王淑玉，李矢云，陳 贏

支氣管哮喘是兒童最常見的氣道慢性炎癥性疾病，近年來發(fā)病率急劇增加。吸入糖皮質(zhì)激素能有效控制氣道炎癥已得到公認(rèn)，但仍有5%～10%的支氣管哮喘患者不能完全控制癥狀，甚至發(fā)展為難治性哮喘和持久性通氣功能障礙，其原因是患者發(fā)生了氣道重塑。氣道重塑是影響支氣管哮喘療效的重要因素。越來越多的證據(jù)表明，氣道重塑并非只發(fā)生在重度哮喘或哮喘病程晚期，在兒童及輕度哮喘的早期就存在氣道重塑[1-2]。因此，如何早期控制氣道炎癥，早期發(fā)現(xiàn)并減輕氣道重塑是現(xiàn)在和未來研究的重點(diǎn)。目前，臨床對兒童支氣管哮喘控制情況的評價(jià)及治療方案調(diào)整主要依賴于患兒的臨床表現(xiàn)及肺功能測定，但都不能直接反應(yīng)氣道炎癥和重塑的程度。近年來臨床研究發(fā)現(xiàn)，Periostin在支氣管哮喘發(fā)病過程中扮演重要角色[3-4]。但關(guān)于Periostin在兒童支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中作用的研究報(bào)道少見，且Periostin與兒童支氣管哮喘臨床控制程度的相關(guān)性尚不清楚。故本研究通過對不同控制程度支氣管哮喘患兒血清Periostin水平進(jìn)行對照研究，探討血清Periostin水平對評估病情及臨床轉(zhuǎn)歸的意義，為將來開展以Periostin為新靶點(diǎn)的生物治療提供理論基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年5月—2017年1月我院收治的92例支氣管哮喘患兒作為研究對象，其中男50例，女42例；年齡6～13(7.85±3.26)歲；病程1～3(1.61±0.94)年。①納入標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)格按照2016年中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組制定的《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；均無嚴(yán)重哮喘發(fā)作；無其他處于急性期的過敏性疾病。②排除標(biāo)準(zhǔn)：患心臟、骨骼、肌肉、皮膚、甲狀腺等疾病者。根據(jù)病情嚴(yán)重程度將患兒分為間歇發(fā)作組34例、輕度持續(xù)組23例、中度持續(xù)組21例和重度持續(xù)組14例。同時(shí)選取50例健康兒童作為對照組，其中男22例，女28例；年齡6～13(6.81±3.23)歲。支氣管哮喘患兒與對照組的性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。具有可比性。

1.2治療方法 所有支氣管哮喘患兒均給予規(guī)范化分級治療，給予吸入用布地奈德混懸液(AstraZeneca Pty Ltd，批號：X20010423)1 mg吸入，2/d；孟魯司特鈉咀嚼片(杭州默沙東制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字：H20064828)5 mg口服，1/晚。所有患兒均治療至少1個(gè)月。

1.3檢測方法 ①所有研究對象均于清晨空腹抽取靜脈血2～3 ml，室溫下靜置20 min，以3500 r/min離心10 min，移液管吸出血清至EP管，并進(jìn)行標(biāo)記，置-80℃冰箱保存，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測，試劑盒由聯(lián)科生物技術(shù)有限公司提供，具體步驟參考試劑盒說明書。②所有患兒均通過兒童哮喘控制測試(chilhood asthma control test, C-ACT)進(jìn)行評分[6]，問卷共7個(gè)條目，總分為27分；C-ACT評分<19分為未控制組18例，19～22分為部分控制組31例，≥23分為良好控制組43例。

2 結(jié)果

2.1不同病情程度支氣管哮喘患兒和對照組的血清Periostin水平 對照組、間歇發(fā)作組、輕度持續(xù)組、中度持續(xù)組和重度持續(xù)組的血清Periostin水平分別為(118.25±72.18)ng/ml、(125.51±4.33)ng/ml、(148.23±41.62)ng/ml、(196.62±46.74)ng/ml和(230.11±50.27)ng/ml。對照組與間歇發(fā)作組血清Periostin水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。輕度持續(xù)組、中度持續(xù)組和重度持續(xù)組血清Periostin水平均高于對照組和間歇發(fā)作組，且中度持續(xù)組和重度持續(xù)組高于輕度持續(xù)組，重度持續(xù)組高于中度持續(xù)組(P<0.05)。從對照組到重度持續(xù)組血清Periostin水平呈逐漸升高的趨勢。

2.2不同控制程度支氣管哮喘患兒的血清Periostin水平 未控制組、部分控制組和良好控制組的血清Periostin水平分別為(208.05±74.24)ng/ml、(105.36±48.07)ng/ml和(72.81±57.24)ng/ml。未控制組和部分控制組血清Periostin水平高于良好控制組，且未控制組高于部分控制組(P<0.01)。從未控制組到良好控制組血清Periostin水平呈逐漸降低的趨勢。

2.3相關(guān)因素分析 重度持續(xù)組和非重度持續(xù)組、C-ACT<19分組和C-ACT≥19分組的血清Periostin水平比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而年齡、性別和病程比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1和2。

表1 影響支氣管哮喘患兒重度持續(xù)發(fā)作的相關(guān)因素分析

表2 影響支氣管哮喘患兒C-ACT<19分的相關(guān)因素分析

3 討論

氣道炎癥和氣道重塑是支氣管哮喘的兩個(gè)主要病理學(xué)特征。自1922年氣道重塑這一概念被提出，許多學(xué)者致力研究其產(chǎn)生的病理生理機(jī)制，多種細(xì)胞因子如白介素-13(IL-13)、血管內(nèi)皮生長因子、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)等都參與了氣道重塑的病理生理過程。近年來，許多病理學(xué)和形態(tài)學(xué)的研究進(jìn)一步證實(shí)支氣管哮喘氣道結(jié)構(gòu)的變化，不僅重度哮喘，輕度哮喘也存在不同程度的氣道重塑。有研究表明，氣道重塑可能發(fā)生在患兒早期，是判斷預(yù)后的重要指標(biāo)[7]，具體表現(xiàn)為上皮細(xì)胞損傷和修復(fù)，杯狀細(xì)胞增生，上皮下纖維化，氣道平滑肌增殖、肥大，氣道平滑肌細(xì)胞遷移，以及炎性細(xì)胞浸潤和支氣管新生血管形成。網(wǎng)狀基底膜增厚也是哮喘氣道重塑的特征之一。Periostin是IL-4、IL-13的高誘導(dǎo)產(chǎn)物，是參與Th2型免疫應(yīng)答的重要的細(xì)胞因子。Periostin為細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的一種，由POSTN基因編碼，該基因位于人類的13號染色體，以及小鼠的3號染色體，含811個(gè)氨基酸殘基，屬于黏附分子家族。氣道上皮細(xì)胞是產(chǎn)生Periostin的主要來源之一。相關(guān)研究表明，支氣管哮喘患者氣道上皮細(xì)胞分泌Periostin，并經(jīng)IL-4和IL-13誘導(dǎo)后表達(dá)上調(diào)[8-10]。通過基質(zhì)金屬蛋白酶-2和基質(zhì)金屬蛋白酶-9機(jī)制激活TGF-β1通路。同時(shí)，Periostin具有自分泌效應(yīng)，激活TGF-β1和上調(diào)Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)。TGF-β1能夠激活多條細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，如Smad蛋白介導(dǎo)的信號途徑、磷脂酰肌醇3激酶途徑，絲裂原激活蛋白激酶途徑等，與平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)，從而引起或加重氣道重塑[11]。另外，TGF-β1還可誘導(dǎo)Periostin的高表達(dá)，并延長Th2細(xì)胞存活期而使IL-13生成增加，從而引起血清IL-13水平上升，參與氣道炎性反應(yīng)[12]。Periostin、IL-13和TGF-β1構(gòu)成過敏性炎癥中的惡性循環(huán)?？梢哉J(rèn)為Periostin在這個(gè)過程中起到舉足輕重的作用。

本研究結(jié)果顯示，輕度持續(xù)組、中度持續(xù)組和重度持續(xù)組血清Periostin水平均高于對照組和間歇發(fā)作組，且中度持續(xù)組和重度持續(xù)組高于輕度持續(xù)組，重度持續(xù)組高于中度持續(xù)組，從對照組到重度持續(xù)組血清Periostin水平呈逐漸升高的趨勢。未控制組和部分控制組血清Periostin水平高于良好控制組，且未控制組高于部分控制組，從未控制組到良好控制組血清Periostin水平呈逐漸降低的趨勢。而且血清Periostin水平為影響支氣管哮喘患兒重度持續(xù)發(fā)作、C-ACT<19分的影響因素。

以上研究結(jié)果說明，血清Periostin可作為支氣管哮喘氣道炎癥的重要檢測指標(biāo)，對評估支氣管哮喘患兒病情以及臨床轉(zhuǎn)歸均具有重要的意義。血清Periostin水平越高，說明支氣管哮喘患兒氣道炎癥越重。Jia等[13]研究發(fā)現(xiàn)，在不表達(dá)Periostin小鼠的支氣管肺泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量較表達(dá)Periostin小鼠明顯減少，提示Periostin可能促進(jìn)氣道中嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤。Song等[14]研究6～15歲支氣管哮喘兒童氣道對甘露糖醇和醋甲膽堿的氣道反應(yīng)性發(fā)現(xiàn)，支氣管哮喘兒童血清Periostin水平與氣道高反應(yīng)性相關(guān)。本研究與上述結(jié)論基本一致。

綜上所述，支氣管哮喘的病情嚴(yán)重程度以及病情控制情況與血清Periostin水平具有密切的聯(lián)系，支氣管哮喘患兒血清Periostin水平對評估病情及預(yù)后具有一定的意義。但本組研究所選樣本含量小及研究時(shí)間短，尚存在不足之處，可加大樣本含量和延長研究時(shí)間進(jìn)一步深入研究。