低，其他消化酶活性無(wú)顯著差異。這可能是兩組飼料脂肪水平的差異所致，具體原因還有待查明。

SOD、CAT和GSH-Px是機(jī)體內(nèi)清除自由基的主要抗氧化酶，維持機(jī)體自由基的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。MDA是自由基與脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)的主要產(chǎn)物，其含量多少可以間接反映機(jī)體的脂質(zhì)過(guò)氧化程度和自由基產(chǎn)生情況[28]。正常生理情況下，動(dòng)物體內(nèi)自由基處于一種產(chǎn)生和清除的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。本試驗(yàn)中浮性顆粒料組MDA水平及其他抗氧化酶的變化表明，機(jī)體抗氧化能力增強(qiáng)。這可能也是由于浮性顆粒飼料中添加了保肝利膽的中草藥添加劑所致。黃江等[29]在施氏鱘和石宏武等[30]在金魚的飼料中添加中草藥后，也有類似的報(bào)道。中草藥添加劑添加改善腸道抗氧化能力是其直接清除自由基，提高抗氧化酶活性，還是改善腸道菌群而減少自由基產(chǎn)生起主要作用[31]，仍需要進(jìn)一步研究。

3.4 不同形態(tài)飼料對(duì)美洲鰻鱺全魚體成分的影響

本試驗(yàn)中，粉料組和浮性顆粒料組全魚的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和灰分含量接近，說(shuō)明不同形態(tài)的飼料對(duì)美洲鰻鱺的體成分無(wú)顯著影響。這可能是兩種飼料的主要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)接近所致。這與賈艷菊等[10]在中華鱉稚鱉中使用膨化飼料對(duì)體成分無(wú)顯著影響的結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，與傳統(tǒng)粉料相比，使用浮性顆粒料未影響美洲鰻鱺幼魚的生長(zhǎng)性能和體成分，但能改善肝臟和腸道的健康狀態(tài)。