黃丹 張彬 蘇建蓉（綿陽市中心醫(yī)院檢驗科 四川 綿陽 621000）

有核紅細胞（nucleated red blood cell，NRBC）一般僅存在于骨髓中，成年人外周血中無NRBC，在出生1周內(nèi)的新生兒外周血中可見到少量的NRBC。外周血中出現(xiàn)有核紅細胞多為病理因素導致，如病理狀態(tài)下的溶血性貧血、急性大量失血、惡性腫瘤、骨髓纖維化癥等導致骨髓及髓外紅系細胞代償性極度活躍增生，超出細胞自身衰亡程度而釋放入外周血中，?？梢娡碛准t細胞及中幼紅細胞或更幼稚的紅細胞[1-2]。因此，外周血NRBC檢測的準確性與及時性對各類疾病的診斷與鑒別診斷具有重要的臨床意義。目前，計數(shù)NRBC的“金標準”[3]是對瑞氏染色血涂片在油鏡下進行分類，計數(shù)100個白細胞時所見到的NRBC數(shù)量，即NRBC在外周血中的百分率（NRBC%）。SYSMEX XN-9000全自動血液分析儀添加特殊Sysmex溶解試劑Lysercell WNR進行紅細胞溶解，NRBC將只剩下細胞核，然后加入Fluorocell WNR對白細胞（white blood cell, WBC）的核酸和細胞器及NRBC的細胞核進行熒光染色，通過鞘流式檢測系統(tǒng)測定前向散射光和側(cè)向熒光強度，依據(jù)細胞大小及熒光強度的差異可將NRBC與WBC區(qū)分開并計算有核紅細胞數(shù)（NRBC#）與有核紅細胞百分數(shù)（NRBC%）。本研究通過對儀器法檢測NRBC結(jié)果與人工顯微鏡鏡檢法計數(shù)結(jié)果進行比較，從而對SYSMEX XN-9000全自動血液分析儀WNR通道檢測外周血NRBC的可靠性進行評價。

1.資料與方法

1.1 標本來源

選取本院2018年1月到2018年6月SYSMEX XN-9000全自動血液分析儀檢測出NRBC＞0/100個WBC的標本共324例，其中男性165例，年齡0～90歲，女性159例，年齡0～77歲。隨機選取同時段儀器檢測出NRBC為0/100個WBC的標本共100例，其中男性54例，年齡0～81歲，女性46例，年齡0～83歲。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器：日本SYSMEX公司XN-9000全自動血液分析儀，日本SYSMEX公司SP-10全自動血涂片制備儀，日本OLYMPUS公司CX23普通光學顯微鏡。

1.2.2 試劑：日本SYSMEX公司XN-9000配套試劑，日本SYSMEX公司SP-10配套染液及玻片，日本OLYMPUS公司CX23配套鏡油，美國BD公司K2-EDTA真空采血管。

1.3 實驗方法

1.3.1 儀器法：嚴格按照標準操作規(guī)程上機檢測，記錄XN-9000全自動血液分析儀在WNR通道中所得NRBC百分率（NRBC%儀器）（/100個WBC）。

1.3.2 鏡檢法：嚴格按照標準操作規(guī)程上機推片，SP-10全自動血涂片制備儀自動進行涂片制作與染色。有核紅細胞計數(shù)由2名經(jīng)驗豐富的技師按全國臨床檢驗操作規(guī)程[4]進行顯微鏡鏡檢，分類計數(shù)200個WBC中NRBC數(shù)量，計算每100個WBC所見NRBC數(shù)，結(jié)果取平均值，即NRBC百分率（NRBC%鏡檢）（/100個WBC）。

1.4 統(tǒng)計學處理

應用SPSS19.0和MedCalc軟件進行統(tǒng)計學分析。采用Pearson相關(guān)分析評估儀器法和鏡檢法的相關(guān)性，采用Bland-Altman分析評估儀器法和鏡檢法的一致性。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果分析

2.1 儀器法與鏡檢法檢測NRBC的相關(guān)性分析

圖1 儀器法與鏡檢法的相關(guān)性分析

采用SPSS19.0軟件進行線性回歸分析（見圖1），得回歸方程：y=0.97x-0.8402，R2=0.9994＞0.995，且Pearson相關(guān)分析得，P＜0.001,說明儀器法與鏡檢法計數(shù)NRBC百分率的相關(guān)性良好。

2.2 儀器法與鏡檢法檢測NRBC的一致性分析

圖2 儀器法與鏡檢法的Bland-Altman散點圖

采用MedCalc軟件進行Bland-Altman分析（見圖2），得回歸方程：y=0.03014x+0.8642，儀器法與鏡檢法計數(shù)NRBC的結(jié)果差異的95%一致性界限為（1.98±9.76）個NRBC/100個WBC，僅有7例（2.16%）在一致性界限范圍外，說明儀器法與鏡檢法具有良好的一致性。

2.3 儀器法與鏡檢法檢測NRBC的結(jié)果比較

表1 儀器法與鏡檢法檢測NRBC的結(jié)果比較

由表1可知，對324例儀器法檢測NRBC陽性的標本進行人工鏡檢，其中320例為陽性，4例為陰性；對100例儀器法檢測NRBC陰性的標本進行人工鏡檢，其中99例為陰性，1例為陽性。以鏡檢法為金標準，XN-9000全自動血液分析儀檢測NRBC的靈敏度為99.7%，特異性為96.1%，假陽性率為3.9%，假陰性率為0.3%。

3.討論

外周血NRBC可出現(xiàn)于多種疾病中，其不僅與諸多疾病的診斷與預后有關(guān)[5]，還可影響WBC計數(shù)的準確性，從而干擾臨床診斷與治療[6-7]。本研究中324例NRBC陽性標本的儀器法與鏡檢法計數(shù)NRBC結(jié)果呈明顯正相關(guān)（R2=0.9994），與文獻報道[8]一致。且儀器法與鏡檢法兩組結(jié)果比較，P＜0.001，表明兩種方法計數(shù)NRBC結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義。采用Bland-Altman分析，可知儀器法與鏡檢法計數(shù)NRBC具有良好的一致性，因此，XN-9000全自動血液分析儀WNR通道檢測NRBC結(jié)果基本可替代鏡檢法檢測外周血NRBC。

本研究顯示，XN-9000全自動血液分析儀WNR通道檢出NRBC的靈敏度為99.7%，特異性為96.1%，假陽性率為3.9%，假陰性率為0.3%，其較高的靈敏度降低了NRBC的漏檢率，較高的特異性降低了NRBC的誤診率，從而保證檢測結(jié)果的準確性。

綜上，XN-9000全自動血液分析儀WNR通道檢測NRBC較傳統(tǒng)鏡檢法優(yōu)越，在保證結(jié)果準確性的同時，大大縮短了檢測時間，提高了工作效率，且儀器法的陰性符合率高達99%，在儀器正常工作前提下，若未出現(xiàn)相應的警示信息，基本可排除NRBC的存在。