史新原,馬 雷,李紹民
(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154000)
1.1一般資料:選取2017年2月~2017年8月在我院就診的慢性HBV感染者(HBsAg和HBV-PCR檢測陽性,且超過半年[3],近半年來未接受抗病毒治療;排除合并HAV、HCV、HDV、HEV、EBV、CMV感染者,排除合并脂肪肝、藥物肝及肝癌患者)76例作為研究對象,其中肝功能正常高病毒載量組8例,肝功能異常高病毒載量組26例,肝功能正常低病毒載量組26例,肝功能異常低病毒載量組16例。76例患者年齡22~61歲,平均(43.55±9.46)歲,其中男50例,女26例。肝功能情況以丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、膽堿酯酶(ChE)三個指標(biāo)界定。高病毒載量:HBsAg陽性,HBV-DNA 20×103;HBsAg陰性,HBV-DNA 2×103。低病毒載量:HBsAg陽性,HBV-DNA<20×103;HBsAg陰性,HBV-DNA<2×103。同時選取21例年齡相匹配的健康體檢者(無肝病病史,無肝病癥狀及體征,病毒性肝炎血清標(biāo)志物陰性、生化學(xué)指標(biāo)正常)作健康對照組。
1.3所用儀器及試劑:雅培ARCHITECH I2000SR生化分析儀,BECKMAN COULTER Au5800生化檢測儀,BD FACSCantoTMⅡ流式細(xì)胞儀,Scientific Industries Vortex Genie 2T漩渦震蕩儀, LC-4012低速離心機(jī)。流式抗體、對照抗體及紅細(xì)胞裂解液購自 BD公司。
1.4試驗(yàn)方法:肝功能及HBV-DNA檢測由我院檢驗(yàn)科完成。T細(xì)胞亞群的檢測:取兩支試管,標(biāo)記為Ⅰ、Ⅱ。兩管均加入100 μl抗凝全血,Ⅰ管加入20 μl熒光標(biāo)記抗體,Ⅱ管加入等量對照抗體,在漩渦震蕩儀上震蕩10 s,室溫避光孵育15 min;兩管均加入1 ml經(jīng)10倍稀釋配比的紅細(xì)胞裂解液,同法震蕩10 s,室溫避光裂解15 min;兩管均添加鞘液2 ml,低速離心機(jī)(設(shè)定1 200 r/min)離心5 min,取出兩管,一次性傾倒上清液,在吸水紙上蘸干管口殘液;添加500 ul鞘液,同法震蕩10 s,上流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。
1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:流式數(shù)據(jù)應(yīng)用BD FACSDiva Software分析。最終數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS19.0分析,檢驗(yàn)各組的正態(tài)性,兩組間比較應(yīng)用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多組間比較先進(jìn)行單因素方差分析,而后應(yīng)用q檢驗(yàn)(方差不齊時應(yīng)用校正方法)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1各組受檢者資料分布:見表1。
表1各組受檢者資料
組別例數(shù)性別男(例) 女(例)年齡(x±s,歲)肝功正常高病毒載量組84447.63±4.47肝功異常高病毒載量組2618842.08±1.01肝功正常低病毒載量組26161044.12±9.23肝功異常低病毒載量組1612443.00±1.07健康對照組21101146.10±9.71
組別例數(shù)CXCR5+CD+8T慢性HBV感染組762.24±0.66①健康對照組210.41±0.12
注:與健康對照組相比,①P<0.05
組別例數(shù)CXCR5+CD+8T肝功能正常感染組342.77±0.45①②肝功能異常感染組421.82±0.48①健康對照組210.41±0.12
注:與健康對照組相比,①P<0.05;與肝功能異常感染組相比,②P<0.05
組別例數(shù)CXCR5+CD+8T低病毒載量組422.75±0.39①②高病毒載量組341.63±0.31①健康對照組210.41±0.12
注:與健康對照組相比,①P<0.05;與高病毒載量組相比,②P<0.05
組別例數(shù)CXCR5+CD+8T肝功正常高病毒載量組82.08±0.22①②③肝功異常高病毒載量組261.49±0.17①③④肝功正常低病毒載量組262.98±0.24①④肝功異常低病毒載量組162.36±0.26①健康對照組210.41±0.12
注:與健康對照組相比,①P<0.05;與肝功異常高病毒載量組相比,②P<0.05;與肝功正常低病毒載量組相比,③P<0.05,iP<0.05;與肝功異常低病毒載量組相比,④P<0.05