李 龍， 劉鎖珠， 王宏輝， 張振倉

(1.楊凌職業(yè)技術學院動物工程分院，陜西楊凌 712100； 2.西藏農(nóng)牧學院動物科學學院，西藏林芝 860000

目前西藏養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展迅速，盡管西藏本地的藏雞能很好地適應高海拔缺氧環(huán)境[1]，但其生長仍緩慢，很難滿足當?shù)厝找嬖鲩L的禽肉需求量。因此，當?shù)仞B(yǎng)殖戶開始引進內(nèi)地生長速度更快的肉雞品種，但是這些引入品種不能很好地適應高海拔地區(qū)的缺氧環(huán)境，使肉雞在缺氧條件下表現(xiàn)出生產(chǎn)性能降低和死亡率高(特別是腹水死亡率)的特點[2]。如何有效地緩解缺氧對肉雞飼養(yǎng)的負面影響已成為當?shù)仞B(yǎng)殖戶重點關心的問題。

紅景天主要分布于歐亞的高海拔地區(qū)，在我國青藏高原廣泛分布。紅景天根莖中含有大量活性成分，如酚酸類、三萜類、黃酮類、類苯脂類和苯丙脂類，其中紅景天苷、羅塞維和酪醇被認為是紅景天中3種主要的活性成分[3-4]。紅景天因其抗缺氧[5]、抗氧化[6]、抗抑郁[7]、調(diào)節(jié)機體免疫機能[8]和增強機體適應性[9]等生理功能已在人類醫(yī)藥中廣泛應用。筆者所在課題組前期研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加紅景天對缺氧條件下肉雞生產(chǎn)性能無影響，但低劑量的紅景天粉(0.5%)能夠降低肉雞非腹水死亡率、提高肉雞的抗氧化能力和免疫力，而高劑量紅景天粉會減少肉雞的采食量從而降低肉雞的生產(chǎn)性能，并且紅景天粉對肉雞的腹水敏感性無顯著影響[1，10-11]，但結果并不能說明添加紅景天對肉雞腹水癥就沒有影響，因為中草藥成分復雜，藥效相對比較慢，且試驗中所添加紅景天粉的計量不高，可能會造成其中有效含量太少而沒有對肉雞生產(chǎn)性能和腹水癥產(chǎn)生顯著的影響。因此，本試驗在肉雞飼料中添加紅景天水提物，提高飼料中紅景天有效活性成分含量，進一步研究紅景天提取物對肉雞生產(chǎn)性能和腹水敏感性的影響。

1 材料與方法

1.1 紅景天水提物制備

紅景天，來自于西藏農(nóng)牧學院校內(nèi)人工種植，經(jīng)本校相關專家鑒定為大花紅景天。取紅景天干燥根部用蒸餾水清洗根部泥土，在陰涼處風干，用粉碎機將紅景天制成粉末，按質(zhì)量體積比為1 ∶5(W/V)加入蒸餾水，室溫放置24 h(冷滲法)以獲得紅景天水提物，將上層液體轉入另一容器中，殘渣重復上述操作4次。將所有紅景天水提物混合并用紗布過濾，8 000 r/min 離心2 min，取上清。上清利用旋轉蒸發(fā)儀進行干燥處理，結果顯示1 g大花紅景天根部可以生產(chǎn)約0.18 g紅景天水提物粉末。通過液相色譜檢測提取物中紅景天苷、絡塞維、酪醇的含量分別為25.21、10.44、0.03 mg/g。

1.2 試驗動物與試驗設計

采用單因素完全隨機試驗設計，選用1日齡AA雄性肉仔雞900羽(Ozkan等研究表明雄性肉仔雞的腹水敏感性高于雌性[12]，因此本試驗全部選用雄性肉仔雞以更好地建立肉雞腹水癥模型)，隨機分5個日糧處理組，每個處理6個重復，每個重復30羽，進行為期42 d的飼養(yǎng)試驗。試驗所用肉仔雞出雛當日從成都空運至西藏林芝。試驗期飼料全部使用商品肉雞全價配合飼料(購于新希望有限責任公司)。5種日糧分別是在基礎日糧中添加0(對照組，CK)、0.10%、0.15%、0.20%、0.40%的紅景天水提物干粉。

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗于2017年5—7月在西藏林芝西藏農(nóng)牧學院教學實習基地(海拔高度2 896 m)進行，所有雞只飼養(yǎng)在3層雞籠內(nèi)，每個處理6個雞籠，每個雞籠30羽雞。第1周育雛溫度約為35.5 ℃，后逐漸降低，3周后禽舍溫度控制在約 25 ℃。第1周24 h照明，從第2周起每天保持恒定光照時間(23 h照明，1 h熄燈)，自由采食和飲水，免疫和消毒按常規(guī)程序進行。

1.4 測定指標

1.4.1 生產(chǎn)性能 在試驗1、7、14、21、28、35、42 d時稱取各重復雞空腹體質(zhì)量，并記錄上述不同生長階段的耗料量，計算各組雞的平均日增質(zhì)量(ADG)、平均日采食量(ADFI)和飼料轉化率(FCR)。

1.4.2 死亡率 試驗期間每天記錄發(fā)病、死亡雞只，并對死雞逐個剖檢確定死因。如出現(xiàn)腹腔有淺黃色或黃色膠凍狀液體、心包積水、右心室肥大(右心指數(shù)>0.29)等癥狀判定為腹水死亡，未發(fā)現(xiàn)此類癥狀判定為非腹水死亡。

1.5 血液指標和心臟指數(shù)

在試驗期14、28、42 d清晨空腹每個重復隨機選2羽雞，稱質(zhì)量，后心臟采血屠宰。血液指標(紅細胞數(shù)RBC、血紅蛋白濃度HGB和紅細胞壓積HGT)利用全自動血液分析儀(XFA6000，普朗)測定。

屠宰雞完整取出心臟后，剪除附著的脂肪組織并清除心腔內(nèi)的血凝塊，右心指數(shù)(右心室質(zhì)量/總心室質(zhì)量)和心室指數(shù)(總心室質(zhì)量/100 g體質(zhì)量)按照Hassanpour等方法[13]進行稱量和計算。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

所有試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件的one-way ANOVA進行單因素方差分析，D’ancan法進行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性判斷標準，結果采用“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 紅景天提取物對肉雞生產(chǎn)性能的影響

飼料中添加紅景天提取物對肉仔雞生長性能的影響，由表1可知，0～14日齡時添加0.20%、0.40%紅景天提取物處理組相比于其他處理組顯著提高平均日增質(zhì)量(P<0.05)。在15～28日齡階段、29～42日齡階段和整個飼養(yǎng)期(0～42 d)時，添加0.20%、0.40%紅景天提取物處理組相比于其他處理組明顯提高了平均日增質(zhì)量(P<0.05)和平均日采食量，并且0.20%、0.40%紅景天提取物處理組顯著提高了 42 d 的肉雞體質(zhì)量(P<0.05)。但在整個飼養(yǎng)期，各處理組之間飼料轉化率無顯著差異。

表1 紅景天提取物對高原缺氧條件下肉雞生產(chǎn)性能的影響

注：數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示同列數(shù)據(jù)差異顯著(P<0.05)。下表同。

2.2 紅景天提取物對肉雞死亡率的影響

由圖1-A可知，相比于對照組和0.10%處理組，0.15%、0.20%、0.40%紅景天提取物處理組顯著降低肉雞非腹水死亡率(P<0.05)。由圖1-B可知，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組腹水死亡率相比于其他3個處理組顯著降低(P<0.05)。

2.3 紅景天提取物對肉雞心臟指數(shù)和血液指標的影響

由表2可知，在14、28 d時，相比于對照組，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組顯著提高了肉雞血液紅細胞數(shù)量、血紅蛋白濃度和紅細胞壓積(P<0.05)，而0.10%、0.15%紅景天提取物處理組與對照組各項測定指標均無顯著差異。在42 d時，相比于對照組，0.10%、0.15%、0.20%、0.40%紅景天提取物處理組均顯著提高了肉雞血液紅細胞數(shù)量、血紅蛋白濃度和紅細胞壓積(P<0.05)，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組相比于其他3個處理組顯著降低了右心指數(shù)(P<0.05)。

表2 紅景天提取物對高原缺氧條件下血液指標和心臟指數(shù)的影響

3 結論與討論

高原地區(qū)伴隨著氧分壓的降低和吸入氧氣的減少，氧分壓的降低會造成動物機體體質(zhì)量降低[14-15]。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，盡管飼喂營養(yǎng)成分滿足肉雞需要的商品飼料，對照組肉雞與NRC給出的雄性AA肉雞標準生產(chǎn)性能[16]仍表現(xiàn)出很大的差距，這與Li等的研究結果[2]一致。缺氧環(huán)境是造成機體體質(zhì)量降低的原因，這與食欲降低、營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收不良、腸道發(fā)育受阻、能量消耗增加和水分損失增加等因素有關[17-18]，其中營養(yǎng)物質(zhì)攝入的減少是主要因素[19]。本研究也同樣發(fā)現(xiàn)相比于NRC給出的AA肉雞標準采食量(3 717 g)，對照組的采食量明顯降低。相比于對照組，飼料中添加0.20%、0.40%紅景天提取物明顯提高了肉雞的生產(chǎn)性能，但0.10%、0.15%紅景天提取物對肉雞的生產(chǎn)性能無顯著影響。已有大量研究表明，紅景天能夠提高機體對應激環(huán)境(包括缺氧應激)的適應性， 而其中增加機體缺氧適應性的一個重要原因是紅景天能夠通過降低轉錄因子HIF-α降解，從而促進促紅細胞生成素表達，最終增加紅細胞的生成[20-21]。本研究同樣發(fā)現(xiàn)飼料中添加紅景天提取物能夠增加肉雞紅細胞數(shù)量和血紅蛋白濃度，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組明顯提高了14、28、42 d肉雞紅細胞數(shù)量和血紅蛋白濃度，提高了肉雞的缺氧耐受性，最終提高了肉雞的生產(chǎn)性能。0.10%、0.15%處理組只在42 d提高了肉雞紅細胞數(shù)量和血紅蛋白濃度，但可能由于這2個紅景天提取物處理下飼料中活性成分過低，發(fā)揮作用過慢，從而對肉雞的生產(chǎn)性能無顯著影響。

肉雞育種造成心肺功能發(fā)育過緩遺傳缺陷，使肉雞易受缺氧的影響，而高原地區(qū)肉雞的飼養(yǎng)容易引起腹水癥的發(fā)生[22]，因此本研究將肉雞的死亡率分為腹水死亡和非腹水死亡。本研究發(fā)現(xiàn)0.20%、0.40%紅景天提取物處理組明顯降低了肉雞非腹水死亡率的發(fā)生，這可能與紅景天提取物能夠提高機體抗缺氧能力有關。已有研究表明，紅景天提取物能夠通過增加紅細胞生成和抗氧化等功能提高機體的缺氧耐受力。同時本研究還發(fā)現(xiàn)0.15%、0.20%、0.40%紅景天提取物處理組明顯降低了肉雞非腹水死亡率的發(fā)生，這可能與紅景天提取物能夠提高機體免疫機能有關。0.15%紅景天提取物組降低了非腹水死亡率但對腹水死亡率無顯著影響，這說明紅景天提取物對肉雞不同生理機能的影響存在計量特異性。紅景天提取物成分復雜，目前從紅景天提取物中已分離出超過100種的化合物，并且功能多樣[23]，但究竟是哪種化合物在本試驗中發(fā)揮主要的生理功能尚不清楚，有待進一步的研究。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加紅景天提取物能夠提高高原缺氧環(huán)境下肉雞的生產(chǎn)性能，降低死亡率和腹水敏感性，但存在劑量依賴性，以0.2%添加效果為最佳。