康敏榮， 付兆強， 溫紅祥， 閆 偉

（中國人民解放軍第四五五醫(yī)院檢驗科，上海 200052）

中國人民解放軍第四五五醫(yī)院檢驗科臨檢室發(fā)現(xiàn)癌癥晚期患者外周血難溶紅細胞導(dǎo)致的白細胞（white blood cell，WBC）假性增高1例。該患者住院期間共進行4次血常規(guī)檢測，前3次血常規(guī)檢測結(jié)果均出現(xiàn)難溶紅細胞導(dǎo)致的WBC假性增高，儀器報警，最后1次血常規(guī)檢測儀器未出現(xiàn)報警提示，未對WBC計數(shù)及分類進行糾正。采用XT-1800i全自動血液分析儀（日本Sysmex公司）稀釋液對標本進行稀釋，運用該儀器和牛鮑計數(shù)板人工計數(shù)法檢測WBC計數(shù)，并制備患者血涂片行瑞吉染色，油鏡下進行WBC分類，以糾正儀器檢測出現(xiàn)嗜堿性粒細胞（basophil，BASO）計數(shù)增高的情況，從而保證血常規(guī)檢測WBC計數(shù)及分類的準確性。結(jié)合患者實際情況，經(jīng)臨床醫(yī)生確認，發(fā)放最終檢測報告。

1 病例資料

患者，男，64歲，有高血壓病史，于2009年經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院確診患有小細胞淋巴瘤，于2014年確診患有肺腺癌。因尿液渾濁及低燒1周入院，臨床醫(yī)生給予抗感染及鎮(zhèn)痛治療，入院1周后尿路感染痊愈、出院。治療前患者生化檢測結(jié)果為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶3.0 U/L，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶17.0 U/L，乳酸脫氫酶585.0 U/L，總膽紅素6.9 μmol/L，直接膽紅素4.24 μmol/L，總蛋白53 g/L，白蛋白24.1 g/L，血糖5.5 mmol/L，肌酐45 μmol/L；尿常規(guī)鏡檢（高倍）檢測結(jié)果為WBC+++，紅細胞++，菌尿；血常規(guī)檢測結(jié)果為WBC 5.08×109/L，中性粒細胞78.0%，淋巴細胞15.0%，單核細胞6%，嗜酸性粒細胞1.0%，紅細胞2.13×1012/L，血紅蛋白66 g/L，血小板147×109/L，XT-1800i全自動血液分析儀出現(xiàn)儀器報警提示W(wǎng)BC散點圖異常，WBC/BASO通道9.71×109/L有明顯“火箭式拖尾”現(xiàn)象，WBC分類DIFF通道6.45×109/L，見圖1。標本經(jīng)稀釋后，儀器和牛鮑計數(shù)板人工計數(shù)法檢測WBC計數(shù)的均值為5.08×109/L。稀釋后儀器和牛鮑計數(shù)板人工計數(shù)法WBC計數(shù)結(jié)果與DIFF通道和WBC/BASO通道比較，均有差異，見圖2。因人工計數(shù)法為金標準，其WBC計數(shù)更接近患者實際情況，故選用人工計數(shù)法WBC計數(shù)結(jié)果為最終結(jié)果，發(fā)放檢測報告。

圖1 WBC散點圖

圖2 WBC分析數(shù)據(jù)

2 討論

在實際工作中，血液分析儀的檢測會受多種因素影響，需要檢測人員對干擾因素進行正確處理。XT-1800i全自動血液分析儀采用半導(dǎo)體激光器，運用電阻抗法對細胞進行計數(shù)；采用流體動力學(xué)方法對紅細胞和血小板進行分析；采用半導(dǎo)體激光流式細胞技術(shù)結(jié)合聚次甲基染料對WBC進行染色、分類。半導(dǎo)體激光對經(jīng)鞘流技術(shù)處理的細胞進行照射，根據(jù)細胞所產(chǎn)生的信號，來區(qū)分細胞的種類。在DIFF通道中注入溶血劑STROMATOLYSER-4DL（主要成分為非離子型表面活性劑），使紅細胞溶解成為影細胞，以便儀器進行WBC分類和計數(shù)；在WBC/BASO通道中注入溶血劑STROMATOLYSER-FB（主要成分為非離子型表面活性劑和有機季銨鹽），以便儀器進行BASO和WBC分類。

本例患者血常規(guī)檢測結(jié)果出現(xiàn)儀器報警，提示W(wǎng)BC散點圖異常，存在難溶紅細胞，WBC/BASO通道有明顯“火箭式拖尾”現(xiàn)象。參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）[1]，使用XT-1800i全自動血液分析儀對稀釋后的血液標本進行WBC計數(shù)，其結(jié)果更接近人工計數(shù)法，且儀器不再出現(xiàn)難溶紅細胞及WBC/BASO通道“火箭式拖尾”現(xiàn)象。

正常紅細胞膜呈非對稱性雙分子層結(jié)構(gòu)，由膽固醇（cholesterol，CH）和磷脂（phospholipid，PL）組成，CH與PL比值通常為0.8～1.0。紅細胞膜會受多種因素影響，造成PL成分降低，CH與PL比值升高，非對稱性雙分子層結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，這種異常的紅細胞膜對溶血劑有抵抗作用，導(dǎo)致紅細胞溶血不完全[2]。國內(nèi)多項研究報道結(jié)果顯示，受高膽紅素水平的影響，紅細胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使之不易溶解，WBC計數(shù)池中出現(xiàn)紅細胞，使WBC計數(shù)出現(xiàn)假性增高現(xiàn)象[3-7]。本例患者膽紅素水平正常，肝功能、腎功能正常，XT-1800i全自動血液分析儀出現(xiàn)儀器報警提示W(wǎng)BC散點圖異常，存在難溶紅細胞，WBC/BASO通道有明顯“火箭式拖尾”現(xiàn)象，提示患者WBC假性增高，其原因可能是由于癌癥晚期患者受病理及前期化療藥物的影響，血液中自由基增多，自由基與紅細胞膜PL成分中的不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，導(dǎo)致紅細胞膜不飽和脂肪酸減少，不飽和度下降，紅細胞脆性降低，非離子型表面活性劑對紅細胞膜PL溶解能力減弱，PL與紅細胞膜上的蛋白分離作用減弱[8-9]，使部分紅細胞難以溶解，存在于WBC計數(shù)池中，導(dǎo)致儀器DIFF通道和WBC/BASO通道與人工計數(shù)法的WBC計數(shù)結(jié)果相差巨大。WBC/BASO通道中注入的溶血劑主要成分除了有非離子型表面活性劑之外，還有有機季銨鹽，其中有機季銨鹽無溶解紅細胞的生物活性；DIFF通道中注入的溶血劑主要成分為非離子型表面活性劑，這可能是DIFF通道比WBC/BASO通道檢測結(jié)果更接近人工計數(shù)法的原因。DIFF通道和WBC/BASO通道檢測結(jié)果均出現(xiàn)WBC假性增高，須與人工計數(shù)法比較，予以糾正。

綜上所述，當(dāng)檢測人員遇到儀器受干擾的情況時，需及時對儀器報警及散點圖結(jié)果進行分析。當(dāng)出現(xiàn)儀器報警提示散點圖異常時，需結(jié)合其他方法（3種及以上）以確保檢測結(jié)果的準確性，同時應(yīng)結(jié)合臨床，發(fā)放最終檢測報告。