胡金燕 林坤培 周蘭

【摘要】 目的：探討血清HBsAg、HBV DNA水平及相關(guān)性在慢性HBV感染過(guò)程的變化和意義，為慢性HBV感染患者的治療和預(yù)后評(píng)估提供必要的理論依據(jù)。方法：將2014年1月-2017年8月本院收治的80例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為研究對(duì)象，結(jié)合患者HBV感染的不同階段將其分為IT組（免疫耐受）、IC組（免疫清除）、LR組（低復(fù)制期）、ENH組（再活動(dòng)期），每組20例。比較慢性HBV感染過(guò)程中不同階段血清HBsAg、HBV DNA水平，分析血清HBsAg與HBV DNA相關(guān)性。結(jié)果：四組慢性HBV感染患者血清HBsAg、HBV DNA水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步分析IT組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最高，LR組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。IT、IC兩組患者HBV DNA水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。IT、LR、ENH組患者血清HBsAg與HBV DNA無(wú)相關(guān)性，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。IC組患者血清HBsAg與HBV DNA呈正相關(guān)性，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：慢性HBV感染患者在不同階段的血清HBV持續(xù)感染不同階段HBsAg滴度具有顯著性差異，IT期最高，其次為IC和ENH期，LR期最低，血清HBsAg水平僅在IC期與HBV DNA呈現(xiàn)正相關(guān)，慢性HBV感染患者的血清HBsAg在自然病程中不同階段水平變化有助于預(yù)測(cè)疾病進(jìn)程和評(píng)估抗病毒治療的效果.

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎病毒； 乙肝表面抗原； 乙型肝炎病毒DNA； 相關(guān)性

【Abstract】 Objective：To explore the changes and significance of serum HBsAg and HBV DNA levels and their correlation in the process of chronic HBV infection，and to provide the necessary theoretical basis for the treatment and prognosis evaluation of patients with chronic HBV infection.Method：A total of 80 cases of chronic HBV infection treated in our hospital from January 2014 to August 2017 were divided into IT（immune tolerance） group，IC（immune clearance） group，LR（low replication period） group，and ENH（reactivation period） group according to different stages.The levels of serum HBsAg and HBV DNA in different stages of chronic HBV infection were compared，the correlation between serum HBsAg and HBV DNA was analyzed.Result：The serum levels of HBsAg and HBV DNA in four groups of patients with chronic HBV infection were significantly different （P<0.05）.Further analysis showed that the serum levels of HBsAg and HBV DNA in IT group were the highest，while the serum HBsAg and HBV DNA levels in LR group were the lowest（P<0.05）.There was no significant difference in HBV DNA level between IT group and IC group（P>0.05）.No correlation was found between serum HBsAg and HBV DNA in IT，LR and ENH groups（P>0.05）.There was a positive correlation between serum HBsAg and HBV DNA in patients of IC group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：HBsAg titers in patients with chronic HBV infection at different stages of persistent HBV infection are significantly different at different stages of infection，with the highest IT period followed by IC and ENH stages，the lowest LR stage，serum HBsAg level only at IC stage and HBV DNA presentation Positive correlations between serum HBsAg levels in patients with chronic HBV infection at different stages of their natural history are helpful in predicting disease progression and assessing the effectiveness of antiviral therapy.

【Key words】 Hepatitis B virus； Hepatitis B surface antigen； Hepatitis B virus DNA； Correlation

First-authors address：Luoding Peoples Hospital，Luoding 527200，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.15.003

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）在我國(guó)呈現(xiàn)中度流行的趨勢(shì)，流行病學(xué)調(diào)查顯示近年來(lái)我國(guó)1～60歲人群乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）攜帶率為8.13%，其中5歲以下兒童HBsAg攜帶率不到1.00%，據(jù)推算慢性HBV感染的患者>9 000萬(wàn)，其中慢性乙型肝炎患者>2 000萬(wàn)，臨床上HBV治療的目的是促使HBsAg消失、表面抗體出現(xiàn)[1-2]。HBsAg定量檢測(cè)逐漸應(yīng)用于臨床慢性HBV感染的治療與研究中，臨床醫(yī)生逐漸重視HBsAg定量值與HBV的關(guān)系[3]。既往研究顯示慢性HBV感染患者的血清HBsAg水平與抗病毒治療效果、停藥后持續(xù)應(yīng)答情況密切相關(guān)，并且能夠評(píng)估患者在自然情況HBV是否自身清除，但是IT（免疫耐受）、IC（免疫清除）、LR（低復(fù)制期）、ENH（再活動(dòng)期）不同階段慢性HBV感染患者血清HBsAg定量分布特點(diǎn)的研究在我國(guó)缺乏[4-5]，基于以上本研究旨在探討分析血清HBsAg、HBV DNA水平及相關(guān)性在慢性HBV感染過(guò)程的變化和意義，為慢性HBV感染患者的治療和預(yù)后評(píng)估提供必要的理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2014年1月-2017年8月本院收治的80例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查確診為慢性HBV感染；（2）符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)《慢性乙型肝炎防治指南》[6]；（3）合并其他肝炎病毒及艾滋病毒感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并酒精性、非酒精性脂肪肝；

（2）藥物性、中毒性肝炎；（3）重疊或合并其他病毒性肝炎；（4）自身免疫性肝炎、血色病、肝豆?fàn)詈俗冃?、肝癌、血吸蟲(chóng)肝病等其他肝??；（5）乙肝表面抗原和表面抗體同時(shí)陽(yáng)性者、HIV及其他肝炎患者。研究方案經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查與備案，患者均知情同意自愿參與本研究并簽署知情同意書(shū)。根據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南》結(jié)合患者HBV感染的不同階段將其分為IT組（免疫耐受）、IC組（免疫清除）、LR組（低復(fù)制期）、ENH組（再活動(dòng)期），每組20例。見(jiàn)表1。

1.2 方法 （1）血清HBsAg定量檢測(cè)：采用新波生物的時(shí)間分段熒光免疫分析定量檢測(cè)血清HBsAg，檢測(cè)正常值：0～1 IU/mL，儀器：ARCHITECTi2000檢測(cè)儀。（2）血清HBV DNA檢測(cè)：采用廣州達(dá)安試劑，PCR法，檢測(cè)正常值HBV DNA<1.0E+

002 IU/mL，儀器：博日公司Line-Gene實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，正態(tài)分布計(jì)量資料（x±s）表示，非正態(tài)分布計(jì)量資料M（Q25，Q75）表示，組間比較采用方差分析，兩兩比較采用SNK分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用字2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組一般資料比較 IT組：男12例，女8例；年齡27～77歲，平均（59.35±5.12）歲。IC組：男13例，女7例；年齡23～79歲，平均（60.28±4.89）歲。LR組：男10例，女10例；年齡31～75歲，平均（58.75±5.15）歲。ENH組：男12例，女8例；年齡30～77歲，平均（59.91±5.96）歲。四組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 慢性HBV感染過(guò)程中不同階段血清HBsAg、HBV DNA水平比較 四組慢性HBV感染患者血清HBsAg、HBV DNA水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步分析IT組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最高，LR組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最低，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。IT、IC兩組HBV DNA水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 慢性HBV感染過(guò)程中不同階段血清HBsAg與HBV DNA相關(guān)性分析 IT、LR、ENH組患者血清HBsAg與HBV DNA無(wú)相關(guān)性，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。IC組患者血清HBsAg與HBV DNA呈正相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3和圖1。

3 討論

HBV的外膜蛋白是HBsAg，廣泛存在于患者血液和體液中，HBsAg本身沒(méi)有傳染性，但是在HBV感染中發(fā)揮著重要的作用[7]。正常人群在感染HBV 1周后血液中即可出現(xiàn)HBsAg，通常還伴有HBV的存在，因此臨床上將HBsAg作為診斷HBV感染的標(biāo)志，并且可以通過(guò)檢測(cè)患者HBsAg、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、HBV DNA等HBV標(biāo)志物來(lái)判斷HBV的復(fù)制[8-9]，尤其是慢性HBV的抗病毒治療過(guò)程中評(píng)估和預(yù)測(cè)療效、停藥后持續(xù)應(yīng)答情況的重要指標(biāo)是HBeAg、HBV DNA，但是以往國(guó)內(nèi)外多數(shù)學(xué)者認(rèn)為HBsAg對(duì)HBV的復(fù)制和病情程度不能有效的反映[10-11]。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)慢性HBV感染的不同階段的HBsAg水平與多個(gè)因素有關(guān)，持續(xù)定量監(jiān)測(cè)HBsAg可以反映患者的病情嚴(yán)重程度、治療后的療效及停藥后的復(fù)發(fā)情況[12-13]，因此在臨床上認(rèn)為持續(xù)定量監(jiān)測(cè)慢性HBV感染患者HBsAg在反映復(fù)制情況和評(píng)估抗病毒治療的預(yù)后具有重要的意義。

慢性HBV感染的自然過(guò)程通常分為IT（免疫耐受）、IC（免疫清除）、LR（低復(fù)制期）、ENH（再活動(dòng)期）4個(gè)期，不同的階段血清HBsAg、HBV DNA水平有著各自的特點(diǎn)，研究慢性HBV感染的自然疾病過(guò)程，可以判斷疾病的預(yù)后、藥物的治療效果、藥品經(jīng)濟(jì)學(xué)提供必要的佐證依據(jù)，慢性HBV感染的自然過(guò)程中使用HBsAg 定量技術(shù)可以動(dòng)態(tài)的監(jiān)測(cè)患者血清HBsAg的水平，因此定量技術(shù)監(jiān)測(cè)HBsAg探究慢性HBV感染疾病過(guò)程已經(jīng)成為臨床研究的熱點(diǎn)[14]，并且國(guó)外已經(jīng)有研究顯示：慢性HBV感染患者的不同階段HBsAg水平具有顯著性的差異，但是國(guó)內(nèi)此類(lèi)的研究較少[14-15]，本研究顯示：所有患者均未接受抗病毒治療，慢性HBV感染的患者HBsAg水平差異顯著，IT組患者血清HBsAg水平最高，IC組患者HBsAg水平開(kāi)始下降，LR組患者血清HBsAg水平最低，而ENH組患者血清HBsAg水平又開(kāi)始上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與Yao等[16]學(xué)者研究一致，提示：慢性HBV感染患者血清HBsAg表達(dá)與其免疫背景密切相關(guān)。

慢性HBV感染患者的血清HBsAg與HBV DNA的相關(guān)性分析顯示：IC組患者血清HBsAg與HBV DNA呈正相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而其余階段患者的血清HBsAg與HBV DNA水平無(wú)相關(guān)性，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），分析原因：機(jī)體在感染HBV后特異性的免疫反應(yīng)迅速建立，有效控制HBV DNA的復(fù)制，減少HBsAg的合成，因此IC期患者的血清HBsAg與HBVDN呈正相關(guān)性，Martinot-Peignoux等[17]國(guó)外學(xué)者認(rèn)為僅僅在急性乙型肝炎時(shí)者的血清HBsAg與HBV DNA水平具有相關(guān)性，而感染的不同階段無(wú)相關(guān)性，與本研究不一致，可能與研究對(duì)象的種族、病毒基因有關(guān)，而本研究未進(jìn)行病毒基因類(lèi)別和種族的研究，IT、LR、ENH階段的患者血清HBsAg與HBV DNA水平無(wú)相關(guān)性，即不能通過(guò)定量檢測(cè)血清HBsAg評(píng)估HBV的復(fù)制程度，可能與基因突變等HBsAg等合成復(fù)雜性有關(guān)，但是這個(gè)還需要今后進(jìn)一步研究和證實(shí)，因此，慢性HBV感染者只有在IC特定的時(shí)期血清HBsAg可以評(píng)估HBV DNA的復(fù)制程度，在臨床上要綜合考率HBV感染者所處的階段、病毒基因型、e抗原癥狀等因素。

近年來(lái)隨著臨床HBsAg定量技術(shù)的不斷與運(yùn)用，促使診斷HBV感染的基本標(biāo)志物血清HBsAg有了新的認(rèn)識(shí)，cccDNA是存于與肝細(xì)胞中具有轉(zhuǎn)錄活性的遺傳物質(zhì)，能夠?qū)BV感染細(xì)胞的數(shù)量做出準(zhǔn)確的反應(yīng)，但是檢測(cè)其含量是必須在肝組織中進(jìn)行，極易損傷患者的肝組織，導(dǎo)致cccDNA在臨床上的應(yīng)用受到了限制[18]，而血清HBsAg與cccDNA相關(guān)性顯著，即可認(rèn)為血清HBsAg也能反應(yīng)感染細(xì)胞的數(shù)量，是HBV感染無(wú)創(chuàng)傷的標(biāo)志物[19]，因此，慢性HBV感染患者血清HBsAg在感染過(guò)程中的變化、與HBV DNA水平的相關(guān)性及評(píng)估抗病毒治療的效果在臨床上逐漸受到重視，利用血清HBsAg與病毒復(fù)制的關(guān)系評(píng)斷HBV攜帶者的疾病活動(dòng)情況，早期血清HBsAg下降程度在患者抗病毒治療過(guò)程中可以評(píng)估治療的效果，同時(shí)停藥后血清HBsAg可以預(yù)測(cè)患者持續(xù)應(yīng)答情況[20]。

綜上所述，慢性HBV感染患者在不同階段的血清HBV 持續(xù)感染不同階段HBsAg滴度具有顯著性差異，IT期最高，其次為IC和ENH期，LR期最低，血清HBsAg水平僅在IC期與HBV DNA呈現(xiàn)正相關(guān)，慢性HBV感染患者的血清HBsAg在自然病程中不同階段水平變化有助于預(yù)測(cè)疾病進(jìn)程和評(píng)估抗病毒治療的效果。

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