□ 周寧菱 景德鎮(zhèn)市市場和質量監(jiān)督管理綜合檢驗檢測中心
維生素C(VC)又稱抗壞血酸,是人體生長發(fā)育及維持健康不可缺少的營養(yǎng)物質,但是人體內不能貯存VC,同時自身也無法合成VC,且人體若嚴重缺乏VC易引起壞血病[1]。中國營養(yǎng)學會推薦的成人每日VC攝入量為100mg,最高為1000mg,攝入過多或過少都會引起身體的病變,故了解日常飲食,如各種飲料中的VC含量十分必要。
目前,定量VC的方法有2,6-二氯靛酚鈉法[2]、碘量法[3]、分光光度法[4]和高效液相色譜法(HPLC)[5]等。本文選擇高效液相色譜-二極管陣列檢測器法(HPLCPDA)[6]測定常見飲料中VC的含量,此法根據不同物質有不同光譜的特性來定性,通過峰面積來定量。本實驗以8種不同品牌的飲料為檢測樣本,對其VC含量進行測定,并討論開蓋后環(huán)境溫度和放置時間對VC含量的影響,以期為人們科學補充VC提供參考建議。
高效液相色譜儀:Waters e2695型(配置Waters 2998型二極管陣列檢測器)、超純水機(Millipore EXPRESS40)、紫外分光光度計(島津UV 2550型)、VC標準品(中國食品藥品檢定研究院)。
1.2.1 樣品中VC的測定方法
采用HPLC-PDA法測定飲料中的VC含量[6],色譜條件分別是:色譜柱為ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流動相為0.1%醋酸溶液,流速為1.0mL/min,柱溫為28℃。
1.2.2 標準曲線的繪制
精密稱取25.00mg VC標準品,用超純水定容于100mL棕色容量瓶中,配制成250mg/L標準溶液,分別精密量取不同體積的250mg/L VC標準溶液,配制成200mg/L、150mg/L、100mg/L、50mg/L、10mg/L 的VC標準系列溶液。
1.2.3 樣品中VC含量的測定
在超市購買不同品牌的不同種飲料,分別有綠茶(編號1、2)、紅茶(編號3)、功能飲料(編號4)、茉莉茶(編號5)、橙汁(編號6、7)、果蔬汁(編號8)。吸取適量經不同處理后的樣品,經0.45μm針頭過濾,待測。
在200~400nm范圍內測定VC標準溶液的紫外吸收光譜圖(見圖1),由圖1可知,VC在243nm處有最大吸收,故選擇243nm作為檢測波長。
圖1 VC光譜圖
在1.2.1的色譜條件下,吸取不同濃度的VC標準溶液進樣分析。VC標準溶液的高效液相色譜圖(見圖2),再以標準溶液濃度(mg/L)為橫坐標,峰面積(微伏×秒)為縱坐標,繪制標準曲線。從圖3可知,VC線性回歸方程為y=53278x-263819,R2=0.999,線性關系良好。
在1.2.1的色譜條件下測定8種飲料中的VC含量(見圖1和表1)。從表1可知,被測定的8種飲料中,VC含量最高的是茉莉花茶,為494.6±0.5mg/L(N=3);最低的是功能性飲料,為52.3±1.3mg/L(N=3),前者是后者的9倍。不同飲料中含有的VC含量差值較大,李儀等[7]也有類似結果。同一品種飲料之間VC含量也相差較大,如編號1的綠茶是編號2的2.0倍,編號7的橙汁是編號6的4.7倍。
另外,編號8的果蔬汁VC檢測含量為0,在色譜圖中未出現目標峰,利用二極管也排除了其他峰為目標峰的可能性。同時,經不同后續(xù)處理的果蔬汁中也未檢測出VC,但果蔬汁的配料表中顯示為添加了VC,這可能是因為果蔬汁內還有較多的果肉,樣品前處理方法不能簡單的過濾處理,具體原因還有待于深入研究。
圖2 VC標準品(A)和樣品(B)高效液相譜圖
圖3 VC標準工作曲線圖
將8種飲料開蓋取樣后,擰緊瓶蓋,置于常溫下,分別于12h和24h后各取樣一次,各飲料中VC含量變化結果見表1。從表1可知,開蓋12h后,VC含量降低了16.2%~52.2%,而茉莉花茶只降低了6.1%;開蓋24h后,VC含量降低了30.8%~66.4%,茉莉花茶為16.3%,因此建議飲料開蓋后盡快飲用。
將8種飲料開蓋后,分別于0℃冷凍12h、常溫放置12h、45℃水浴12h、65℃水浴12h,經不同處理后的飲料中VC含量見表2。從表2可知,經0℃、常溫、45℃和65℃放置12h,各飲料中VC含量變化分別是8.5%~24.6%、16.2%~52.2%、44.0%~79.7%和47.4%~81.6%,但茉莉花茶中VC含量變化不大??梢姡S著溫度升高,飲料中VC含量大幅下降,因此不建議將飲料加熱飲用,若有剩余,可放于冰箱中冷凍。
目前,市場上銷售的飲料品種繁多,VC也已被添加在各類飲料中,測定飲料中VC的含量可為人們的每日VC攝入量提供參考。本文通過HPLC-PDA法對8種飲料中VC的含量進行測定,同時探究了開蓋后環(huán)境溫度和放置時間對各飲料中VC含量的影響。結果表明,開蓋后隨著環(huán)境溫度的升高或放置時間的延長,飲料中的VC含量均出現了顯著的降低。因此,飲料開蓋后建議盡快飲用完,若有剩余,可置于0℃冷凍;高溫更易加快VC的流失,盡量不要加熱飲用。
表1 存放時間對飲料中VC含量的影響
表2 溫度對飲料中VC含量的影響