■ 單保黨、胡壯濤、蔡娟、丁玉龍、黎秋云

(廣州金水動(dòng)物保健品有限公司，廣州 510510 )

南美白對(duì)蝦（Penaenus vannamei）屬于節(jié)肢動(dòng)物門（Arthropoda）、甲殼綱（crustacean）、十足目（decapod）、對(duì)蝦屬（shrimp genus）白對(duì)蝦（White shrimp），也有人叫做凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus）、白肢蝦（White-lag shrimp）。它與斑節(jié)對(duì)蝦、中國(guó)對(duì)蝦并列稱為世界產(chǎn)量最高的三大對(duì)蝦。南美白對(duì)蝦因其肉質(zhì)鮮嫩、生長(zhǎng)迅速、產(chǎn)量高、抗病力強(qiáng)而逐漸成為我國(guó)沿海主要養(yǎng)殖品種之一，且深受廣大人們?nèi)罕姷南矏?。目前?guó)內(nèi)對(duì)蝦養(yǎng)殖現(xiàn)狀是種蝦差、種苗差、養(yǎng)殖過程病害多、輪作障礙等。種苗的重要性不言而喻。如何培養(yǎng)出培養(yǎng)出一批抗病性強(qiáng)，耐低氧能力強(qiáng)，生長(zhǎng)速度快的蝦苗？嚴(yán)格的親蝦選育技術(shù)及優(yōu)良的育苗技術(shù)是培育優(yōu)良蝦苗的關(guān)鍵。耐低氧能力是評(píng)價(jià)蝦苗好壞的指標(biāo)之一，而蝦苗耗氧率、窒息點(diǎn)的高低均能反映耐低氧能力強(qiáng)弱。目前國(guó)內(nèi)外耗氧率、窒息點(diǎn)等相關(guān)研究主要集中在溫度、鹽度、pH、規(guī)格、晝夜變化等，研究對(duì)象主要集中在貝類、魚類有斑點(diǎn)叉尾鮰魚苗、鯔幼魚、刀鱭幼魚、長(zhǎng)鰭籃子魚幼魚、布氏鯛幼魚、羅非魚等；蝦類主要有日本對(duì)蝦、羅氏沼蝦、中國(guó)明對(duì)蝦、南美白對(duì)蝦等。而不同品系間的南美白對(duì)蝦仔蝦耗氧率、窒息點(diǎn)的相關(guān)研究較少。本試驗(yàn)以利洋1號(hào)和利洋2號(hào)南美白對(duì)蝦仔蝦為研究對(duì)象，研究其瞬時(shí)耗氧速率、瞬時(shí)耗氧量、窒息點(diǎn)、窒息臨界點(diǎn)以及昏迷臨界點(diǎn)等耐低氧指標(biāo)，以期為選育耐低氧品系南美白對(duì)蝦種苗及育苗工作提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)對(duì)象與條件

試驗(yàn)用南美白對(duì)蝦來(lái)自于利洋1號(hào)和利洋2號(hào)兩個(gè)品系p7-p8與p12-p13階段的仔蝦，試驗(yàn)用水經(jīng)過化學(xué)試劑消毒、曝氣、沙濾、沉淀、陶氏過濾器設(shè)備處理，二次消毒后使用。選取正常發(fā)育的仔蝦暫養(yǎng)幾小時(shí)后開始試驗(yàn)。試驗(yàn)中定期使用Hach溶氧儀監(jiān)測(cè)溶解氧，試驗(yàn)3次重復(fù)，結(jié)果取平均值。試驗(yàn)水溫27.0±0.5℃，水體20L。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)過程中仔細(xì)觀察蝦苗的活動(dòng)狀況，按時(shí)抽取水樣進(jìn)行測(cè)定，定時(shí)記錄水體的溶解氧，當(dāng)?shù)谝恢晃r昏迷作為昏迷臨界值（Coma Threshold-CT），當(dāng)?shù)谝恢晃r死亡時(shí)作為窒息臨界值（Suffocating Threshold-ST），50%蝦死亡時(shí)水體的含氧量作為窒息點(diǎn)（Suffocating point-Sp,mg/L）。當(dāng)蝦苗靜臥瓶底，僅附肢和尾部間歇運(yùn)動(dòng)即視為處于昏迷狀態(tài)，當(dāng)觸碰無(wú)反應(yīng)時(shí),則視為窒息死亡。定期測(cè)觀察仔蝦并且判斷仔蝦存活狀況，并定時(shí)記錄水體溶解氧以及時(shí)間。記錄對(duì)應(yīng)的昏迷臨界值，窒息臨界點(diǎn)和窒息點(diǎn)。按照以上公式換算出瞬時(shí)耗氧量，以及瞬時(shí)耗氧率。最后擬合瞬時(shí)耗氧率和時(shí)間的曲線，瞬時(shí)耗氧量和瞬時(shí)耗氧率的關(guān)系曲線，以及瞬時(shí)耗氧率和溶解氧的關(guān)系曲線。

1.3 試驗(yàn)公式

試驗(yàn)結(jié)束后用濾紙吸干仔蝦體表水分，進(jìn)行稱重以及量體長(zhǎng)，耗氧量H按下面公式計(jì)算：

H=（C1-C0）/（t*n）★1000★V, 單位（mg/h·尾）

式中C1是結(jié)束時(shí)溶解氧（mg/L），C0是初始溶解氧（mg/L），t為期間溶解氧變化所需時(shí)間（h），n為一個(gè)玻璃瓶中蝦的數(shù)量（尾），V為玻璃瓶容量單位L。

耗氧率v=H / w, 單位（mg/h·g），式中w為每尾蝦平均重量（g）。

2 結(jié)果與討論

2.1 利洋仔蝦瞬時(shí)耗氧速率與時(shí)間（t）的關(guān)系

利洋1號(hào)瞬時(shí)耗氧率與時(shí)間的關(guān)系結(jié)果見圖1圖2，由圖1-圖2可知，利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦瞬時(shí)耗氧率隨著時(shí)間的增加呈指數(shù)下降。擬合方程分別是：v1= 0.27524exp（-0.1761t）+0.03862, R2=0.9834和v2=0.031+0.277exp（-0.151t）, R2=0.98017。

2.2 利洋仔蝦瞬時(shí)耗氧率與瞬時(shí)耗氧量的關(guān)系

利洋1號(hào)瞬時(shí)耗氧量與瞬時(shí)耗氧率的關(guān)系結(jié)果見圖3圖4，由圖3～圖4可知，利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦瞬時(shí)耗氧量和瞬時(shí)耗氧率呈顯著正比關(guān)系（p＜0.001）。利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦平均耗氧率分別為0.169mg/h·g和0.163mg/h·g。以及平均耗氧量為 0.00520mg /h·尾和0.00280mg/h·尾。

2.3 利洋仔蝦瞬時(shí)耗氧率與溶解氧（DO）的關(guān)系

利洋1號(hào)p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關(guān)系結(jié)果見圖5圖6。由圖5～圖6可知，仔蝦耗氧率和溶氧的方程分別為v1= 0.0415x+0.0603, R2=0.9024和v2=0.0379x+0.0807, R2=0.8296。p12-p13階段利洋仔蝦的耗氧率隨溶解氧含量降低而降低，屬于順應(yīng)型呼吸類型。Fry等人認(rèn)為順應(yīng)型呼吸型是溶氧越低瞬時(shí)耗氧率越低。張磊磊發(fā)現(xiàn)太湖一號(hào)和日本對(duì)蝦雜交仔蝦屬于順應(yīng)型呼吸。崔瑩等測(cè)定的南美白對(duì)蝦（3.14～3.27cm）瞬時(shí)耗氧率與溶解氧成反比，不屬于順應(yīng)型呼吸型。以上研究說(shuō)明，同一物種的不同試驗(yàn)階段，瞬時(shí)耗氧率與溶氧的變化情況不同。順應(yīng)型呼吸可能是仔蝦對(duì)低氧的一種適應(yīng)，即通過減少瞬時(shí)的耗氧率來(lái)阻止進(jìn)一步的氧氣的減少的一種環(huán)境突變的適應(yīng)策略。

圖1 利洋1號(hào)瞬時(shí)耗氧率與時(shí)間的關(guān)系

圖2 利洋2號(hào)瞬時(shí)耗氧率與時(shí)間的關(guān)系

圖3 利洋1號(hào)瞬時(shí)耗氧量與瞬時(shí)耗氧率的關(guān)系

圖4 利洋2號(hào)瞬時(shí)耗氧量和瞬時(shí)耗氧率的關(guān)系

圖5 利洋1號(hào)p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關(guān)系

圖6 利洋2號(hào)p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關(guān)系

2.4 仔蝦的昏迷臨界點(diǎn)、窒息臨界點(diǎn)與窒息點(diǎn)的差異

利洋1號(hào)與利洋2號(hào)p7-p8階段仔蝦的昏迷臨界點(diǎn)（CT）、窒息臨界點(diǎn)（SP）以及窒息點(diǎn)（SP）結(jié)果見表1。由表1可知在p7-p8階段，大約經(jīng)過6h左右，利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦第一尾仔蝦昏迷時(shí)靜伏水底?；杳渣c(diǎn)分別是1.43mg/L和1.40mg/L。接著過了大概0.5h至2h第一尾蝦開始死亡，此時(shí)窒息臨界點(diǎn)分別為1.28mg/L和1.03mg/L。在7～8h后，水體溶氧分別達(dá)到0.58mg/L和0.48mg/L時(shí)半數(shù)蝦死亡達(dá)到窒息點(diǎn)。利洋1號(hào)比利洋2號(hào)窒息點(diǎn)高，利洋2號(hào)更耐低氧。

利洋1號(hào)與利洋2號(hào)p12-p13階段仔蝦的昏迷臨界點(diǎn)（CT）、窒息臨界點(diǎn)（SP）以及窒息點(diǎn)（SP）結(jié)果見表2。由表2可知在p12-p13階段，利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦經(jīng)過6時(shí)30分左右仔蝦開始靜伏水底開始昏迷，昏迷點(diǎn)分別是1.5mg/L和1.65 mg/L。約7h后，兩品系仔蝦窒息點(diǎn)分別為0.795mg/L和0.695mg/L。利洋1號(hào)窒息點(diǎn)比利洋2號(hào)窒息點(diǎn)高，表明利洋2號(hào)更耐低氧。

3 討論與分析

3.1 利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦耗氧量、耗氧率、昏迷點(diǎn)及窒息點(diǎn)差異分析

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦瞬時(shí)耗氧量和瞬時(shí)耗氧率呈顯著正比關(guān)系（p＜0.001）。窒息點(diǎn)的高低與耗氧率（耗氧量）有正相關(guān)性，即高耗氧率（高耗氧量）導(dǎo)致仔蝦窒息點(diǎn)高，低耗氧率（低耗氧量）導(dǎo)致仔蝦窒息點(diǎn)低。利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦由昏迷點(diǎn)達(dá)到窒息點(diǎn)的時(shí)間約7～8h。

研究還發(fā)現(xiàn)利洋2號(hào)仔蝦（p12-p13階段）平均耗氧率、平均耗氧量均低于利洋1號(hào)平均耗氧率、平均耗氧量。利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦（p12-p13階段）平均耗氧率分別為0.169 mg/h·g和0.163mg/h·g；平均耗氧量分別為0.00520 mg/h·尾和0.00285 mg/h·尾。表明了利洋2號(hào)仔蝦耐低氧能力強(qiáng)于1號(hào)仔蝦耐低氧能力。

較高的平均耗氧率意味著會(huì)加速消耗水體溶氧，耗氧量增大，導(dǎo)致達(dá)到窒息點(diǎn)的時(shí)間相對(duì)于低的耗氧率要更快，即不耐低氧。為何不良水體環(huán)境如溫度不適、鹽度不適、pH不當(dāng)、水體有機(jī)質(zhì)濃度過高等，均能加速到達(dá)窒息點(diǎn)而死亡？因?yàn)椴涣辑h(huán)境導(dǎo)致高的耗氧率，而高的耗氧率導(dǎo)致蝦苗應(yīng)激增大，其活動(dòng)增加，有更多的能量消耗，其新陳代謝加快，水體溶解氧量快速變少，若氧氣不足容易蝦缺氧死亡。同時(shí)新陳代謝加快還會(huì)使得排泄物增多，水質(zhì)變差會(huì)更快，產(chǎn)生惡性循環(huán)。反之，低的耗氧率意味著更耐低氧。

表1 利洋1號(hào)與利洋2號(hào)p7-p8階段仔蝦的昏迷臨界點(diǎn)(CT)、窒息臨界點(diǎn)(ST)以及窒息點(diǎn)(SP)

3.2 利洋仔蝦在不同發(fā)育階段昏迷點(diǎn)、窒息點(diǎn)及安全溶氧濃度差異分析

研究發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育階段其窒息點(diǎn)存在差異，p7-p8階段利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦，昏迷點(diǎn)分別是1.43mg/L和1.40mg/L。而在p12-p13階段，利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦昏迷點(diǎn)分別為1.50 mg/L和1.65mg/L。較早發(fā)育階段的仔蝦（p7-p8階段）耐低氧能力高于較晚發(fā)育階段的仔蝦（p12-p13階段）耐低氧能力，其規(guī)格越大耐低氧能力越低，這與陳琴研究南美白對(duì)蝦研究結(jié)果一致。利洋1號(hào)在p7-p8階段仔蝦的安全溶氧濃度大于1.43 mg/L，利洋2號(hào)p7-p8階段仔蝦的安全溶氧濃度大于1.40 mg/L。在p12-p13階段仔蝦，利洋1號(hào)的安全濃度大于1.5mg/L，利洋2號(hào)大于1.65mg/L。顯然只要溶氧不低于1.65mg/L利洋兩種品系仔蝦均處于安全狀態(tài)。

表2 利洋1號(hào)與利洋2號(hào)p12-p13階段仔蝦的昏迷臨界點(diǎn)（CT）、窒息臨界點(diǎn)(ST)以及窒息點(diǎn)(SP)

3.3 利洋仔蝦和已報(bào)道南美白對(duì)蝦仔蝦耗氧率、窒息點(diǎn)的差異分析

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)利洋1號(hào)和利洋2號(hào)仔蝦都屬于順應(yīng)型呼吸類型，即溶氧量越低耗氧率越低。利洋仔蝦具有耐低氧能力強(qiáng)，可能是它對(duì)某種不良環(huán)境變化的一種適應(yīng)，即減少自身耗氧量以及耗氧率來(lái)應(yīng)對(duì)水體缺氧環(huán)境。利洋1號(hào)p12-p13階段仔蝦的窒息點(diǎn)為0.795mg/L，利洋2號(hào)在該階段仔蝦的窒息點(diǎn)為0.695mg/L，均低于陳琴已報(bào)道值（南美白對(duì)蝦p12-p13階段仔蝦的窒息點(diǎn)為0.947mg/L）。對(duì)比發(fā)現(xiàn)利洋1號(hào)和利洋2號(hào)苗屬于低耗氧品系，具有較強(qiáng)耐低氧能力。

3.4 利洋蝦苗特色

首先，利洋種蝦是一代種蝦。在此基礎(chǔ)上經(jīng)過長(zhǎng)期的人工育種及基因選育技術(shù)的篩選，蝦苗的生長(zhǎng)速度快、抗病能力強(qiáng)、耐低氧能力強(qiáng)。其次管理體系嚴(yán)格，如，利洋的親蝦幼體均經(jīng)過PCR技術(shù)進(jìn)行包括WSSV、BPV、IHHNV、TSV、HPV、YHV的病毒檢測(cè)。及對(duì)蝦苗的全程質(zhì)量監(jiān)督，每一批蝦苗經(jīng)過層層檢測(cè)合格后方可出苗。最后利洋育苗技術(shù)的成熟，全程使用天然餌料，合理飼喂?fàn)I養(yǎng)全面的多種植物性活餌以及動(dòng)物活餌，蝦苗胃腸飽滿，富含脂肪滴，身體健壯，抗應(yīng)激能力強(qiáng)。尤其是利洋在國(guó)內(nèi)首創(chuàng)的生態(tài)育苗體系，整個(gè)育苗過程不使用抗生素，確保優(yōu)質(zhì)蝦苗?？傊笠哉_的養(yǎng)殖理念為前提，始終堅(jiān)持以優(yōu)秀的種蝦為戰(zhàn)略制高點(diǎn)、加之以嚴(yán)格的管理體系、以及先進(jìn)的育苗技術(shù)為支撐。才得以保證每一批的蝦苗質(zhì)量?jī)?yōu)秀，最終幫助養(yǎng)殖戶養(yǎng)成高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、養(yǎng)殖周期短的大規(guī)格蝦，實(shí)現(xiàn)雙贏的局面。（參考文獻(xiàn)略）