■歐陽佳良 朱鵬飛 王夢芝* 倪俊芬 陳前嶺
(1.揚州大學動物科學與技術(shù)學院,江蘇 揚州 225009;2.江蘇省泗陽縣畜牧獸醫(yī)站,江蘇 泗陽 223700)
飼糧中添加脂肪酸或者脂類可以影響反芻動物瘤胃微生物的區(qū)系及其發(fā)酵過程[1],從而影響宿主的飼料利用性能和生產(chǎn)性能。近幾年,圍繞著飼料添加劑對反芻動物影響進行了大量的研究。楊魁等[2]綜述了過瘤胃氨基酸、過瘤胃脂肪、過瘤胃膽堿、維生素及飼料酶制劑對反芻動物增重性能的影響。Gorka等[3]發(fā)現(xiàn),在犢牛飼糧中添加丁酸鈉能夠促進瘤胃乳頭的生長從而提高其生產(chǎn)性能。王中華等[4]研究表明綿羊體內(nèi)代謝對葡萄糖的需要量受瘤胃灌注混合揮發(fā)性脂肪酸比例(丙、乙、丁酸)的影響。Wilson等[5]在薩??搜蝻暭Z中添加2.5%的丁酸鹽發(fā)現(xiàn)其瘤胃短鏈脂肪酸濃度顯著提高。本實驗室前期進行了6種長鏈脂肪酸體外培養(yǎng)瘤胃微生物的探索研究,結(jié)果表明,亞麻油酸對瘤胃微生物的調(diào)控效果較好[6],并通過正交試驗篩選出對瘤胃微生物發(fā)酵模式適宜的脂肪酸組合,制成丙酸制劑、丁酸制劑等脂肪酸制劑。但這些制劑在動物生產(chǎn)中對反芻動物的生長、消化和瘤胃發(fā)酵性能等的影響還不得而知。為此,本試驗擬在湖羊日糧中添加脂肪酸制劑,研究其對生長性能、養(yǎng)分表觀消化率和瘤胃發(fā)酵參數(shù)等的影響,以期為脂肪酸制劑添加劑在反芻動物生產(chǎn)實踐中利用提供一些試驗依據(jù)。
2015年4月在江蘇某湖羊養(yǎng)殖場選取24只7周齡健康狀況良好、體重相近[(6.9±0.5)kg]的公湖羊,采用單因素試驗設(shè)計將試驗羊隨機分為3組,每組8只,分別為對照組、丙酸組、丁酸組。試驗包括預飼7 d,正試期28 d。試驗羊采取群飼舍養(yǎng)方式,整個試驗期試驗羊每天每只人工飼喂鮮羊奶1.0 L,在此基礎(chǔ)上補飼基礎(chǔ)日糧(第1周每天每只補飼300 g基礎(chǔ)日糧,隨后試驗期每周增加50 g),補飼基礎(chǔ)日糧組分和營養(yǎng)成分含量見表1,并制成顆粒飼料,再以顆粒飼料的1%添加脂肪酸制劑,對照組為等量脂肪酸鈣。試驗期每日06:00和18:00等量飼喂兩次,自由飲水。
表1 試驗基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))(%)
正試期第2、第4周采用全糞收集方式采集糞樣,每組用蛇皮袋固定于隨機選取的4只試驗羊尾后,每日更換兩次并稱重,將飼料樣與糞樣帶回實驗室進行常規(guī)分析計算養(yǎng)分表觀消化率。正試期第2、第4周每組隨機選取4只試驗羊,晨飼后3 h利用負壓原理經(jīng)口腔采集瘤胃液各30 ml,四層紗布過濾后,采用上海雷磁pHS-3C型精密pH計立即測定pH值,之后將濾液分裝在3個10 ml滅菌離心管中,置于-20℃下保存待測NH3-N濃度和MCP含量。
1.3.1 飼料常規(guī)成分測定
飼料和糞便中常規(guī)成分分析依據(jù)《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[7]。采用范氏[8]洗滌纖維分析法測定ADF和NDF。
1.3.2 生長性能和養(yǎng)分表觀消化率測定
生長性能:正試期每日準確記錄各組DMI,并于第1 d與第2、第4周周末晨飼前對所有試驗羊進行稱重,計算ADG與料肉比(FGR)。
養(yǎng)分表觀消化率:測定飼料樣及糞樣中干物質(zhì)含量、粗蛋白含量、中性洗滌纖維含量、酸性洗滌纖維含量,計算養(yǎng)分表觀消化率,其公式為:
養(yǎng)分表觀消化率(%)=(食入量-排泄量)×100/食入量
1.3.3 瘤胃液pH值、NH3-N濃度與MCP含量測定
采用上海雷磁試驗設(shè)備廠pHS-3C型pH計,測定前用pH=4.01和pH=6.88的標準緩沖液校正。參照馮宗慈等[9]的方法進行測定NH3-N濃度,利用標準NH4Cl溶液繪制標準曲線以確定樣品中的NH3-N濃度;參照胡偉蓮[10]的方法,利用嘌呤法測定MCP含量。
試驗首先采用Excel 2013軟件進行初步整理,然后采用SPSS16.0單因素方差分析模塊進行單因素方差分析,鄧肯氏法進行多重比較。差異顯著水平判斷標準為P<0.05。
由表2可知,第2周與第4周各組干物質(zhì)采食量、平均日增重以及料肉比都沒有顯著差異(P>0.05),但在數(shù)值上,第2周與第4周丙酸組干物質(zhì)采食量和料肉比都高于對照組與丁酸組;第2周丁酸組平均日增重最高,而第4周丙酸組的平均日增重高于其他兩組。
表2 不同脂肪酸制劑對2~3月齡湖羊生長性能的影響
如表3所示,第2周和第4周的粗蛋白(CP)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、干物質(zhì)(DM)消化率各組之間均不存在顯著差異(P>0.05)。數(shù)值上,丙酸組與丁酸組的CP消化率高于對照組;丁酸組NDF消化率在第2周高于對照組,而第4周3組之間數(shù)值差距不大;ADF消化率在第2周和第4周時皆以丁酸組數(shù)值最高;丙酸組和對照組第4周的CP、DM及ADF消化率均大于第2周,而丁酸組第4周CP、NDF、DM消化率均小于第2周。
表3 不同脂肪酸制劑對2~3月齡湖羊養(yǎng)分表觀消化率的影響(%)
表4 不同脂肪酸制劑對試驗羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響
由表4可知,瘤胃液pH值均高于5.5,屬于正常范圍內(nèi),且第2周和第4周各組瘤胃液pH值之間差異均不顯著(P>0.05)。瘤胃液氨氮(NH3-N)濃度在第2周和第4周皆以丙酸組最低,且在第2周對照組和丁酸組NH3-N濃度顯著高于丙酸組(P<0.05)。第2周和第4周瘤胃液中微生物蛋白(MCP)含量數(shù)值上是丁酸組>對照組>丙酸組,第2周瘤胃液MCP含量差異不顯著(P>0.05),而第4周丁酸組顯著高于丙酸組(P<0.05)。
干物質(zhì)采食量、平均日增重、料肉比以及養(yǎng)分表觀消化率都是影響動物生長、消化性能和瘤胃發(fā)酵的重要指標。反芻動物對飼料的采食量、消化率受瘤胃伸張度和瘤胃發(fā)酵程度,食糜在瘤胃中停留時間等諸多因素的影響[11]。汪仕奎等[12]用丙酸飼喂生長育肥豬發(fā)現(xiàn)添加低劑量的丙酸不影響生長育肥豬的生長性能。Deetz等[13]采用不同劑量的支鏈脂肪酸和n-戊酸的氨鹽(AS-VFA)飼喂閹牛,結(jié)果表明不同劑量的AS-VFA對生長期公牛的日增重與飼料轉(zhuǎn)化率無顯著性提高。張心壯等[14]研究表明,日糧中添加丙酸鈣對肉牛干物質(zhì)采食量、飼料轉(zhuǎn)化率和日增重沒有顯著差異,沒有顯著提高肉牛的生長性能。本試驗中,第2周和第4周各組之間采食量、日增重及料肉比都沒有顯著差異,說明丙酸和丁酸制劑對2~3月齡湖羊生長性能沒有顯著提高,與上述報道相似。隨著試驗期的延長,3個組的日增重都有下降的趨勢,符合陳玲等[15]關(guān)于湖羊生長發(fā)育曲線的研究結(jié)果,即湖羊在1月齡時日增重最高,而后逐漸降低,但出生后的前3月依然是生長快速期。本試驗中,3個組的CP、ADF、NDF、DM消化率都沒有顯著的差異,與郭剛等[16]在西門塔爾牛日糧中添加100 g/d丙酸鈣對養(yǎng)分表觀消化率的影響結(jié)果相似,其原因可能是因為日糧中脂肪酸制劑含量未達到對動物養(yǎng)分表觀消化率產(chǎn)生顯著影響的水平。
瘤胃微生物粗蛋白質(zhì)MCP是反芻動物最主要的氮源供應來源,不僅可以反映微生物綜合利用氮素的能力,還能反映出瘤胃中微生物的量。氨氮是瘤胃微生物生長所需要的主要氮源,很多瘤胃細菌能夠以氨為主要氮源和一些簡單的肽類和游離氨基酸合成微生物蛋白質(zhì)[17]。有研究表明,飼糧中添加脂肪酸或脂類可以影響反芻動物瘤胃微生物的區(qū)系及其發(fā)酵過程[1]。本試驗中,第2周丁酸組NH3-N濃度顯著高于對照組,且第4周丁酸組的MCP含量顯著高于丙酸組,與王聰?shù)萚18]研究結(jié)果相似,分析其原因可能是因為丁酸制劑能夠刺激羔羊瘤胃上皮的發(fā)育從而提高其對瘤胃微生物代謝物的吸收功能[19],并反過來促進瘤胃微生物的生長及瘤胃發(fā)酵。瘤胃pH值是瘤胃發(fā)酵的重要指標,一般情況下瘤胃pH值為5.5~7.0。本試驗中,第2周和第4周各組的瘤胃液pH值都屬于瘤胃發(fā)酵正常范圍內(nèi)且組間無顯著差異,說明脂肪酸制劑的添加沒有對試驗湖羊的健康產(chǎn)生不良影響。但第4周的瘤胃液pH值均低于6.0,可能是由于第4周斷奶引起的瘤胃內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化[20]。
綜上所述,丙酸制劑和丁酸制劑對2~3月齡湖羊生長性能和養(yǎng)分表觀消化率都沒有顯著影響,而丁酸制劑能夠提高瘤胃發(fā)酵的氨氮濃度和微生物蛋白含量,表明丁酸制劑能在一定程度上促進瘤胃發(fā)酵和瘤胃微生物的生長。