和繪華 鄭瑞

【摘 要】目的：對手工法雙相血培養(yǎng)和BacT/Alert 3D全自動血培養(yǎng)儀在新生兒血培養(yǎng)的檢出結(jié)果作回顧性分析。方法：對2009-2011年使用手工雙向血培養(yǎng)瓶的432份血標(biāo)本與2016-2018年使用全自動血培養(yǎng)儀的663份血標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌陽性檢出率、檢出時(shí)間、檢出種類的比較。結(jié)果：432例雙向血培養(yǎng)瓶陽性11例，陽性率為2.55%，污染率1.15%。663例全自動血培養(yǎng)儀陽性30例，其中與臨床醫(yī)生溝通符合病人臨床體征，有臨床意義的病原菌24株，陽性率為4.52%；污染率0.90%，48小時(shí)兩種血培養(yǎng)方法陽性菌構(gòu)成比：手工法革蘭氏陽行球菌占67%，儀器法占73%。結(jié)論：在新生兒血培養(yǎng)中，BacT/Alert 3D全自動血培養(yǎng)儀的陽性率高，檢出時(shí)間短（一般陽性標(biāo)本在48小時(shí)內(nèi)可自動報(bào)陽性最早可在培養(yǎng)后6-12小時(shí)報(bào)陽性，24小時(shí)報(bào)陽性率較高），細(xì)菌檢出種類增多，提高了血培養(yǎng)的送檢數(shù)。

【關(guān)鍵詞】新生兒；血培養(yǎng)；手工雙向血培養(yǎng)瓶；全自動血培養(yǎng)儀；病原菌

【中圖分類號】R25.36 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2095-6851（2018）09--01

新生兒免疫功能尚處于完善階段，難以完全抵抗分娩時(shí)及產(chǎn)后接觸的所有病原菌，常因此發(fā)生血流感染甚至敗血癥等疾病[1]，增加其致死風(fēng)險(xiǎn)。臨床研究證實(shí)，新生兒分娩后行血培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，可提高其早期疾病檢出率，使治療更具針對性與預(yù)見性，對提升新生兒存活率及生存質(zhì)量有意義重大。隨著全自動微生物標(biāo)本接種儀的相繼問世，因其標(biāo)本接種速度快，操作誤差少，菌落分辨率高，檢測周期短等優(yōu)點(diǎn)，逐步受到微生物檢驗(yàn)人員和臨床醫(yī)師的認(rèn)可。本文通過收集2009-2011年使用手工雙向血培養(yǎng)瓶的432份血標(biāo)本與2016-2018年使用全自動血培養(yǎng)儀的663份血標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌陽性檢出率、檢出時(shí)間、檢出種類的比較。對其作回顧性分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 1095例血培養(yǎng)標(biāo)本來自于2009年7月至2018年3月在本院就診的住院患者。

1.2 儀器與試劑血培養(yǎng)瓶：鄭州安圖生物工程股份有限公司生產(chǎn)的手工雙相血培養(yǎng)瓶（需氧菌或兼性厭氧菌，以下稱手工血瓶）；法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的BacT/Alert3D。培養(yǎng)瓶：中和抗生素需氧瓶（FA瓶）、厭氧瓶（SN瓶）以及中和抗生素兒童瓶（PF瓶）。培養(yǎng)基：法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的哥倫比亞血平板、巧克力平板，杭州天河微生物試劑公司生產(chǎn)的麥康凱干粉培養(yǎng)基。ATB-Expression細(xì)菌鑒定及配套藥敏條，全自動血培養(yǎng)儀BacT/Alert3D240，V1TEK2compact細(xì)菌鑒定儀及配套藥敏卡，均為法國生物梅里埃公司生產(chǎn)。質(zhì)控菌株：標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853和糞腸球菌ATCC292120

1.3 方法

1.3.1 手工血培養(yǎng)以無菌操作取靜脈血5-8 mI.注入手工血瓶中，搖勻，放置35℃溫箱，每天上午、下午兩次觀察液體及固體培養(yǎng)基上有無細(xì)菌生長，如有細(xì)菌生長，涂片染色并轉(zhuǎn)種血平板、巧克力和麥康凱平板，使用ATB-Expression細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)；連續(xù)培養(yǎng)7d無細(xì)菌生長，報(bào)告陰性。

1.3.2 儀器法按照BacT/Alert3D240。血培養(yǎng)儀標(biāo)本采集量的要求，采集患者血液后注入相應(yīng)的培養(yǎng)瓶，成人加入FA和SN瓶，兒童加入PF瓶，儀器報(bào)警陽性，進(jìn)行涂片鏡檢并轉(zhuǎn)種，若有細(xì)菌生長為陽性，用VITEK2compact全自動細(xì)菌鑒定儀鑒定及藥敏；5 d無陽性報(bào)警，報(bào)告為陰性；當(dāng)儀器提示陽性，涂片培養(yǎng)均未見細(xì)菌為假陽性，污染菌按照《臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范》川及《實(shí)驗(yàn)室對血培養(yǎng)污染的評估方案》[2]的依據(jù)判讀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué) 處理采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種培養(yǎng)瓶陽性檢出率比較2009-2011年使用手工雙向血培養(yǎng)瓶的432份血標(biāo)本與2016-2018年使用全自動血培養(yǎng)儀的663份血標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌陽性檢出率、檢出時(shí)間、檢出種類的比較。結(jié)果：432例手工血培養(yǎng)陽性11株，陽性率為2.55%，污染率1.25%，663例全自動血培養(yǎng)48 小時(shí)內(nèi)分離出30株病原菌，其中有臨床意義的病原菌24株，陽性率為4.52%；污染率0.90%；二者陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。48小時(shí)兩種血培養(yǎng)方法陽性檢出率細(xì)菌構(gòu)成比（%）：手工法革蘭氏陽行球菌占67%，儀器法占73%。

2.2 48 小時(shí)內(nèi)兩種血培養(yǎng)方法細(xì)菌陽性檢出率比較：使用儀器法對于檢出陽性率，革蘭氏陽性球菌檢出率均高于手工方法。結(jié)果見表2

3 討論

3.1陽性率結(jié)果的比較分析本研究中手工法與儀器法血培養(yǎng)陽性率分別為2.55%和4.52%，二者有差異，但異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05 ）。儀器法的陽性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于龔興旺報(bào)道的血培養(yǎng)15.1%陽性率[3]。

3.2兩種方法中均以革蘭陽性球菌為主要病原菌，這一結(jié)果提示，對新生兒的產(chǎn)后致病菌預(yù)防可將革蘭陽性球菌作為重點(diǎn)關(guān)注對象，此類菌株多具有耐藥性強(qiáng)、藥物耐受范圍廣等特點(diǎn)，對新生兒生命健康安全威脅極大。本次檢出的病原菌，以金黃色葡萄球菌、腸球菌、大腸埃希菌及表皮葡萄球菌檢出率最高，分別達(dá)到32%，22%，21%和17%，表明上述四類菌株在新生兒病原菌感染中最為常見，需引起臨床醫(yī)師重視。

參考文獻(xiàn)

宋海英，承曉京，張文蓉，等.新生兒血培養(yǎng)的病原菌及耐藥性分析.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27（7）：540-543.

中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范[S].北京：中華人民共和國衛(wèi)生部，2012.

龔興旺，周永，白梅，等.應(yīng)用全自動血培養(yǎng)儀提高血液、無菌體液培養(yǎng)陽性率的臨床觀察[J].黔南民族醫(yī)專學(xué)報(bào)，2015，28（1）；32-33.