， ， ， ， ， ，

(1.河南科技學(xué)院， 河南 新鄉(xiāng) 453003； 2.現(xiàn)代生物育種河南省協(xié)同創(chuàng)新中心， 河南 新鄉(xiāng) 453003)

黃頂菊[Flaveriabidentis(L.)Kuntze]為菊科堆心菊族黃菊屬一年生雜草，原產(chǎn)于南美洲，冠有“生態(tài)殺手”之名，對植被地有極大的破壞性。具有適應(yīng)能力強、生長速度快、根系發(fā)達(dá)、種子量大、繁殖力強、分泌化感物質(zhì)等特點[1-3]。2001年在衡水湖畔首次發(fā)現(xiàn)，近年來在河北邯鄲、邢臺、衡水、滄州、石家莊、保定等地以及天津市不同程度發(fā)生，呈現(xiàn)出以河北省中南部為中心向周邊其他省市擴散的趨勢[4-6]。2009年6月，許桂芳等[7]首次在河南新鄉(xiāng)學(xué)院附近發(fā)現(xiàn)黃頂菊幼苗，并呈現(xiàn)出迅速蔓延的趨勢。調(diào)查表明，從地理角度來看，大有由北向南入侵之勢，一旦黃頂菊由北向南席卷中原地區(qū)，大面積侵入農(nóng)田，對本地物種的正常生長和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)必然造成不可估量的損失[7]。

化感作用被認(rèn)為是外來植物成功入侵新生境的潛在機制之一[8-9]?；凶饔檬怯晒w植物分泌到環(huán)境中的次生代謝物(化感物質(zhì))介導(dǎo)的對自然和農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生影響的現(xiàn)象[10]?；形镔|(zhì)是植物經(jīng)莖葉揮發(fā)、莖葉淋浴、根系分泌及植物殘株的分解等途徑向環(huán)境中釋放出的化學(xué)物質(zhì),并對周圍植物的生長和發(fā)育產(chǎn)生影響[11]。研究發(fā)現(xiàn)，不同靶標(biāo)材料對黃頂菊化感物質(zhì)的敏感性程度也不同，表現(xiàn)出種間差異的特征[12]。周文杰等研究表明，不同濃度的黃頂菊水浸提液對綠豆種子發(fā)芽率及幼苗的根長、莖長及生物量均可以產(chǎn)生不同程度的抑制作用，且均表現(xiàn)出浸提液濃度與抑制程度正相關(guān)關(guān)系[13]。張風(fēng)娟等研究表明，黃頂菊所含的化感物質(zhì)對白菜和水稻可以產(chǎn)生不同程度的化感效應(yīng)[14]；李香菊等研究了29種植物種子與黃頂菊的化感作用，發(fā)現(xiàn)黃頂菊對其發(fā)芽及胚根伸長均有不同程度的抑制作用[15]。盡管有人研究過黃頂菊對多種受體植物的化感作用，但黃頂菊與生菜、春菜、芥蘭和小麥新品種百農(nóng)207之間的化感作用的研究尚未見報道。本實驗選取本地常見作物生菜、春菜、芥蘭、小麥為材料，研究黃頂菊對這幾種作物的種子萌發(fā)和幼苗生長的影響，以期闡明黃頂菊的化感作用以及本地作物對黃頂菊的化感響應(yīng)，進而選出抗化感能力較強的作物品種，為降低黃頂菊的危害以及更好地防除黃頂菊提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

黃頂菊的種子和新鮮莖桿于2016年10月采自河南省新鄉(xiāng)市紅旗區(qū)。生菜、芥蘭和春菜的種子來自于新鄉(xiāng)農(nóng)科所。2個小麥品種周麥18和百農(nóng)207來自河南科技學(xué)院小麥研究中心，其中百農(nóng)207是河南科技學(xué)院近年選育的新品種，2013年通過國家農(nóng)作物品種審定委員會審定。

1.2 黃頂菊種子水浸提液制備

準(zhǔn)確稱量100 g經(jīng)過自然風(fēng)干與除雜的完全成熟的新鮮黃頂菊種子，置于廣口瓶中，加入1 000 mL蒸餾水，置于4 ℃冰箱中浸泡48 h，過濾后定容，得澄清的水浸提液1 L，以此為原液(10% FW)備用。黃頂菊莖桿粉碎后做相同處理制得0.1 g/mL的黃頂菊莖桿浸提液原液。調(diào)節(jié)各濃度浸提液pH值與蒸餾水一致(pH=6.58)，冷藏(4 ℃)備用。

1.3 測定指標(biāo)與方法

分別挑取形態(tài)、大小一致的生菜、芥蘭和春菜種子(經(jīng)發(fā)芽測定，發(fā)芽率均在90%以上)，分裝于規(guī)格相同(直徑8 cm)、潔凈的培養(yǎng)皿中，每培養(yǎng)皿均勻分裝15粒種子。將黃頂菊種子水浸提液原液配制成0.02 g/mL、0.04 g/mL、0.06 g/mL和0.08 g/mL等4個不同的處理濃度，蒸餾水(0 g/mL)為對照，每個處理重復(fù)3次，每只培養(yǎng)皿添加10 mL浸提液(約淹沒種子1/3)。置于室溫(20 ℃)、自然光照射、相對濕度75%的條件下進行發(fā)芽實驗，每隔24 h統(tǒng)計每皿的發(fā)芽數(shù)，待各培養(yǎng)皿發(fā)芽數(shù)不變時，計算相應(yīng)的發(fā)芽率。從每只培養(yǎng)皿中挑出10株幼苗，測量每株芽的根長、莖長。

小麥幼苗的化感實驗，首先挑選大小一致飽滿的周麥18和百農(nóng)207的種子進行催芽。露白后，選取5粒萌發(fā)一致的種子，播種在統(tǒng)一規(guī)格的育苗缽(直徑10 cm)中，每只育苗缽裝入等量的營養(yǎng)土。將黃頂菊莖桿浸提液原液配制成0.01 g/mL、0.025 g/mL、0.05 g/mL和0.075 g/mL 4個不同的處理濃度，蒸餾水(0 g/mL)為對照，每個處理重復(fù)3次。播種后，每個育苗缽都添加相應(yīng)濃度的浸提液100 mL(能使土壤充分浸濕)，置于室溫自然光照射相對濕度75%條件下進行幼苗生長實驗。每隔3 d，補充等量的相應(yīng)濃度的浸提液。進行統(tǒng)一管理，20 d后，測定每個處理小麥幼苗的株高、同一葉位的葉長以及最大根長。

1.4 數(shù)據(jù)處理

在每個濃度中選取15株幼苗，測量根長、芽長，并計算出發(fā)芽率和化感抑制率，求平均值。發(fā)芽率(%)=正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%，化感效應(yīng)指數(shù)(response index,RI)采用Williamson等[16]的方法進行計算：RI=1-C/T(T≥C)，或者RI=C/T-1(T

表1 黃頂菊種子浸提液對生菜、春菜、芥蘭的化感效應(yīng)

受體處理濃度(g/mL)發(fā)芽率(%)RI最長根長(mm)RI莖長(mm)RISE生菜ck93.33a0.0052.87a0.0027.60a0.000.000.0284.44ab-0.1038.87b-0.2624.40a-0.12-0.16 0.0482.22ab-0.1213.40c-0.7518.00b-0.35-0.41 0.0680.00ab-0.145.67d-0.8913.20c-0.52-0.52 0.0860.00b-0.362.20d-0.964.40d-0.84-0.72春菜ck100.00a0.0035.80a0.0023.07b0.000.00 0.02100.00a0.0028.53b-0.2030.47a0.320.04 0.0493.33a-0.077.67c-0.799.80c-0.58-0.48 0.0691.11a-0.103.33d-0.916.53c-0.72-0.58 0.0884.44a-0.161.40d-0.960.60d-0.97-0.70 芥蘭ck95.56a0.0039.60a0.0018.13a0.000.00 0.0293.33ab-0.0236.73a-0.0714.73ab-0.19-0.09 0.0488.89abc-0.0711.33b-0.7111.07bc-0.39-0.39 0.0677.78bc-0.195.00c-0.879.47cd-0.48-0.51 0.0875.56c-0.211.80c-0.955.47d-0.70-0.62

注：不同小寫字母表示在p=0.05水平上有顯著性差異。下同。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃頂菊種子浸提液對生菜、春菜、芥蘭的化感影響

2.1.1 黃頂菊種子水浸提液對生菜、春菜、芥蘭種子發(fā)芽率的影響

如表1可知，黃頂菊種子浸提液對生菜、春菜、芥蘭種子的發(fā)芽率均表現(xiàn)出了不同程度的抑制作用，且抑制作用隨著濃度的增大而增強，除春菜外，其他2種對不同濃度的黃頂菊浸提液處理與對照(ck)表現(xiàn)出顯著性差異(p<0.05)。其中，生菜對黃頂菊種子浸提液最為敏感，在浸提液濃度較低的情況下即表現(xiàn)出明顯的抑制作用，且隨著浸提液濃度的增加而抑制作用增強；對春菜而言，低濃度(0.02 g/mL)的浸提液對其不產(chǎn)生抑制作用，只有在較高濃度情況下，才逐漸表現(xiàn)出抑制作用，RI的絕對值也相對較?。唤嫣m的對照發(fā)芽率高達(dá)95.56%，不同浸提液濃度處理下發(fā)芽率范圍為75.56%～93.33%。綜合比較來看，3種種子發(fā)芽率對黃頂菊種子浸提液的敏感程度依次為：生菜>芥蘭>春菜。

2.1.2 黃頂菊種子水浸提液對生菜、春菜、芥蘭幼苗最長根長的影響

如表1所示，黃頂菊種子水浸提液對生菜、春菜、芥蘭幼苗根長的影響很大，且隨著浸提液濃度的增加，根長越來越短。除了在0.02 g/mL時，芥蘭的根長與對照相比沒達(dá)到顯著差異外，生菜、春菜的根長在所有處理濃度下與對照相比都表現(xiàn)出顯著性差異(p<0.05)，在0.08 g/mL濃度處理下，生菜、春菜、芥蘭的根長分別為2.20，1.40 mm和1.80 mm，此時的RI的絕對值都達(dá)到最大值，分別為0.96、0.96和0.95。

2.1.3 黃頂菊種子水浸提液對生菜、春菜、芥蘭種子幼苗莖長的影響

如表1所示，除春菜在0.02 g/mL浸提液處理下，與對照相比有促進莖長生長的作用之外，其他不同濃度處理的浸提液處理與對照相比均表現(xiàn)出抑制作用。在較低濃度(0.02 g/mL和0.04 g/mL)時，浸提液處理對莖長影響比較大的是芥蘭，RI值分別為-0.19和-0.39。在較高濃度(0.06 g/mL和0.08 g/mL)時，浸提液處理對莖長影響最大的是春菜，RI值分別為-0.72和-0.97。總體來看，隨著浸提液濃度的增大，種子幼苗莖長呈遞減趨勢，且在0.04，0.06 g/mL和0.08 g/mL濃度處理下，3種種子的莖長與對照相比都有顯著性差異(p<0.05)。

表2 黃頂菊莖桿浸提液對2種小麥品種的化感效應(yīng)

小麥品種處理濃度(g/mL)株高(cm)RI葉長(cm)RI最長根長(cm)RISE周麥18ck30.13a0.0023.63a0.0031.63a0.000.00 0.0128.00ab-0.0720.38ab-0.1423.50ab-0.26-0.16 0.02526.63ab-0.1219.75ab-0.1621.25b-0.33-0.20 0.0525.33b-0.1618.83b-0.2018.00b-0.43-0.26 0.07524.17b-0.2017.67b-0.2517.67b-0.44-0.30百農(nóng)207ck29.00a0.0022.38a0.0042.25a0.000.00 0.0128.00a-0.0321.67a-0.0341.00a-0.03-0.03 0.02527.63ab-0.0519.75a-0.1237.25a-0.12-0.10 0.0526.25ab-0.0919.13a-0.1524.38b-0.42-0.22 0.07523.43b-0.1917.50b-0.2223.93b-0.43-0.28

2.1.4 黃頂菊種子水浸提液對種子的化感綜合效應(yīng)(SE)

由表1可知，除在0.02 g/mL濃度浸提液處理下，春菜的發(fā)芽率、根長和莖長的化感綜合效應(yīng)指數(shù)(SE)為正值外，其他處理下，生菜、芥蘭種子的化感綜合效應(yīng)指數(shù)(SE)均小于零。SE為負(fù)值，就說明黃頂菊化感效應(yīng)均表現(xiàn)為抑制作用。從抑制的程度來看，抑制作用的大小隨浸提液濃度的增大而增強。在較低浸提液濃度(0.02 g/mL和0.04 g/mL)時，對浸提液處理最敏感的是生菜；在較高濃度(0.06 g/mL和0.08 g/mL)時，對浸提液處理最敏感的是春菜。綜合來看，3種種子對浸提液處理的敏感程度依次為生菜>春菜>芥蘭。

2.2 黃頂菊莖桿浸提液對2種小麥幼苗的化感效應(yīng)

2.2.1 黃頂菊莖桿浸提液對小麥株高的影響

由表2可知，黃頂菊莖桿浸提液對2種小麥的株高均表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，隨著浸提液濃度的增加，小麥幼苗的株高逐漸降低。其中，在較低濃度(0.01 g/mL和0.025 g/mL)時，周麥18和百農(nóng)207的株高，雖然與對照相比都受到抑制，但未達(dá)到顯著性差異水平。在較高濃度(0.05 g/mL和0.075 g/mL)時，周麥18和百農(nóng)207的株高都進一步降低。其中，周麥18的株高與對照相比都達(dá)到顯著性差異，而百農(nóng)207的株高，只有在最高處理濃度0.075 g/mL時達(dá)到顯著性差異。說明周麥18的株高與百農(nóng)207的相比，更易受到浸提液的影響。從RI值上來看，RI值都小于0，說明黃頂菊莖桿浸提液對2種小麥的株高均表現(xiàn)為抑制效應(yīng)；株高的RI值的絕對值都隨著浸提液濃度的增加而增大，說明浸提液濃度越高對株高的抑制作用越大。

2.2.2 黃頂菊莖桿浸提液對小麥葉長和根長的化感效應(yīng)

黃頂菊莖桿浸提液對小麥葉長和根長的化感效應(yīng)與株高相似，對2種小麥的葉長和根長均表現(xiàn)為抑制效應(yīng)，隨著浸提液濃度的增加，小麥幼苗的葉長和根長逐漸變短。其中，周麥18的葉長在處理濃度為0.05 g/mL和0.075g/mL時，與對照相比有顯著性差異(p<0.05)；百農(nóng)207的葉長雖隨著處理濃度增加也變短，但與對照相比并沒有達(dá)到顯著性差異(p<0.05)。黃頂菊浸提液對根長的化感效應(yīng)：周麥18的根長在處理濃度為0.025 g/mL、0.05 g/mL和0.075 g/mL時，與對照相比都有顯著性差異(p<0.05)；百農(nóng)207的根長在處理濃度為0.05 g/mL和0.075 g/mL時，與對照相比才有顯著性差異(p<0.05)。由此可知，2種小麥的葉長和根長都受到黃頂菊浸提液的抑制，但抑制程度不同，周麥18比百農(nóng)207更敏感一些。

2.2.3 黃頂菊種子水浸提液對2種小麥的化感綜合效應(yīng)(SE)

由表2可知，黃頂菊莖桿浸提液對2種小麥的化感綜合指數(shù)(SE)均為負(fù)數(shù)，即對2種小麥的株高、葉長、根長均起抑制作用。隨著浸提液濃度的增加，SE的絕對值逐漸增大，說明浸提液對2種小麥的株高、葉長、根長的抑制作用也逐漸增大。周麥18對黃頂菊莖桿浸提液的化感效應(yīng)更敏感。也就是說，百農(nóng)207較耐受一些。

3 結(jié)論與討論

黃頂菊是近年來在我國新出現(xiàn)的入侵植物，目前在河南省的黃河及沿岸地區(qū)(包括安陽市、濮陽市、新鄉(xiāng)市、鄭州市等)入侵比較嚴(yán)重，且有由北向南蔓延的趨勢，對入侵地的糧食生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重的危害。因此，研究黃頂菊化感作用對作物的危害，以及作物對黃頂菊的化感作用的響應(yīng)，能更好地減少和預(yù)防黃頂菊的危害。由試驗結(jié)果可知，黃頂菊種子浸提液使生菜、春菜、芥蘭的發(fā)芽率降低，根長和莖長變短；黃頂菊莖桿浸提液使小麥的莖長、葉長和根長縮短。這表明黃頂菊的確存在化感抑制物質(zhì)，且隨著黃頂菊浸提液濃度的增加化感的抑制效應(yīng)增強。

在以生菜、春菜、芥蘭種子為受體的試驗中，隨著黃頂菊種子浸提液濃度的增加，對生菜、春菜、芥蘭種子化感的抑制效應(yīng)也逐漸增強。這與代磊等[17]的研究結(jié)果一致。除了春菜在0.02 g/mL浸提液處理下，發(fā)芽率和莖長沒受到抑制外，其他2種種子在不同的浸提液濃度處理下，根長、莖長和發(fā)芽率的化感效應(yīng)指數(shù)(RI)和化感綜合效應(yīng)指數(shù)(SE)都為負(fù)值，說明黃頂菊對3種種子的萌發(fā)和幼苗的生長整體表現(xiàn)出抑制作用。從RI和SE值大小來看，根長、莖長和發(fā)芽率對浸提液的化感效應(yīng)有強弱之分，敏感度依次為：根長>莖長>發(fā)芽率。黃頂菊浸提液對種子幼苗根長和莖長的影響高于對發(fā)芽率的影響，說明種子在不同生長時期對化感物質(zhì)的敏感程度不同，可能是化感物質(zhì)通過快速改變細(xì)胞膜透性和降低酶活性，抑制分生組織細(xì)胞分裂的結(jié)果。這與蘆站根等[18]的研究結(jié)果相似。

生菜、春菜、芥蘭3種種子的萌發(fā)和幼苗生長對黃頂菊浸提液的化感效應(yīng)的敏感程度不同，依次為生菜>春菜>芥蘭。所以在黃頂菊入侵嚴(yán)重且防除困難的地區(qū)，在針對這3種蔬菜的選擇上，應(yīng)以生菜為首選。

黃頂菊莖稈浸提液對百農(nóng)207和周麥18小麥的根長、莖長、葉長都有抑制效應(yīng)，且隨著浸提液濃度增加，抑制程度增強。方差分析結(jié)果(表2)表明，在0.01 g/mL和0.025 g/mL處理濃度時，周麥18的株高和葉長與對照相比都沒達(dá)到顯著性差異(p>0.05)；在0.01 g/mL 0.025 g/mL和0.05 g/mL處理濃度時，百農(nóng)207的株高和葉長與對照相比未達(dá)到顯著性差異(p>0.05)。說明根長更易受到浸提液的化感作用的影響。黃頂菊浸提液對幼苗根長的化感效應(yīng)強于莖長，這很有可能是在種子萌發(fā)過程中，其胚根首先接觸到黃頂菊種子中的化感物質(zhì)，化感物質(zhì)通過抑制細(xì)胞的分裂和伸長，抑制胚根生長，從而影響了根系活力和幼苗的生長，這與張風(fēng)娟等[14]和任艷萍等[19]的研究結(jié)果相似。2種小麥對黃頂菊浸提液的敏感程度也不同，從RI和SE值可知，周麥18更易受到黃頂菊浸提液的化感作用的影響，說明百農(nóng)207抗化感能力更強，更能適應(yīng)本地區(qū)的小麥生產(chǎn)。