王 瑩，王思予，申秀娟，張 磊，徐亞杰，劉 斌，李大軍

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，吉林 長春 130118)

火炬樹(RhustyphinaL.)別名鹿角漆，漆樹科木本植物，在我國東北、華中和西南等地區(qū)廣泛種植，在東北地區(qū)其芽枝于5月初萌發(fā)?；鹁鏄渚哂休^強(qiáng)的氣候適應(yīng)能力，芽枝鮮嫩、出芽量大，可人工繁殖取材。研究表明，火炬樹中富含蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，樹皮等部位有止血效果[1]；果實中含有蘇氨酸、賴氨酸和丙氨酸等15種人體所需的氨基酸，被人們稱為“無毒漆果”[2-3]；樹葉可入藥，具有降低人體血糖的功效[4]，此外其樹葉提取液具有抑菌、清除自由基等作用[5-7]。

近年來，高血脂癥的發(fā)生率呈明顯上升趨勢[8]。有研究證實，血脂異常與動脈粥樣硬化性疾病有關(guān)[9]?，F(xiàn)有的木本植物類食品通常富含多酚、皂苷類物質(zhì)，具有保健功能，如刺嫩芽具有補(bǔ)氣、活血等功效，能夠緩解神經(jīng)衰弱、肝炎等疾病的癥狀[10]；香椿的根皮及果實可入藥，能夠有效去濕止痛，有保肝、健脾、抗菌的功效[11]；柳樹在民間常被作為食物和飼料使用，其葉片中的氨基多糖等物質(zhì)有降血脂作用[12]?；鹁鏄渚哂袣夂蜻m應(yīng)性廣泛、繁殖能力強(qiáng)等優(yōu)點，其樹葉含有木本植物特有的功能成分。然而，目前尚未見針對火炬樹芽食用功能的研究報道。因此，本研究以小鼠作為試驗動物，將火炬樹芽加工成飼料添加劑，以柳樹葉為對照，探討其對高脂模型小鼠抗氧化性能及血脂水平的影響，以期為將火炬樹芽開發(fā)為降血脂減肥新型食材或產(chǎn)品提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

火炬樹芽于5月份采摘于吉林省長春市凈月區(qū)，于3～4年樹齡火炬樹側(cè)枝分生出的枝芽長到8～15 cm時采摘，清洗、瀝水后切碎，以干物質(zhì)(蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%)為基礎(chǔ)，按照質(zhì)量分?jǐn)?shù)0%，2.5%，5%，10%比例混入小鼠高脂飼料。柳樹葉對照按質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.5%的比例混入小鼠高脂飼料。

健康SPF級昆明小鼠60只，體質(zhì)量為(18±2)g/只?；A(chǔ)飼料為玉米-魚粉-豆粕型(粗蛋白18%、粗脂肪4%、粗纖維5%、粗灰分8%，均為質(zhì)量分?jǐn)?shù))；高脂飼料配方為：78.8%基礎(chǔ)飼料、1%膽固醇、0.2%牛膽鹽、10%蛋黃粉和10%豬油，均為質(zhì)量分?jǐn)?shù)。2種飼料均由吉林大學(xué)實驗動物中心提供。

1.2 試劑與儀器設(shè)備

丙二醛(MDA)測試盒、總超氧化物歧化酶(T-SOD)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)測試盒、總蛋白(BCA)定量試劑盒、甘油三酯(TG)測試盒、總膽固醇(T-CHO)測試盒、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測試盒，均購自南京建成生物工程研究所。乙醇、石油醚、正丁醇、甲醇、高氯酸、冰乙酸、丙酮和乙醚，皆為分析純級試劑。

WD-2102型自動酶標(biāo)儀，北京市六一儀器廠；FA2104電子天平，上海精天電子儀器有限公司；DY89-Ⅱ型電動玻璃勻漿機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；臺式高速冷凍離心機(jī)，上海力申科學(xué)儀器有限公司；超純水系統(tǒng)，法國Millapore公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 火炬樹芽成分分析 按照GB 5009.3-2010的方法檢測水分含量，采用水提醇沉法[13]測定多糖得率，超聲輔助提取法[14]測定總黃酮得率，分光光度法[15]測定皂苷得率。

1.3.2 動物分組與處理 昆明小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)均分為6組，先期投喂基礎(chǔ)飼料適應(yīng)7 d，空調(diào)動物房溫度為18～22 ℃，自然光照。分別設(shè)置如下6組：基礎(chǔ)飼料空白組(1組，空白對照)、高脂飼料摻質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.5%柳樹葉陽性對照組(2組)及高脂飼料摻質(zhì)量分?jǐn)?shù)0%(3組)，2.5%(4組)，5%(5組)，10%(6組)火炬樹芽處理組。其中柳樹葉陽性對照組和火炬樹芽處理組小鼠進(jìn)入正試前，先連續(xù)30 d喂食高脂飼料進(jìn)行建模，然后按試驗設(shè)計給予不同的飼料，連續(xù)給料28 d，自由飲水、采食，稱取小鼠初始體質(zhì)量，之后每隔1周稱小鼠體質(zhì)量1次。

1.3.3 測定指標(biāo) 試驗結(jié)束后，小鼠禁食12 h，稱體質(zhì)量。摘眼球取血，3 500 r/min離心10 min后得到血清。按照試劑盒說明，用GPO-PAP酶法檢測血清中TG含量，COD-PAP法檢測血清中TC含量，并直接測定血清中LDL-C和HDL-C含量。

取小鼠肝臟，稱質(zhì)量并計算肝臟指數(shù)，然后加入9倍體積生理鹽水作勻漿處理，羥胺法檢測其T-SOD活力，TBA法檢測MDA含量，比色法測定GSH-Px含量。肝臟指數(shù)的計算公式為：

肝臟指數(shù)=肝臟質(zhì)量/小鼠體質(zhì)量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用Graphpad Prism 5.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，各組數(shù)據(jù)均進(jìn)行方差分析，用LSD法進(jìn)行檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 火炬樹芽成分分析

測定結(jié)果表明，火炬樹芽中水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到60%，干品中多糖得率為3.47%，總黃酮得率為3.19%，皂苷得率為2.43%。

2.2 火炬樹芽對高脂模型小鼠體質(zhì)量的影響

如表1所示，連續(xù)喂養(yǎng)30 d高脂飼料后，2.5%柳樹葉組(2組)和火炬樹芽處理組(3～6組)小鼠體質(zhì)量均極顯著高于空白對照組(1組)。第58天時，火炬樹芽處理組小鼠體質(zhì)量均有所下降；與0%火炬樹芽處理組(3組)相比，2.5%柳樹葉處理組小鼠體質(zhì)量下降了6.18%，5%火炬樹芽處理組(5組)體質(zhì)量顯著下降(P<0.05)， 10%火炬樹芽處理組(6組)小鼠體質(zhì)量極顯著下降(P<0.01)，且低于2.5%柳樹葉處理組(4組)，體質(zhì)量接近空白對照組小鼠水平。

表1 火炬樹芽飼料處理對高脂模型小鼠體質(zhì)量的影響Table 1 Effect of sprout of Rhus typhina on body weight of hyperlipidemic mice g/只

注：與空白對照組(1組)相比，#表示差異顯著(P<0.05)，##表示差異極顯著(P<0.01);與0%火炬樹芽處理組(3組)相比，*表示差異顯著(P<0.05),**表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。
Note:Compared with normal group(group 1), # indicates significant difference(P<0.05),and ## indicates extremely significant difference (P<0.01).Compared with the 0% sprout treatment(group 3),*indicates significant difference(P<0.05) and ** indicates extremely significant difference(P<0.01).The same below.

2.3 火炬樹芽對高脂模型小鼠血清生化指標(biāo)的影響

高脂血癥主要表現(xiàn)為血脂水平異常，火炬樹芽對高脂模型小鼠血清生化指標(biāo)的影響結(jié)果見表2。表2表明，與空白對照組(1組)相比，2.5%柳樹葉處理組(2組)和火炬樹芽處理組(3～6組)小鼠的TG、TC、LDL-C、HDL-C均極顯著升高，但升高幅度不同。與0%火炬樹芽處理組(3組)相比，2.5%，5%，10%火炬樹芽處理組(4，5，6組)小鼠TG含量分別下降1.42%，16.11%和29.86%，其中10%火炬樹芽處理組極顯著下降(P<0.01)，TG含量低于2.5%柳樹葉處理組；2.5%，5%，10%火炬樹芽處理組小鼠TC值均有下降，其中5%和10%火炬樹芽處理組極顯著下降 (P<0.01)；5%和10%火炬樹芽處理組小鼠的LDL-C含量分別極顯著下降了27.64%和31.71%(P<0.01)，10%火炬樹芽處理組與2.5%柳樹葉處理組小鼠的LDL-C含量下降至同一水平；2.5%，5%，10%火炬樹芽處理組小鼠的HDL-C含量顯著或極顯著升高。說明火炬樹芽可以改善高脂模型小鼠的血脂水平。

表2 火炬樹芽對高脂模型小鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C的影響Table 2 Effect of sprout of Rhus typhina on TG,TC,LDL-C and HDL-C levels in serum of hyperlipidemic mice mmol/L

2.4 火炬樹芽對小鼠肝臟指數(shù)的影響

如圖1所示，與空白對照組(1組)相比，0%火炬樹芽處理組(3組)小鼠在連續(xù)58 d飼喂高脂飼料后，承擔(dān)脂肪代謝的肝臟負(fù)擔(dān)較大，造成肝臟指數(shù)升高。與0%火炬樹芽處理組相比，2.5%，5%，10%火炬樹芽處理組(4，5，6組)小鼠的肝臟指數(shù)均顯著或極顯著降低，且10%處理組小鼠肝臟指數(shù)小于2.5%柳樹葉組(2組)。

與空白對照組(1組)相比，#表示差異顯著(P<0.05)，##表示差異極顯著(P<0.01)；與0%火炬樹芽處理組(3組)相比，*表示差異顯著(P<0.05),**表示差異極顯著(P<0.01)。下圖同Compared with normal group(group 1), # indicates significant difference(P<0.05),and ## indicates extremely significant difference (P<0.01).Compared with the 0% sprout treatment (group 3),*indicates significant difference(P<0.05),and ** indicates extremely significant difference(P<0.01).The same below圖1 火炬樹芽對小鼠肝臟指數(shù)的影響Fig.1 Effect of sprout of Rhus typhina on liver index of hyperlipidemic mice

2.5 火炬樹芽對小鼠肝臟抗氧化性能的影響

2.5.1 T-SOD和GSH-Px活力 火炬樹芽對小鼠肝臟T-SOD、GSH-Px活力的影響見圖2。

圖2 火炬樹芽對小鼠肝臟T-SOD和GSH-Px活力的影響Fig.2 Effect of sprout of Rhus typhina on T-SOD and GSH-Px activities in liver of hyperlipidemic mice

從圖2可以看出，2.5%，5%和10%火炬樹芽處理組(4，5，6組)小鼠T-SOD活力顯著或極顯著高于空白對照組 (1組)，極顯著高于0%火炬樹芽處理組(3組)，且10%火炬樹芽組T-SOD活力略高于2.5%柳樹葉組(2組)。結(jié)果表明，火炬樹芽能夠有效提升機(jī)體T-SOD活力，且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

圖2顯示，火炬樹芽處理組小鼠肝臟GSH-Px活力均高于0%火炬樹芽處理組，其中5%處理組升高20.0%(P<0.05)，10%處理組升高58.42%(P<0.01)。結(jié)果表明，火炬樹芽能夠提升機(jī)體的抗氧化能力。

2.5.2 MDA含量 圖3顯示，由于長期攝食高脂飼料，0%火炬樹芽處理組(3組)小鼠肝臟MDA含量極顯著高于空白對照組(1組)，肝臟受損較為嚴(yán)重。經(jīng)飼喂火炬樹芽飼料28 d后，小鼠肝臟MDA含量出現(xiàn)不同程度下降，其中5%和10%火炬樹芽處理(5,6組)組極顯著下降(P<0.01)，且10%火炬樹芽處理組小鼠MDA含量低于2.5%柳樹葉組(2組)。結(jié)果表明，火炬樹芽能夠降低小鼠肝臟MDA含量，有效保護(hù)肝臟。

圖3 火炬樹芽對小鼠肝臟MDA含量的影響Fig.3 Effect of sprout of Rhus typhina on MDA content in liver of hyperlipidemic mice

3 討論與結(jié)論

當(dāng)人體攝入大量飽和脂肪酸或過量攝入糖時會引起血脂水平升高，致使血清中TG、TC、LDL-C過高或HDL-C過低，進(jìn)而誘發(fā)心腦血管等疾病。目前，高血脂癥已成為人類的一種普遍性疾病[16]。

本研究發(fā)現(xiàn)，高脂模型小鼠經(jīng)2.5%，5%和10%火炬樹芽處理后，體質(zhì)量分別降低了4.66%，7.82%和15.96%，由于試驗過程中小鼠自由飲食，能量攝入水平未作控制，因此該結(jié)果表明火炬樹芽具有一定的減肥作用，且效果優(yōu)于2.5%柳樹葉處理組。

本研究結(jié)果表明，與0%火炬樹芽處理組小鼠相比，2.5%～10%火炬樹芽處理能夠降低小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平，同時提高對健康有益的HDL-C水平，表明火炬樹芽能夠有效調(diào)節(jié)血脂水平。此外，飼喂火炬樹芽還能降低小鼠肝臟指數(shù)，顯著提升肝臟T-SOD和GSH-Px活性，并降低肝臟MDA的含量。由于T-SOD和GSH-Px活性能夠反映抗氧化能力，而MDA含量可反映氧化損傷程度[17-19]，因此該結(jié)果說明火炬樹芽能夠增強(qiáng)肝臟的抗氧化能力，降低肝臟的氧化損傷程度，表明火炬樹芽在人工誘導(dǎo)的高血脂模型中對肝臟有一定的保護(hù)作用。

木本植物中已經(jīng)得到普遍認(rèn)可的具有食用保健功能的刺嫩芽、香椿芽富含皂苷、粗纖維等營養(yǎng)成分[10-11]，能夠影響食品物料的消化速度，降低血脂水平。而火炬樹作為木本植物，亦含有比較豐富的具有保健功能的多糖、總黃酮及皂苷，在不控制試驗動物能量攝入的情況下，其具有顯著的降血脂、減肥及護(hù)肝功效。這些功效的發(fā)揮與多種活性成分密切相關(guān)，但具體機(jī)制還有待深入研究。

綜上所述，將火炬樹芽作為飼料添加劑飼喂小鼠，能顯著降低小鼠血脂水平和高脂模型小鼠體質(zhì)量及肝臟指數(shù)，改善肝臟中GSH-Px、T-SOD、MDA等指標(biāo)，且效果優(yōu)于柳樹葉，說明火炬樹芽具有降血脂減肥和抗氧化功效，具有被開發(fā)成新型功能性食材及相關(guān)產(chǎn)品的潛力。