樊璐

(江西省血液中心，江西 南昌 330052)

無償獻血者血液標本采集后，血液檢測的淘汰原因有 ALT升高或 HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、抗－TP及核酸檢測陽性。本文通過統(tǒng)計分析南昌地區(qū)2015年－2017年無償獻血人數(shù)、血液檢測淘汰情況的變化趨勢以及變化原因，了解當前本地區(qū)獻血人群輸血傳播性疾病的流行情況，以便采取有效措施減少血液報廢，預防經(jīng)輸血傳播疾病的發(fā)生，為無償獻血招募和篩查策略提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 調(diào)查對象 2015年1月1日－2017年12月31日江西省血液中心采集的自愿無償獻血者全血標本共179714例，其中男性112790例，女性66924例，獻血者均符合 《獻血者健康檢查要求》(GB18467－2011)， 體檢、Hb和 HBsAg快速篩查合格，年齡 18～55 周歲，獻血量 200～400ml。

1．2 試劑 EIA 試劑盒：HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、抗－TP為廈門新創(chuàng)、北京萬泰公司產(chǎn)品；NAT試劑盒：HBV/HCV/HIV(1+2型)核酸聯(lián)合檢測試劑為美國Roche公司產(chǎn)品；ALT檢測試劑盒為德國Siemens、浙江東甌公司產(chǎn)品；免疫印跡法HIV確證試劑盒：人類免疫缺陷病毒(HIV1+2型)抗體檢測試劑盒為美國MP公司產(chǎn)品。所有試劑均為批檢定合格產(chǎn)品，且在有效期內(nèi)使用。

1．3 儀器 血清學檢測系統(tǒng)：STAR全自動樣本處理系統(tǒng)為瑞士Hamilton公司產(chǎn)品；XANTUS全自動加樣儀為深圳愛康公司產(chǎn)品；FAME 24/20全自動酶免分析系統(tǒng)為瑞士Hamilton公司產(chǎn)品；核酸檢測系統(tǒng)：Microlab STAR IVD混樣儀為瑞士Hamilton公司產(chǎn)品；COBAS AmpliPrep核酸提取儀為美國Roche公司產(chǎn)品；COBAS TaqMan擴增儀為美國Roche公司產(chǎn)品；生化分析系統(tǒng)：全自動生化分析儀為德國Siemens公司產(chǎn)品；HIV確證檢測系統(tǒng)：全自動免疫印跡儀為英國Bee Robotics公司產(chǎn)品。儀器設備均每年定期校準合格。

1．4 檢測方法 ELISA 檢測：HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、抗－TP均采用ELISA方法檢測。使用2個不同生產(chǎn)廠家的試劑盒對獻血者血液標本進行初、復檢平行檢測。2種試劑初復檢結果均為反應性判為陽性，1種試劑反應性者用相同試劑進行雙孔復查，復查結果任意1孔有反應性則判為陽性。去除ELISA檢測陽性的標本，ELISA非反應性標本繼續(xù)進行NAT混樣檢測。NAT檢測：采用PCR－熒光法，使用羅氏核酸檢測系統(tǒng)及試劑進行HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA聯(lián)合6混樣核酸定性檢測，初次檢測有反應性的單個pool，對其進行拆分試驗。反應性混樣中拆分出的反應性標本，判定為NAT陽性。HIV確證檢測：抗－HIV陽性或HIV RNA陽性的血液標本送江西省血液中心HIV確證實驗室進行蛋白免疫印跡法（Western blot testing，WB）確證試驗。ALT檢測：采用速率法，以ALT≤50U判為合格標準。所有檢測均嚴格按照試劑說明書設定檢測程序、操作和判斷結果。

1.5 統(tǒng)計學分析 使用SPSS 21.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，采用χ2檢驗進行淘汰率的比較，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2015年-2017年南昌地區(qū)無償獻血者血液檢測傳染性指標淘汰結果統(tǒng)計

2.2 NAT篩查ELISA檢測陰性的獻血者血液結果羅氏COBAS S201核酸檢測系統(tǒng)采用6樣本匯集混樣檢測，對ELISA檢測陰性的無償獻血者血液標本進行NAT篩查，并進一步拆分檢測出反應性的單個樣本。本中心2015年-2017年期間NAT陽性標本合計214例，其中213例反應性樣本為HBV DNA陽性，1例為HIV RNA陽性，未檢出HCV RNA陽性標本。

3 討論

2015 年-2017年南昌地區(qū)無償獻血人群血液標本5項傳染性指標檢測總淘汰率為2.38%，淘汰率由高到低依次為ALT＞HBsAg＞抗-TP＞抗-HCV＞抗-HIV，其中ALT和HBsAg是最主要的不合格項。

ALT是非特異性檢測肝炎病毒感染的替代指標，易受多種非病理性因素以及血液標本因素影響[1]。該指標檢測不合格一直為血液報廢的主要原因。2015年-2017年南昌地區(qū)獻血者ALT檢測淘汰率為1.07%，低于廣東韶關1.94%[2]。隨著ALT快速檢測試紙條的應用，本中心在釆血初篩時嚴格把控，ALT淘汰率保持在適中水平。近三年本中心ALT淘汰率先降后升，是由于2017年團體采血比例上升，團采不具備開展采血前現(xiàn)場ALT初篩檢測條件。該數(shù)據(jù)變化趨勢提示，通過無償獻血宣教告知獻血前應注意休息、清淡飲食，避免因非病理因素導致ALT值升高，同時在釆血前廣泛進行ALT快速篩查，對降低ALT淘汰率十分必要。

我國是HBV感染高發(fā)區(qū)域，普通人群HBV流行率約為7.2%[3]，對輸血安全造成較大威脅。2015年-2017年南昌地區(qū)獻血者HBsAg檢測淘汰率為0.56%，高于江蘇南京0.34%[4]，這可能與江西地區(qū)人群HBV高感染率有關[5]。2015年-2017年ELISA雙試劑篩查陰性血液標本中，NAT檢出HBV DNA陽性標本213例，成功阻斷了疑似乙肝窗口期、隱匿性感染或帶有病毒變異株的血液流入臨床。HBV DNA陽性反應率0.121%，高于河南焦作0.055%[6]，接近江西新余0.15%[7]，低于四川廣元0.205%[8]，該組數(shù)據(jù)反映出不同省份地域乙肝流行率差異。對于檢測結果中NAT反應性標本絕大部分是HBV DNA陽性，分析原因是由于HIV和HCV的感染人數(shù)遠少于HBV，也符合我國HBV感染為主的現(xiàn)狀。以上數(shù)據(jù)分析顯示，南昌地區(qū)獻血人群HBV DNA陽性反應率較高，核酸檢測大幅提高HBV檢出的靈敏度，與酶免檢測互為補充，開展NAT可明顯降低HBsAg隱匿性感染和潛伏期感染的殘余風險[9，10]。

表1 2015年-2017年南昌地區(qū)無償獻血者血液檢測傳染性指標淘汰結果（n，%）

表2 2015年-2017年南昌地區(qū)無償獻血者血液核酸檢測淘汰結果（n，%）

表3 1例HIV RNA陽性血液標本檢測結果

中國為丙肝高發(fā)區(qū)，丙肝感染率3.2%[11]，經(jīng)血液制品傳播是HCV感染的主要途徑之一。2015年-2017年抗-HCV檢測淘汰率為0.21%，低于江西撫州0.249%[12]、江蘇南京0.27%[13]。近3年南昌地區(qū)獻血者抗-HCV淘汰率逐年上升，表明HCV的傳播仍然是南昌地區(qū)輸血治療需要關注的重要風險點。

2015 年-2017年南昌地區(qū)獻血者抗-HIV檢測淘汰率為0.08%，低于甘肅張掖0.137%[14]、新疆烏魯木齊0.20%[15]，139例抗-HIV ELISA初篩陽性標本中，38例經(jīng)WB法檢測為確證陽性，假陽性率73.19%。ELISA法檢測抗-HIV出現(xiàn)假陽性結果，影響因素包括試劑包被抗原的種類及純度、血液中含內(nèi)源性物質(zhì)、檢測過程的影響等。大部分抗-HIV假陽性獻血者被淘汰，造成血源流失，對獻血者帶來一定程度的心理陰影[16]。因此，本中心對假陽性獻血人群建立了歸隊策略，保障獻血者權益。2015年-2017年NAT檢出HIV RNA陽性標本1例，經(jīng)WB法確證檢測，結論為HIV抗體不確定。此例血液標本ELISA檢測無反應性，提示該標本可能處于ELISA檢測“窗口期”。對于輸血相關艾滋病，至少有90%風險來自于獻血者“窗口期”捐獻的血液[17]。本中心NAT成功攔截疑似HIV“窗口期”標本，阻止相關血液制品進入臨床輸注，避免了可能經(jīng)輸血感染艾滋病惡性事件的發(fā)生。

2015 年-2017年南昌地區(qū)獻血者TP檢測淘汰率為0.36%，低于河南濮陽0.77%[18]。有報道稱近年來一些地區(qū)獻血者梅毒感染率有上升趨勢[19]。目前HBsAg/抗-TP聯(lián)合檢測金標試紙條已上市，以此方式增加獻血前抗-TP快速篩查，不會提高人力及時間成本，更有利于提升輸血安全[20]。

血液安全是臨床輸血的關鍵問題，為降低血液檢測淘汰率，更好地為臨床提供優(yōu)質(zhì)血液，筆者建議：1、采供血機構應選擇特異性好、靈敏度高的檢測方法和試劑，如酶免第四代進口試劑及核酸檢測、化學發(fā)光試劑，從而盡可能縮短檢測“窗口期”。2、體檢釆血工作人員應加強對不適宜獻血情況以及獻血后回告途徑的宣傳，嚴格執(zhí)行《獻血者健康檢查標準》，認真做好采血前健康征詢與體檢、初篩工作，充分使用ALT快速檢測試紙、HB-sAg/抗-TP聯(lián)合檢測試紙進行篩查，提高對高危獻血者的鑒別能力。3、血液檢驗工作人員應嚴格按照標準操作規(guī)程和試劑說明書進行檢測操作，避免人為因素導致的假陽性或假陰性結果。