蒲華寅,郭 瑾,李艷芳,白 蕓,黃峻榕
(陜西科技大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院,陜西 西安 710021)
馬鈴薯淀粉是薯類淀粉的一種,由于具有較為獨(dú)特的性質(zhì)而優(yōu)于其他淀粉,如糊化溫度低、黏度大、透明度高等.乙?;矸凼堑矸叟c乙?;噭┌l(fā)生酯化反應(yīng)將乙酰基團(tuán)(CH3CO-)引入淀粉中得到的一類淀粉酯,其糊化溫度低、抗凝沉性和凍融穩(wěn)定性好[1],使其部分性質(zhì)更優(yōu)于原淀粉,從而使其更加適用于工業(yè)化應(yīng)用.
乙酸乙烯和乙酸酐是工業(yè)上常用的兩種乙?;噭?目前對(duì)于乙?;矸鄣难芯恐饕▽?duì)其在掛面、速凍水餃等食品[2,3]中的應(yīng)用;乙酰化淀粉的制備方法[4];乙酸酐制備的乙?;矸墼诜肿咏Y(jié)構(gòu)、顆粒結(jié)構(gòu)等方面的研究[5,6],對(duì)乙?;矸墼诹髯兒湍z特性方面的對(duì)比研究較少.本實(shí)驗(yàn)旨在通過對(duì)馬鈴薯原淀粉及乙?;矸哿髯兒湍z特性的研究,探究?jī)煞N乙?;瘜?duì)馬鈴薯淀粉流變學(xué)和凝膠特性的影響,為乙?;矸鄣膽?yīng)用及深加工提供理論依據(jù).
(1)主要材料:馬鈴薯淀粉,青海威思頓薯業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司;乙酸酐、乙酸乙烯均為分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司.
(2)主要儀器: AR2000動(dòng)態(tài)流變儀,美國(guó)TA公司;FEIQ45型環(huán)境掃描電鏡,日本日立集團(tuán);TA.XT plus型物性分析儀,美國(guó)Stable Micro System公司;CTFD-12S冷凍干燥機(jī),青島永合創(chuàng)信電子科技有限公司;SC-05型低速離心機(jī),安徽中科中佳科學(xué)測(cè)定儀器有限公司;VECTOR-22型紅外光譜儀:德國(guó)布魯克公司.
1.2.1 乙酰化淀粉的制備及取代度的測(cè)定
采用兩種乙?;噭?乙酸乙烯、乙酸酐)進(jìn)行低取代度的乙?;玫綄?duì)應(yīng)的兩種乙?;矸?,乙?;矸鄣闹苽溥^程及其取代度的測(cè)定方法參照嚴(yán)青、初麗君[7,8]的實(shí)驗(yàn)方法.
1.2.2 乙?;矸鄣募t外表征
采用傅里葉變換紅外光譜儀(FTIR)對(duì)樣品的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析[9].取一定量樣品放入105 ℃的干燥箱中干燥2 h,冷卻至室溫后,將少量樣品放入瑪瑙研缽中,加入溴化鉀,混合、研磨、壓片后放入傅里葉變換紅外光譜儀上進(jìn)行測(cè)試.測(cè)試參數(shù)為:以空氣為空白,分辨率為4 cm-1,波數(shù)范圍為4 000~400 cm-1.
1.2.3 淀粉流變特性測(cè)定
采用AR2000旋轉(zhuǎn)流變儀對(duì)原淀粉及兩種乙?;矸鄣酿ざ忍匦约傲髯兲匦赃M(jìn)行測(cè)定[10].
(1)淀粉黏度性質(zhì)測(cè)定
配制濃度為6%、8%、10%的淀粉乳,采用標(biāo)準(zhǔn)糊化程序?qū)︸R鈴薯原淀粉及其乙?;矸鄣暮匦赃M(jìn)行測(cè)定.標(biāo)準(zhǔn)糊化程序如表1所示.
表1 淀粉乳標(biāo)準(zhǔn)糊化程序
(2)淀粉線性黏彈區(qū)的確定
對(duì)淀粉糊進(jìn)行頻率為f=1 Hz的應(yīng)變掃描測(cè)試,確保后續(xù)程序中淀粉流變特征值都在線性黏彈區(qū)內(nèi).測(cè)試參數(shù):溫度50 ℃,應(yīng)變量由0.001%變化到10.0%.
(3)淀粉糊動(dòng)態(tài)流變特性的測(cè)定
確定線性黏彈區(qū)后進(jìn)行淀粉糊的動(dòng)態(tài)流變特性測(cè)定.溫度由50 ℃升高至95 ℃,再降低到50 ℃(溫度變量單位為5 ℃),測(cè)定彈黏性模量(G′、G″)在升溫和降溫過程中的變化,測(cè)試條件:頻率為f=1 Hz,應(yīng)變?yōu)?.0%.
(4)淀粉糊靜態(tài)流變特性的測(cè)定
完成動(dòng)態(tài)流變測(cè)試后進(jìn)行淀粉糊的靜態(tài)流變測(cè)試.不改變測(cè)試條件,剪切速率由0.1增大到100,再降低到0.1,測(cè)定淀粉糊剪切應(yīng)力隨剪切速率的變化.
(5)數(shù)據(jù)處理
用OriginPro 9.0軟件處理數(shù)據(jù).采用冪律方程(τ=Kγn,τ-剪切應(yīng)力/Pa,K-稠度系數(shù)/Pa·Sn,γ-剪切速率/s-1,n-流體指數(shù))對(duì)淀粉靜態(tài)流變曲線數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析,得到K、n、R2(復(fù)相關(guān)系數(shù))和滯后環(huán)面積.
1.2.4 淀粉凝膠特性測(cè)定
(1)淀粉凝膠質(zhì)構(gòu)特性測(cè)定
樣品經(jīng)過流變儀測(cè)定其流變特性后,將淀粉凝膠收集于小鋁盒中,放入4 ℃冰箱中冷藏24 h后取出,進(jìn)行質(zhì)構(gòu)測(cè)定.測(cè)試條件:選擇二次按壓(TPA)模式,探頭為P/0.5,下壓距離為6 mm,測(cè)前速度及測(cè)后速度均為3 mm/s,測(cè)中速度為1 mm/s,每個(gè)樣品均測(cè)試三次.
(2)淀粉凝膠凍融穩(wěn)定性的測(cè)定
原淀粉及其乙酰化淀粉凝膠凍融穩(wěn)定性的測(cè)定參照董貝貝[11]的實(shí)驗(yàn)方法.
(3)淀粉凝膠微觀結(jié)構(gòu)的觀察
將凍干后的淀粉凝膠切成大小均勻的正方塊(長(zhǎng)、寬、高均為5 mm)貼于導(dǎo)電膠上,噴金后,將帶有樣品的載物臺(tái)放入掃描電鏡的進(jìn)樣室,在真空條件下進(jìn)行觀察.
紅外表征分析結(jié)果:與原淀粉相比,兩種乙?;矸鄯謩e在1 733 cm-1、1 375 cm-1和1 254 cm-1處出現(xiàn)了新的吸收峰(如圖1所示).1 733 cm-1處的吸收峰是羰基的特征吸收峰,1 375 cm-1和1 254 cm-1處的吸收峰是乙酸酯的特征吸收峰[8],因此確定在兩種乙?;矸鄯肿又幸肓艘阴;鶊F(tuán).乙酸乙烯和乙酸酐乙酰化淀粉的取代度分別為0.101和0.093.
圖1 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙?;矸?乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的紅外光譜圖
2.2.1 淀粉的黏度特性
淀粉的黏度曲線反應(yīng)了淀粉在糊化過程中黏度的變化趨勢(shì),并得到各個(gè)特征點(diǎn),如峰值黏度、谷值黏度、終黏度及糊化溫度等.原淀粉顆粒的黏度曲線屬于典型的A型(在水中逐漸加熱時(shí),黏度曲線會(huì)有明顯急劇的上升階段,且峰值黏度較高,隨后黏度大幅下降,在后續(xù)的降溫過程中,黏度又會(huì)出現(xiàn)小幅度的回升).乙酰化淀粉的黏度曲線與原淀粉的相似(如圖2所示).
(a)6%濃度
(b)8%濃度
(c)10%濃度圖2 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙?;矸?乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的黏度曲線
三個(gè)濃度條件下,原淀粉的糊化溫度(62.2 ℃~63.2 ℃)都高于乙?;矸鄣?58.0 ℃~60.4 ℃).隨著濃度的增大,原淀粉和乙酰化淀粉的黏度值都大幅增加.6%濃度時(shí),乙酸乙烯乙酰化淀粉的峰值黏度最小;8%和10%濃度時(shí),兩種乙?;矸鄣姆逯叼ざ?7 958~13 060 cP)均高于原淀粉的(7 815~11 170 cP).6%和8%濃度時(shí),兩種乙酰化淀粉的谷值黏度(1 882~3 279 cP)和終黏度(3 054~5 292 cP)均大于原淀粉的對(duì)應(yīng)值(分別為1 530~2 485 cP和2 686~4 408 cP).可能是由于乙?;?,淀粉的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,使直鏈淀粉與支鏈淀粉之間的相互作用增強(qiáng),溶液黏度增加[12].濃度為10%時(shí),兩種乙酰化淀粉的終黏度(5 968~6 756 cP)與原淀粉的(6 203 cP)相近.這可能是由于隨著濃度的增加,淀粉分子密度的增大使得分子鏈之間纏結(jié)作用加劇,乙酰基團(tuán)的影響相對(duì)減小.因此乙?;矸圻m宜在較低濃度下使用.
兩種乙?;矸鄣酿ざ纫泊嬖诓町?6%、8%和10%濃度時(shí),乙酸酐乙?;矸鄣姆逯叼ざ?4 725 cP、8 672 cP、13 060 cP)都大于乙酸乙烯乙酰化淀粉的(4 239 cP、7 958 cP、11 680 cP).可能是由于乙?;鶊F(tuán)在淀粉顆粒內(nèi)外層分布不同造成.Huang等[13]研究提出,乙酸酐乙?;矸鄣囊阴;鶊F(tuán)大部分位于淀粉顆粒表面的直鏈淀粉上,而乙酸乙烯乙?;矸鄣囊阴;鶊F(tuán)在淀粉顆粒的內(nèi)外層均有分布,說(shuō)明乙酸酐在乙?;磻?yīng)中僅作用于淀粉顆粒的特定部分,而乙酸乙烯的乙?;磻?yīng)則貫穿整個(gè)淀粉顆粒.在流動(dòng)過程中,直鏈淀粉比支鏈淀粉更易被拉伸取向,流動(dòng)性增強(qiáng),故乙?;迦胫辨湹矸壑袝?huì)產(chǎn)生較大的阻力,因此乙酸酐乙?;矸巯啾扔谝宜嵋蚁┮阴;矸劬哂休^高的黏度值.
2.2.2 淀粉的動(dòng)態(tài)流變特性
動(dòng)態(tài)流變特性是指給流體在一定的頻率下施以不變的力時(shí),淀粉糊在不同溫度下表現(xiàn)出的黏彈性行為,包括彈性模量G′和黏性模量G″.彈性模量越大,物質(zhì)受力時(shí)變形程度越小,淀粉糊變形后恢復(fù)的能力越強(qiáng);黏性模量越大,體系抵抗流動(dòng)能量越強(qiáng),體系越不易流動(dòng)[14].
在升溫過程中,彈黏性模量逐漸減小,在降溫過程中又逐漸增加.升溫時(shí)所有淀粉的彈黏性模量均大于降溫時(shí)的,且所有淀粉的彈性模量均大于黏性模量(如圖3所示),說(shuō)明馬鈴薯原淀粉及其乙?;矸郾憩F(xiàn)出傾向于固體特征.
乙酸酐乙?;矸鄣膹楌ば阅A孔罡?6%濃度下50 ℃時(shí)彈黏性模量依次為56.3 Pa、16.2 Pa),其次是原淀粉的(39.4 Pa、17.3 Pa),乙酸乙烯乙?;矸鄣淖钚?36.9 Pa、11.1 Pa),說(shuō)明淀粉糊的彈黏性與其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的差異密切相關(guān).相比于原淀粉,乙?;矸鄣膹楌ば阅A侩S溫度變化較平緩(如圖3所示),是因?yàn)橹辨湹矸凵系囊阴;鶊F(tuán)使淀粉分子難聚集、靠近,減弱淀粉分子間相互作用,在變溫過程中,淀粉分子的運(yùn)動(dòng)對(duì)淀粉糊的影響作用較小[7],故乙酰化淀粉不易回生,熱穩(wěn)定性較好,說(shuō)明其增稠和穩(wěn)定效果較好,可將其應(yīng)用于食品添加劑.
圖3 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙酰化淀粉(乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的動(dòng)態(tài)流變曲線(升溫時(shí)所有淀粉的彈黏性模量均大于降溫時(shí)的彈黏性模量)
兩種乙?;矸巯啾?,乙酸酐乙?;矸酆膹楌ば阅A吭谏郎睾徒禍剡^程中變化的幅度較小,模量差值隨著溫度的變化也較小,故乙酸酐乙?;矸鄣臒岱€(wěn)定性更好.這是由于乙酸酐乙?;矸鄣囊阴;鶊F(tuán)主要集中于直鏈淀粉分子上,而直鏈淀粉分子的重排引起淀粉的短期回生[15],故乙酸酐乙?;矸墼诙唐趦?nèi)難以回生,熱穩(wěn)定性好,體系強(qiáng)度較好,用于食品增稠劑時(shí),穩(wěn)定效果更佳.
2.2.3 淀粉的靜態(tài)流變特性
在三個(gè)濃度條件下,原淀粉及其乙?;矸鄣撵o態(tài)流變曲線變化趨勢(shì)相似(如圖4所示),濃度的改變和乙酰化并未改變馬鈴薯淀粉糊的流體類型,均表現(xiàn)為假塑性流體.所有淀粉糊流變曲線均形成梭形的滯后環(huán)結(jié)構(gòu),這是由于隨著剪切應(yīng)力的增大,纏繞的淀粉鏈被分散,結(jié)構(gòu)破壞,剪切應(yīng)力減小時(shí),被破壞的結(jié)構(gòu)又逐漸恢復(fù),其恢復(fù)的速度小于被破壞的速度所造成的.滯后環(huán)面積的大小表示觸變性的強(qiáng)弱[16].滯后環(huán)面積越大,觸變性越強(qiáng),形成凝膠的能力就越差.
隨著濃度的增大,各淀粉的滯后環(huán)面積明顯增大(如表2所示).相較于原淀粉,兩種乙酰化淀粉糊的滯后環(huán)面積隨濃度增大的幅度較小(濃度從8%增大到10%時(shí),滯后環(huán)面積增大的幅度分別為:乙酸酐乙?;矸?4%、乙酸乙烯乙?;矸?5%、原淀粉131%),這是由于乙?;鶊F(tuán)的空間阻礙,分子間氫鍵作用隨濃度變化較小.
圖4馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙酰化淀粉(乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的靜態(tài)流變曲線
表2 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙?;矸?乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的靜態(tài)流變參數(shù)
在6%和8%濃度時(shí),乙酸酐乙?;矸鄣臏蟓h(huán)面積最大,其次是乙酸乙烯乙?;矸鄣?,原淀粉糊的最小(如表2所示),可能是由于乙酸酐乙?;矸鄣酿ざ茸畲?,分子間作用力最強(qiáng),使其結(jié)構(gòu)被破壞后恢復(fù)性較差,故其觸變性最大.因此在低濃度時(shí),乙酰化淀粉相比于原淀粉更適合于食品加工.10%濃度時(shí),原淀粉滯后環(huán)面積較大,乙酰化淀粉的較小,說(shuō)明馬鈴薯原淀粉的觸變性對(duì)較高濃度更為敏感.滯后環(huán)面積越大,樣品的觸變性越強(qiáng),剪切穩(wěn)定性越差,越不利于食品的保型及加工制作[17].
流動(dòng)系數(shù)n用來(lái)表征淀粉糊的流體性能[18],原淀粉及乙?;矸酆膎值均小于1,說(shuō)明各淀粉均為假塑性流體,而乙?;⑽锤淖凂R鈴薯淀粉的流體類型.而稠度系數(shù)K(反應(yīng)流體的黏稠度)隨著淀粉濃度的增大而增大,各濃度下均是乙酰化淀粉的K值大于原淀粉的.
2.3.1 淀粉凝膠的微觀結(jié)構(gòu)
從掃描電鏡圖可以看出(如圖5所示),不同濃度的原淀粉及其乙?;矸勰z均呈現(xiàn)三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu).隨著濃度的增大,相同體積內(nèi)淀粉分子數(shù)量增多,凝膠的網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)更加緊湊密集,凝膠內(nèi)部空隙變小,網(wǎng)孔尺寸也就逐漸減小(原淀粉凝膠6%:198μm、8%:168μm、10%:113μm).高濃度淀粉凝膠的均勻性比低濃度的差,說(shuō)明淀粉分子數(shù)量增多的同時(shí)也增大了凝膠系統(tǒng)的不穩(wěn)定性.
(a)NPS-6% (b)VA-6% (c)AA-6%
(d)NPS-8% (e)VA-8% (f)AA-8%
(g)NPS-10% (h)VA-10% (i)AA-10%圖5 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙?;矸勰z(乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的掃描電鏡圖
與原淀粉凝膠相比,乙?;矸勰z的微觀結(jié)構(gòu)較差,網(wǎng)孔輪廓不清晰.原因可能是其形成的網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)的強(qiáng)度較為脆弱,部分網(wǎng)孔相互擠壓融合導(dǎo)致網(wǎng)孔壁斷裂、塌陷.相較于乙酸乙烯乙?;矸勰z,乙酸酐乙?;矸勰z的結(jié)構(gòu)較為松散,部分凝膠出現(xiàn)塌陷和層狀,是由于其部分淀粉分子相互聚集而未整體結(jié)合造成,同時(shí)直鏈淀粉的含量影響淀粉凝膠的形成,乙酸酐乙酰化淀粉的乙?;鶊F(tuán)主要分布在直鏈淀粉上,對(duì)凝膠的形成影響更大,故乙酸酐乙酰化淀粉凝膠結(jié)構(gòu)更為松散脆弱.
2.3.2 淀粉凝膠的質(zhì)構(gòu)特性
淀粉凝膠是淀粉糊冷卻后淀粉分子重新以氫鍵形式結(jié)合形成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu).
原淀粉凝膠的硬度和膠黏性較大,并隨著濃度的增大而增大,乙?;矸勰z的較小,且隨濃度的增大無(wú)明顯變化,各淀粉的硬度和膠黏性之間差異顯著(如表3所示).乙酰基團(tuán)插入造成的空間位阻使直鏈淀粉分子難以相互聚集靠近,淀粉分子間形成氫鍵的可能性更小,淀粉分子與水形成氫鍵的可能性更大[13],并且直鏈淀粉含量對(duì)淀粉凝膠硬度影響較大[19].故相比于原淀粉,乙?;矸勰z的網(wǎng)絡(luò)強(qiáng)度降低,內(nèi)部結(jié)合度也較低.
表3 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙酰化淀粉凝膠(乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的質(zhì)構(gòu)特征值
注:同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05).
在三個(gè)濃度下,原淀粉及乙酰化淀粉凝膠的彈性和內(nèi)聚性相對(duì)較小,且彈性無(wú)顯著差異(如表3所示).有研究者認(rèn)為凝膠在受到較大力度的擠壓時(shí),部分結(jié)構(gòu)被破壞,其彈性和內(nèi)聚性失去分析意義.Seetapan等[20]和張磊等[15]也發(fā)現(xiàn)了此現(xiàn)象,原因可能是乙酰化淀粉凝膠的網(wǎng)孔強(qiáng)度和內(nèi)部結(jié)合度較低,在下壓過程中容易被探頭破壞,發(fā)生輕微形變,同時(shí)膠黏性較高,使其與探頭粘黏,使乙?;矸勰z的彈性、內(nèi)聚性無(wú)參考價(jià)值.
2.3.3 淀粉凝膠的凍融穩(wěn)定性
淀粉凝膠的凍融穩(wěn)定性可以反映淀粉與水相互結(jié)合的能力.淀粉的析水率越大,凝膠的凍融穩(wěn)定性越差,淀粉跟水的結(jié)合力越弱.原淀粉凝膠在前二個(gè)凍融循環(huán)中有較大的析水率,在后續(xù)的凍融循環(huán)中析水較少.乙酸乙烯乙?;矸勰z的析水率逐漸增多.乙酸酐乙酰化淀粉凝膠在后四個(gè)循環(huán)中析水較多,且第四個(gè)凍融循環(huán)達(dá)到最大析水率(如表4所示).原淀粉與乙酰化淀粉凝膠析水率的差異可能與凍融過程對(duì)凝膠結(jié)構(gòu)的破壞程度有關(guān)[21].
表4 馬鈴薯原淀粉(NPS)及兩種乙?;矸勰z(乙酸乙烯VA和乙酸酐AA)的析水率
綜合比較,乙酸乙烯乙?;矸勰z的凍融穩(wěn)定性最好,其次是原淀粉凝膠的,乙酸酐乙酰化淀粉凝膠的最差.其原因可能為三種淀粉的內(nèi)部結(jié)構(gòu)不同,分子間相互作用不同,因而造成淀粉分子與水分子相互結(jié)合能力有所不同.兩種乙?;矸勰z析水率的差異也與乙?;鶊F(tuán)在直鏈淀粉、支鏈淀粉分子的分布不同有關(guān)[22].有研究發(fā)現(xiàn),位于支鏈淀粉上的乙?;鶊F(tuán)在一定程度上可以增強(qiáng)淀粉與水之間的相互作用,使淀粉凝膠的凍融穩(wěn)定性增強(qiáng).乙酸酐乙酰化淀粉的乙?;鶊F(tuán)大部分位于直鏈淀粉上,乙酸乙烯乙酰化淀粉的乙?;鶊F(tuán)在直鏈淀粉上的較少,故乙酸乙烯乙?;矸勰z的凍融穩(wěn)定性最好.
乙酸酐乙酰化淀粉有最大的黏度特征值(峰值黏度、谷值黏度、終黏度).與原淀粉相比,乙?;鰪?qiáng)了馬鈴薯淀粉糊的熱穩(wěn)定性,其中乙酸酐乙?;矸鄣臒岱€(wěn)定性更好.原淀粉及其乙?;矸劬鶠榧偎苄粤黧w且存在剪切稀化現(xiàn)象.相比于原淀粉,乙?;龃罅笋R鈴薯淀粉的觸變性,而乙酸酐乙?;矸鄣挠|變性較強(qiáng).在較低濃度(6%)時(shí),乙?;鶊F(tuán)對(duì)淀粉糊化和流變特性的影響比較高濃度(8%、10%)時(shí)更為明顯.
原淀粉凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)強(qiáng)度最大且最為均勻(113~198μm),乙?;矸勰z的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)強(qiáng)度較低,易被破壞,凝膠的網(wǎng)孔尺寸在較大的范圍內(nèi)變動(dòng)(9~276μm).與原淀粉相比,乙?;矸坌纬赡z的能力較差,但兩種乙酰化淀粉凝膠之間差異不大.原淀粉及乙酸酐乙?;矸勰z的凍融穩(wěn)定性較差,而乙酸乙烯乙?;矸勰z的凍融穩(wěn)定性較好.
該研究發(fā)現(xiàn)在較低濃度時(shí),乙?;瘜?duì)糊化和流變特性更為敏感,為工業(yè)生產(chǎn)中在不同濃度下選擇合適的淀粉原料提供理論依據(jù).