張明勛

（山東省菏澤市立醫(yī)院輸血科，山東 菏澤 274000）

通常情況下，臨床輸血之前均要開展交叉配血試驗(yàn)，以此來了解患者血液和所輸入的血液是否相合[1]。進(jìn)行輸血操作之前，必須確保能夠?qū)gM（完全抗體）和IgG（不完全抗體）同時(shí)檢測出來，以此來避免溶血性輸血反應(yīng)出現(xiàn)。我國存在有多種多樣的配血方法，包括抗人球蛋白法、聚凝胺法、微柱凝膠法等，雖然抗人球蛋白法具有較高的可靠性與準(zhǔn)確性，但是操作需要耗費(fèi)較長時(shí)間，較為繁瑣，雖然臨床上將其作為金標(biāo)準(zhǔn)，但是卻難以將其在臨床上進(jìn)行常規(guī)應(yīng)用[2-4]。近年來，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，微柱凝膠法已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于臨床輸血中，微柱凝膠法和聚凝胺法均存在有各自的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)[5-6]。在臨床輸血中靈活性的聯(lián)合應(yīng)用這兩種檢測方式，能夠有效避免交叉配血過程中出現(xiàn)假陽性與假陰性結(jié)果[7]。本研究特地選取我院2013年1月至2017年8月進(jìn)行交叉配血的200例患者為研究對象，交叉配血過程中分別應(yīng)用微柱凝膠法和聚凝胺法，并對其臨床應(yīng)用效果進(jìn)行了對比探究，總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：200例存在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性血管炎、自身免疫性溶血性貧血等自身免疫性疾病或者需要進(jìn)行反復(fù)、大量輸血的患者于2013年1月至2017年8月在我院交叉輸血，患者平均年齡（22.58±5.12）歲，男性150例，女性50例，其中一共有20例不合格輸血標(biāo)本。

1.2 試劑與儀器：孵育器（瑞士達(dá)亞美公司提供）、專用離心機(jī)（瑞士達(dá)亞美公司提供）、低離子溶液（瑞士達(dá)亞美公司提供）、聚凝胺試劑（珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供）、離心機(jī)（臺灣貝索公司提供）、Liss/Coombs（微柱凝膠交叉配血卡，瑞士達(dá)亞美公司提供）、篩查紅細(xì)胞由（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供）。

1.3 方法：所有檢測系統(tǒng)均進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測，確定其在控之后，將實(shí)際說明書的操作規(guī)程作為依據(jù)，然后再嚴(yán)格開展相關(guān)操作，分別采用微柱凝膠法和聚凝胺法對每例臨床配血標(biāo)本進(jìn)行交叉配血實(shí)驗(yàn)，除此之外，還要對每例標(biāo)本做抗體篩查實(shí)驗(yàn)。

微柱凝膠法：依次標(biāo)號微柱凝膠試劑卡的6個(gè)凝膠微管，然后再1～4號管中分別加入患者0.5%的紅細(xì)胞懸液，將供血者的血清分別加入5、6號凝膠微管中，采用離心機(jī)對其進(jìn)行5 min離心處理，對結(jié)果進(jìn)性觀察，凝膠以上為陽性，沉積在底部誒陰性。

聚凝胺法：取患者0.5 mL血清，將1滴供血者3%紅細(xì)胞懸液加入，在室溫狀態(tài)下進(jìn)行1 min靜置之后，將聚凝胺試劑2滴滴入，均勻混合之后保持15 s靜置，進(jìn)行10 s離心處理，將上清液去除，對標(biāo)本出現(xiàn)的紅細(xì)胞聚合反應(yīng)進(jìn)行仔細(xì)觀察，了解其是否有聚集現(xiàn)象出現(xiàn)，如有出現(xiàn)，則要繼續(xù)做1次，將懸浮液加入，均勻混合之后，如果由聚凝胺引發(fā)非免疫性聚集反應(yīng)，那么便會(huì)在1 min之內(nèi)散開，在顯微鏡下觀察凝集反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)納入SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，（%）示計(jì)數(shù)資料，行卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異明顯。

2 結(jié) 果

2.1 兩種方式測定結(jié)果對比：我院收集的200例血液標(biāo)本中，一共有20例不合格標(biāo)本，采用微柱凝膠法對其進(jìn)行檢測后，檢測出陽性標(biāo)本12例，陽性率為75%，采用聚凝胺法一共檢測出10例假陽性標(biāo)本，假陽性率為62.50%，通過對比分析可知，微柱凝膠假陽性率為75.00%，相較于聚凝胺法的62.5%略微高，但差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，見表1。

表1 兩種方式測定結(jié)果對比

2.2 不合格交叉配血標(biāo)本假陽性結(jié)果分析：微柱凝膠法與聚凝胺法假陽性結(jié)果出現(xiàn)的主要影響因素包括纖維蛋白、血液病、腫瘤、冷凝集素、自身免疫病、球蛋白異常等，其中自身免疫病的構(gòu)成比最高，見表2。

表2 不合格交叉配血標(biāo)本假陽性結(jié)果分析[n（%）]

3 討 論

聚凝胺溶解之后能夠產(chǎn)生眾多正電荷，屬于高價(jià)陽離子季胺鹽多聚物的一種，能夠促使紅細(xì)胞表面負(fù)電荷得到有效中和，減少紅細(xì)胞之間存在的間距，促使正常紅細(xì)胞出現(xiàn)非特異性凝聚現(xiàn)象，并且該現(xiàn)象存在有一定的可逆性，在出現(xiàn)抗體致敏紅細(xì)胞的情況下，則會(huì)被聚凝胺所凝集[9-10]。一般而言，如果單從外表上對凝集和凝聚進(jìn)行區(qū)分，則存在有較大難度，但是如果將假凝集清除液（含枸椽酸鈉）加入，那么聚凝胺上的正電荷和椽枸酸根的負(fù)電荷能夠進(jìn)行有效中和，重懸之后，這種凝聚現(xiàn)象便會(huì)完全消失，但是特異性抗體和抗原結(jié)合產(chǎn)生的凝集則不會(huì)消失[11-13]。我國在交叉配血中通常會(huì)采用聚凝胺法，究其原因，這主要是因?yàn)殡m然聚凝胺對Kell系統(tǒng)不具備高度敏感性，但是對Rh系統(tǒng)具有較高敏感性，我國最常見的溶血性輸血反應(yīng)為Rh系統(tǒng)所引發(fā)的遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)。我國人們基本上屬于K抗原陰性，所以在免疫之后不會(huì)有抗K產(chǎn)生[14-17]。

微柱凝膠法則是一種以免疫化學(xué)抗原抗體特異反應(yīng)、離心技術(shù)、生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)為基礎(chǔ)的監(jiān)測方式，紅細(xì)胞在血型抗原抗體進(jìn)行特異性結(jié)合之后，便會(huì)有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，對其進(jìn)行離心處理時(shí)，凝集塊便難以從凝膠間隙通過，在凝膠上層殘留，沒有結(jié)合的紅細(xì)胞則能夠從凝膠間隙通過，在管尖底部沉積，主要表現(xiàn)為陰性反應(yīng)[18-20]。

研究顯示，相較于聚凝胺法，微柱凝膠法的靈敏度更高，本研究通過分析得知，微柱凝膠假陽性率為75.00%，相較于聚凝胺法的62.5%略微高，但差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，本研究結(jié)果和以上研究結(jié)果具有高度相似性。一般情況下，交叉配血試驗(yàn)有著較高的靈敏度要求，微柱凝膠法屬于最好的檢測方式，醫(yī)院在有條件的情況下，可以在交叉配血中應(yīng)用該檢測方式，但是該檢測方式還不能將聚凝胺法完全取代。本研究通過分析得知，兩種檢測方式的陽性率對比，差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，單獨(dú)討論檢驗(yàn)技術(shù)而言，相較于微柱凝膠法，聚凝胺法能夠更加快捷的將假凝集排除，如果沒有將纖維蛋白原的血清標(biāo)本完全除去，在凝膠中便會(huì)有纖維蛋白形成，對紅細(xì)胞沉降進(jìn)行阻礙，進(jìn)而促使其在表面或者膠中漂浮，采用微柱凝膠法只能將凝集現(xiàn)象觀察到，需要對血標(biāo)本進(jìn)行重新離心處理之后進(jìn)行反復(fù)性實(shí)驗(yàn)。而聚凝胺法則能夠在玻片上放置試管中反應(yīng)物，在鏡下對其進(jìn)行檢查，將形態(tài)學(xué)作為依據(jù)，對假凝集現(xiàn)象進(jìn)行鑒別。在血漿蛋白出現(xiàn)異常的情況俠，采用兩種檢測方式進(jìn)行檢測時(shí)，均會(huì)有主側(cè)凝集現(xiàn)象出現(xiàn)。采用微柱凝膠法，并且將自身作為對照之后，只能懷疑有蛋白異?，F(xiàn)象出現(xiàn)，而采用聚凝胺法之后，可以直接和顯微鏡進(jìn)行聯(lián)合，以此來對緡錢狀凝集進(jìn)行觀察。受到冷凝集素干擾的情況下，采用聚凝胺法能夠在水浴箱內(nèi)進(jìn)行操作，將干擾排除，而采用微柱凝膠法時(shí)，則需要先對RBC進(jìn)行洗滌，然后才能重新對其進(jìn)行交叉配血處理。采用聚凝胺法時(shí)，在10 min之內(nèi)便能夠完成整個(gè)交叉配血過程，而采用微柱凝膠法進(jìn)行交叉配血操作時(shí)，則需要花費(fèi)30 min，所以醫(yī)院在進(jìn)行急診配血操作時(shí)，通常會(huì)選擇采用聚凝胺法，但是這種檢測方式對操作人員的技術(shù)水平具有較高要求。微柱凝膠法則不需要進(jìn)行洗滌，操作十分簡單，不需要確證試驗(yàn)陰性結(jié)果，在批量檢測中可以對其進(jìn)行廣泛應(yīng)用，并且能夠獲得清晰的檢測結(jié)果，具有較強(qiáng)的可重復(fù)性，標(biāo)本用量較少，能在較長一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行保存，具有信息化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化等諸多優(yōu)點(diǎn)。

綜上所述，為了將交叉配血效率與準(zhǔn)確度提高，可以聯(lián)合應(yīng)用微柱凝膠法與聚凝胺法，以此來為臨床快速提供安全血液。