朱生榮 ，高志卿 ，馬有翔 ，鄭 鵬 ，王玉璞 ，張建鵬

（1.山丹縣動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 山丹734100；2.山丹縣清泉鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 山丹734100）

布氏桿菌病是由布氏桿菌引起的一種重要的人獸共患病。布氏桿菌具有宿主廣泛傳染性強以及感染后根治困難等特點對畜牧業(yè)和人類健康均構(gòu)成嚴(yán)重威脅。疫苗免疫是預(yù)防和控制布氏桿菌病的主要措施?？谔阋呤怯煽谔阋卟《疽鸬呐继銊游锏囊环N急性、熱性、高度接觸性傳染病，以傳播迅速、感染率高為其特點。世界各國對本病的研究極為重視，世界動物衛(wèi)生組織將其列為A類傳染病之首。長期以來，口蹄疫作為重大動物疫病進行全覆蓋強制免疫，這幾年布病發(fā)病率的逐年上升，該病也作為優(yōu)先防治病種在山丹縣實行全覆蓋免疫，基層防疫人員的工作任務(wù)繁重，勞動強度加大。本研究同時接種布氏菌病活疫苗（S2株）和口蹄疫O型、亞洲1型二價滅活疫苗，觀察統(tǒng)計免疫反應(yīng)，檢測免疫抗體效價，分析兩種疫苗是否存在相互干擾。

1 材料和方法

1.1 疫苗、試劑及試驗動物 布氏菌病活疫苗（S2株），購自新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司。布魯氏菌病虎紅抗原來源于哈爾濱生物制品有限責(zé)任公司?？谔阋逴型、亞洲1型二價滅活疫苗購自中農(nóng)威特生物科技股份有限公司。O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒和亞洲1型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。本地綿山羊（琥紅平板凝集試驗(RBPT)檢測陰性，符合口蹄疫疫苗注射要求），由山丹縣清泉鎮(zhèn)部分養(yǎng)羊場戶提供。

1.2 方法

1.2.1 實驗組 用投藥槍灌服布氏菌病活疫苗（S2株），山羊和綿羊不論大小一律1頭份，含活菌100億。同時肌肉注射口蹄疫O型、亞洲1型二價滅活疫苗，成年羊2ml/只，羔羊1ml/只。

1.2.2 對照組 本實驗設(shè)2個對照組，對照I組按計量投服布氏菌病活疫苗（S2株），對照II組按計量肌肉注射口蹄疫O型、亞洲1型二價滅活疫苗。

1.2.3 免疫效果及轉(zhuǎn)陰期觀察試驗 分別在免疫后 15、30、15、60、90 天采集學(xué)血清樣品進行琥紅平板凝集試驗(RBPT)和口蹄疫O型、亞洲1型抗體液相阻斷ELISA實驗。

1.3 結(jié)果判定

1.3.1 臨床安全性觀察 連續(xù)觀察60d，統(tǒng)計免疫反應(yīng)情況。

1.3.2 按照國家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T 18646-2002）規(guī)定方法【琥紅平板凝集試驗(RBPT)】判定布病陽性率；O型、亞洲1型口蹄疫免疫抗體滴度效價≥1:128時判定為抗體合格。

2 結(jié)果

2.1 布氏菌病活疫苗 （S2株）臨床安全性觀察實驗組，免疫后未出現(xiàn)任何過敏反應(yīng)等異常情況，副反應(yīng)率0；對照I組，免疫后未出現(xiàn)任何過敏反應(yīng)等異常情況，副反應(yīng)率0；對照II組，免疫后出現(xiàn)1例輕微精神沉郁，呼吸困難疫苗反應(yīng)，注射腎上腺素后痊愈，副反應(yīng)率為1.2%，詳見表1。

表1 疫苗副反應(yīng)觀察試驗結(jié)果統(tǒng)計

2.2 布氏菌病活疫苗（S2株）免疫效果觀察 實驗組，免疫后30、60、90天O型口蹄疫抗體合格率分別為94.2%、92.5%、85.8%，亞洲1型型口蹄疫抗體合格率分別為84.2%、82.5%、70.1%，布病血清學(xué)檢測陽性率分別為45.8%、7.5%和0；對照I組，布病血清學(xué)檢測陽性率分別為43.8、6.3%和0；對照II組，免疫后 30、60、90天O 型口蹄疫抗體合格率分別為95.2%、92.9%、86.9%，亞洲1型口蹄疫抗體合格率分別為82.1%、77.4%、71.4，見表2。

表2 免疫抗體合格率觀察試驗結(jié)果統(tǒng)計

3 討論

3.1 按使用說明書推薦劑量同時接種布氏菌病活疫苗（S2株）和口蹄疫O型、亞洲1型二價滅活疫苗，臨床試驗中無過敏反應(yīng)發(fā)生，符合大面積推廣應(yīng)用的條件。試驗中，口蹄疫注射組出現(xiàn)1例輕微過敏反應(yīng)，副反應(yīng)率為1.2%與平時免疫和相關(guān)報道相符，屬于正常現(xiàn)象。

3.2 實驗組O型、亞洲1型口蹄疫免疫抗體滴度合格率和消長規(guī)律與對照II組相差不大，與陳泳等人的報道相符。實驗結(jié)果表明接種口蹄疫疫苗后抗體水平在30天左右達到最高，60天后逐步降低，亞洲1型口蹄疫免疫抗體水平始終低于O型。

3.3 布病轉(zhuǎn)陽率檢測顯示，同時接種布氏菌病活疫苗（S2株）和口蹄疫O型、亞洲1型二價滅活疫苗，對布病抗體轉(zhuǎn)陽率及消長規(guī)律無影響。

3.4 羊只保定是免疫中最費時費力的一項工作，布病和口蹄疫分開免疫所需時間長，物資消耗量大，勞動強度大，容易引發(fā)養(yǎng)殖戶和防疫員的逆反和抵觸，對工作不力。本研究通過一次保定接種兩種疫苗提供依據(jù)，大大降低了勞動強度，節(jié)約了防控成本。