蔚添添, 和靜芳, 李志國(guó), 蘇松坤(福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院，福州 福建 350002)

作為最主要的社會(huì)性昆蟲，蜜蜂在農(nóng)業(yè)和社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展及生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性方面做出了重要的貢獻(xiàn).社會(huì)性昆蟲中，雌性與多只雄性交尾的現(xiàn)象是少見的[1]，但在短暫的婚飛過程中，意蜂(Apismellifera. Ligustica.)蜂王可平均與12只雄蜂交尾[2-3]，有的甚至可高達(dá)40多只[3-4]，大蜜蜂(Apisdorsata)蜂王可與100多只雄蜂交尾[5].已有研究證明與多只雄蜂交尾的蜂王產(chǎn)生的工蜂后代具有多種基因型，增加了蜂群的遺傳多樣性[6-7].遺傳多樣性的出現(xiàn)是自然選擇的結(jié)果，是有利進(jìn)化，能夠使蜜蜂更好地適應(yīng)環(huán)境的變化，促進(jìn)蜂群群勢(shì)發(fā)展.單雄受精蜂王產(chǎn)生基因型相似的工蜂后代，工蜂對(duì)應(yīng)激因子具有相似的耐受性，如果部分個(gè)體受到外界生物或非生物因子脅迫刺激而患病時(shí)，整個(gè)蜂群中的工蜂都有可能感染病原，進(jìn)而威脅蜂群健康.多雄受精蜂王產(chǎn)生具有不同基因型的工蜂后代，在一定程度上降低整個(gè)蜂群的患病可能性，提高蜂群存活率[8].此外，交尾過程中雄蜂的數(shù)量也影響著蜂群中蜂王交替現(xiàn)象的發(fā)生，多雄交配可以降低蜂王遭受處女王攻擊風(fēng)險(xiǎn)[9].近年來，生物性致病因子和非生物性因子對(duì)蜜蜂健康造成了嚴(yán)重的威脅.蜂王典型的一妻多夫制交尾特征造成工蜂后代在生理和行為上的差異，而這些差異在蜂群抵御外界應(yīng)激性因子脅迫過程中起了重要的作用.鑒于蜜蜂遺傳多樣性與蜜蜂健康之間的重要關(guān)系，本文從遺傳多樣性在蜜蜂抵御生物性和非生物性應(yīng)激因子過程中所起作用等方面對(duì)已有研究進(jìn)行綜述，并總結(jié)蜜蜂基因型、表型和應(yīng)激因子三者之間的交互關(guān)系，以期為國(guó)內(nèi)相關(guān)研究者開展有關(guān)遺傳多樣性與蜜蜂健康關(guān)系的研究提供理論借鑒.

1 蜜蜂健康及其影響因素

蜜蜂與人類生活息息相關(guān)，蜜蜂不僅是重要的授粉昆蟲，還為人類提供蜂王漿、蜂膠、蜂花粉、蜂蜜等多種蜂產(chǎn)品.蜜蜂健康影響蜂產(chǎn)品的品質(zhì)和授粉效率，最終對(duì)人類自身產(chǎn)生影響.在全球化經(jīng)濟(jì)背景下，各國(guó)致力于發(fā)展工業(yè)，導(dǎo)致全球氣候發(fā)生變化，日益嚴(yán)峻的環(huán)境壓力在一定程度上危害了包括蜜蜂在內(nèi)的昆蟲的生物多樣性.已有研究表明蜜蜂(Apismellifera)數(shù)量正逐年減少，尤其在北美，歐洲和中東地區(qū)[10-15].區(qū)別于以往正常的越冬蜂死亡事例，2006—2007年冬天美國(guó)蜜蜂突然大量減少[16]，此現(xiàn)象被稱為蜂群崩潰失調(diào)癥(colony collapse disorder, CCD)[12].隨后，全球眾多地區(qū)蜜蜂與野生蜜蜂大量減少及其影響因素成為研究熱點(diǎn).近十年來，在加拿大、歐洲、以色列、土耳其等國(guó)家發(fā)現(xiàn)越冬蜜蜂大量死亡，發(fā)病癥狀類似CCD[14].雖然關(guān)于CCD現(xiàn)象的確切致病因子至今依然并未明晰，但現(xiàn)在普遍認(rèn)為多種因素相互作用影響了蜜蜂健康進(jìn)而可能引發(fā)了CCD.這些影響因素主要有非生物性因子和生物性因子，非生物性因子主要包括殺蟲劑、蜜蜂食物質(zhì)量、棲息地減少、氣候、環(huán)境污染等；生物性因子主要包括細(xì)菌、病毒、真菌、蜂螨、孢子蟲等.

2 蜜蜂遺傳多樣性的生物學(xué)特征

膜翅目(Hymenoptera)昆蟲的遺傳關(guān)聯(lián)性和利他主義之間的關(guān)系構(gòu)成了社會(huì)行為研究的基礎(chǔ)，蜜蜂則是社會(huì)行為研究領(lǐng)域中的模式生物.在自然界中，蜜蜂(Apismellifera)蜂群中蜂王的交尾方式是典型的一妻多夫制，蜂王通過受精囊中的精液和產(chǎn)生雄蜂將遺傳物質(zhì)傳給后代，蜂群內(nèi)部的遺傳關(guān)聯(lián)性顯著降低.雖然遺傳關(guān)聯(lián)性能夠促進(jìn)利他主義行為的傳播，但根據(jù)“優(yōu)勝劣汰”原則，一妻多夫制的交尾系統(tǒng)在生物進(jìn)化過程中被保留至今，必有其存在的意義，若干假設(shè)提出降低蜂群內(nèi)部的關(guān)聯(lián)性對(duì)蜂群的發(fā)展有著潛在優(yōu)勢(shì).現(xiàn)已有不少研究證實(shí)增加工蜂后代的基因型無論是對(duì)個(gè)體性能還是蜂群整體性能的提升均有顯著效應(yīng).具體表現(xiàn)為：(1)工蜂數(shù)量決定群勢(shì)的強(qiáng)弱，多雄受精的蜂王對(duì)工蜂的吸引力顯著提高，在分蜂期間，多雄受精的蜂王帶領(lǐng)工蜂產(chǎn)生的分蜂流明顯大于單雄受精的蜂王產(chǎn)生的分蜂流[17].(2)食物儲(chǔ)存對(duì)蜂群發(fā)展至關(guān)重要，遺傳多樣性增強(qiáng)采集蜂跳舞信號(hào)的傳遞，遺傳基礎(chǔ)多樣性蜂群的采集蜂可以比遺傳基礎(chǔ)單一蜂群中的采集蜂傳遞更多的采集信號(hào)，采集更遠(yuǎn)距離的花粉和花蜜[18]，提高花粉和花蜜的儲(chǔ)存量，進(jìn)而維持蜂群群勢(shì)的能力更強(qiáng).(3)遺傳多樣性使得工蜂的溫度反應(yīng)閾值多樣化，更有利于調(diào)整工蜂個(gè)體的扇風(fēng)行為，調(diào)節(jié)巢溫穩(wěn)態(tài)[19].(4)在單位點(diǎn)性別決定機(jī)制下，遺傳多樣性減少二倍體雄蜂的產(chǎn)生，提高工蜂的產(chǎn)生量，同時(shí)也減輕蜂群的哺育負(fù)擔(dān)[20].(5)增強(qiáng)工蜂的分工專一化，使得工蜂可以更有效地利用不同的采集環(huán)境，抵抗環(huán)境的波動(dòng)，進(jìn)而從環(huán)境中攝取更多資源[21].(6)蜜蜂衛(wèi)生行為是遺傳控制下的復(fù)雜行為，移除病蟲從而為蜂群提供及時(shí)保護(hù)，多雄受精蜂王的蜂群表現(xiàn)出更多、更積極的衛(wèi)生行為，進(jìn)而提高蜂群整體抗病性能[22-23].總之，遺傳多樣性通過增強(qiáng)工蜂的分工專一化、采集能力以及提升蜂群整體對(duì)應(yīng)激因子的抵抗能力，最終有助于蜜蜂健康和蜂群發(fā)展、存活.

3 蜜蜂遺傳多樣性與蜜蜂抗病

社會(huì)性對(duì)疾病流行和傳播的影響是明顯的，在社會(huì)性昆蟲群體中，這種影響愈發(fā)明顯[24].一個(gè)蜂群中的蜜蜂數(shù)量眾多，可達(dá)到5～7萬只，蜂群中蜜蜂的密度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于最擁擠的脊椎動(dòng)物.雖然蜜蜂的密集型群居特性為疾病流行創(chuàng)造了條件，但基于遺傳多樣性的多種行為及分子機(jī)制在蜂群抵御各種病害的過程中發(fā)揮了重要的作用.在此過程中，各種病原體與寄主協(xié)同進(jìn)化，蜜蜂遺傳多樣性則有利于蜂王產(chǎn)生具有多重耐受性基因的工蜂后代[25].頗多研究表明蜜蜂遺傳多樣性可以有效抵御細(xì)菌性病原，真菌性病原，病毒性病原和寄生性病害.

Palmer et al[26]在2003年用擬幼蟲芽孢桿菌處理由姐妹蜂王主導(dǎo)的6個(gè)遺傳背景不相關(guān)的蜂群，結(jié)果表明在工蜂后代中，由于父系基因差異性引發(fā)的抗病性顯著不同，進(jìn)一步驗(yàn)證了特異性的遺傳基因?qū)剐曰虻挠绊憴C(jī)制，并表明在病原體的選擇性壓力下，病原體與宿主之間是協(xié)同進(jìn)化的.Tarpy et al[8]在同一年利用姐妹蜂王，分別受精單一雄蜂精液和來自不同蜂群中多個(gè)雄蜂的混合精液，在蜂群中人工接種蜜蜂球囊菌并引發(fā)蜂群表現(xiàn)出白堊病癥狀，結(jié)果表明遺傳多樣性顯著提高幼蟲存活率和工蜂的衛(wèi)生行為，遺傳背景相似蜂群的疾病流行率明顯高于遺傳背景具有差異性的蜂群.之后，Tarpy et al[27]再次針對(duì)遺傳多樣性對(duì)蜜蜂健康的影響進(jìn)行了研究，綜合研究囊狀幼蟲病、白堊病、美洲幼蟲腐臭病和歐洲幼蟲腐臭病，發(fā)現(xiàn)這些疾病在多雄受精蜂群中的活動(dòng)強(qiáng)度顯著低于單雄受精蜂，在遺傳多樣性低的蜂群中檢測(cè)出高患病率，且遺傳多樣性高的蜂群的群勢(shì)(主要體現(xiàn)在蜂群重量、巢脾建造質(zhì)量、巢脾子區(qū)面積等)明顯優(yōu)于遺傳多樣性低的蜂群.蜜蜂數(shù)量正逐漸減少，在蜜蜂眾多疾病中，寄生性病害是蜜蜂健康的最大隱患，有效防治寄生性病害是維持蜜蜂健康的重中之重.Baer et al[28]人為增加地熊蜂(BombusterrestrisL.)蜂王產(chǎn)卵基因型的多樣性，結(jié)果蜂群中的寄生蟲熊蜂短膜蟲(Crithidiabombi)的密度及流行程度大幅度降低[29].據(jù)報(bào)道，近幾年造成蜂群大量損失的寄生性病害還有東方蜜蜂微孢子蟲(Nosemaceranae)和瓦螨，蜂王多雄交配的生物學(xué)特征顯著提高了工蜂后代的遺傳多樣性和抵抗寄生性病害寄生的能力.遺傳基因相似的工蜂后代由于對(duì)寄生蟲引發(fā)的脅迫性表現(xiàn)出相似的反應(yīng)，從而促進(jìn)了寄生蟲在蜂群內(nèi)部的蔓延[30-31].Desai et al[32]的研究進(jìn)一步表明遺傳基因相似的蜂群雖然對(duì)蜜蜂微孢子蟲(Nosemaapis)的抵抗水平與遺傳基因多樣性蜂群相似，但對(duì)減弱東方蜜蜂微孢子蟲的感染危害方面，遺傳基因多樣性組蜂群明顯優(yōu)于遺傳基因相似組蜂群.然而，所有相關(guān)研究幾乎都表明遺傳多樣性只能降低蜂群受危害的程度，并不能完全消除寄生性病害對(duì)蜂群的危害.所以，在未來的研究中，應(yīng)該 對(duì)“遺傳多樣性閾值”進(jìn)行深入研究，確定是否存在某些“遺傳多樣性閾值”可以完全消除寄生蟲對(duì)蜂群的寄生性危害[33].

雖然病毒性病原是引起蜜蜂疾病之一，但目前關(guān)于蜜蜂對(duì)病毒的具體免疫反應(yīng)機(jī)制依然未明晰.眾所周知，蜜蜂病毒的傳播依賴狄氏瓦螨(Varroadestructor)，現(xiàn)今普遍認(rèn)為是蜂群的社會(huì)免疫降低了瓦螨的傳播與繁殖，并在一定程度上間接抑制了病毒對(duì)蜜蜂的感染[32,34].多雄受精蜂王主導(dǎo)的蜂群表現(xiàn)出更多的衛(wèi)生行為，這些衛(wèi)生行為提高了蜂群社會(huì)免疫的能力[22-23]，一定程度上有助于預(yù)防病毒性病原在蜂群中的感染與傳播.

4 遺傳多樣性與蜜蜂對(duì)殺蟲劑敏感性

不同蜂種之間的遺傳差異同樣屬于蜜蜂遺傳多樣性的研究范疇.田間作物使用的殺蟲劑是導(dǎo)致蜜蜂大量減少的原因之一，在眾多殺蟲劑中，新煙堿類農(nóng)藥憑借其特殊的分子結(jié)構(gòu)，對(duì)昆蟲高毒，而對(duì)高等動(dòng)物低毒等一系列優(yōu)點(diǎn)脫穎而出[35].在近十年內(nèi)，新煙堿類農(nóng)藥的使用量越來越多[36].目前使用最廣泛的新煙堿類農(nóng)藥有吡蟲啉(imidacloprid)，噻蟲胺(clothianidin)，噻蟲嗪(thiamethoxam)等.雖然新煙堿類農(nóng)藥在田間花粉花蜜中的殘留水平通常被認(rèn)為是亞致死性水平，但仍然對(duì)蜜蜂的健康產(chǎn)生了多種消極影響，例如損害了蜜蜂生理機(jī)能、學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知能力，采集和歸巢行為[37-38].多種殺蟲劑的聯(lián)合使用，進(jìn)一步對(duì)蜜蜂產(chǎn)生了協(xié)同增效的不利影響.類似的，殺蟲劑與病原體長(zhǎng)期聯(lián)合脅迫也會(huì)對(duì)蜜蜂產(chǎn)生有害影響，從而損傷蜜蜂免疫[39-40].現(xiàn)已有越來越多的證據(jù)表明，農(nóng)藥與其它因素共同作用而引發(fā)CCD，進(jìn)而嚴(yán)重影響蜜蜂的授粉服務(wù)[41-42].

現(xiàn)已有不少研究表明蜜蜂對(duì)農(nóng)藥殘留毒性存在遺傳差異，同一蜂種的不同蜂群之間，或是不同蜂種之間，均表現(xiàn)出遺傳差異.意大利蜜蜂不同蜂群之間對(duì)吡蟲啉的LD50值有顯著差異，噻蟲嗪對(duì)卡尼鄂拉蜂(Apismelliferacarnica)產(chǎn)生的LD50值高于歐洲黑蜂(Apismelliferamellifera)和意大利蜜蜂的LD50值[43].歐洲黑蜂蜂王對(duì)噻蟲嗪和噻蟲胺農(nóng)藥復(fù)合物慢性毒性的敏感程度高于卡尼鄂拉蜂[44].每只中蜂(ApisceranaceranaFabricius.)飼喂0.1 ng的吡蟲啉可顯著降低其嗅覺學(xué)習(xí)能力[45]， 而每只意蜂飼喂0.12 ng的吡蟲啉不損害其嗅覺學(xué)習(xí)能力[46],可見，中蜂比意蜂對(duì)殺蟲劑更敏感.綜合當(dāng)前研究，多數(shù)研究集中在殺蟲劑對(duì)幼蟲、哺育蜂的亞致死影響，以及農(nóng)藥田間劑量對(duì)成年采集蜂學(xué)習(xí)、記憶、定位及歸巢等行為的影響，涉及農(nóng)藥對(duì)蜂王生產(chǎn)性能影響的研究較少.蜂王主導(dǎo)蜂群遺傳多樣性程度與對(duì)農(nóng)藥抗性之間的關(guān)系值得進(jìn)一步研究.

5 蜜蜂基因型、表型和應(yīng)激因子的交互關(guān)系

蜜蜂基因型、表型和應(yīng)激因子之間相互作用，自人類社會(huì)以來，大量的人類活動(dòng)造成地球環(huán)境發(fā)生改變.隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，都市化水平提高，商業(yè)用地、農(nóng)業(yè)用地、工業(yè)用地的占地面積逐年增加，導(dǎo)致蜜蜂生境破碎或喪失.另外，養(yǎng)蜂人之間進(jìn)行蜂王貿(mào)易，引入外來蜜蜂亞種，在帶來收益的同時(shí)，也造成了非本土蜜蜂與本土蜜蜂間的雜交滲透，導(dǎo)致在自然選擇過程中形成的有價(jià)值基因的損失.例如由于意大利蜜蜂和卡尼鄂拉蜂深受養(yǎng)蜂人的喜歡，在歐洲隨著這兩類蜜蜂亞種的高密度養(yǎng)殖，幾乎完全取代了歐洲黑蜂[47]，同時(shí)，蜂王貿(mào)易也促進(jìn)了生物性致病因子的傳播，這都在一定程度上減少了蜜蜂種群遺傳多樣性，減少蜂群中工蜂后代的基因型，對(duì)工蜂生理和行為反應(yīng)、任務(wù)分工等造成不利影響，進(jìn)而降低蜂群整體的生物學(xué)和生產(chǎn)性能.

圖1 蜜蜂基因型、表型和應(yīng)激因子的交互關(guān)系Fig.1 Interaction between genotype, phenotype and stress factors in honeybees

6 小結(jié)與展望

長(zhǎng)期以來，蜜蜂一直是社會(huì)性狀進(jìn)化和行為表現(xiàn)研究的模式生物，尤其是繼蜜蜂基因組測(cè)序之后，更加方便人們對(duì)與行為性狀相關(guān)基因的研究.蜜蜂遺傳多樣性有利于蜜蜂對(duì)外界應(yīng)激因子做出有效防御，從而減輕多種應(yīng)激因子的危害，降低蜂群患病率，促進(jìn)蜂群健康發(fā)展.遺傳多樣性在蜜蜂抵御外界應(yīng)激因子脅迫過程中所起作用的分子機(jī)理仍有待進(jìn)一步研究.此外，在人為壓力和環(huán)境壓力等多重壓力下，蜜蜂遺傳多樣性遭受嚴(yán)重威脅，必須引起人們的高度關(guān)注.遺傳多樣性是生物多樣性的核心，保護(hù)生物多樣性旨在保護(hù)遺傳多樣性，在未來遺傳多樣性保護(hù)管理措施中，應(yīng)加強(qiáng)法律保護(hù)，為本土蜜蜂種群設(shè)立特定保護(hù)區(qū)，禁止進(jìn)口和使用進(jìn)口蜂種，合理設(shè)置蜂場(chǎng)，為蜜蜂提供健康、可靠、資源富集的環(huán)境體系，在農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)生產(chǎn)力發(fā)展與蜜蜂棲息地之間保持平衡.蜂群健康與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展相輔相成，要在保護(hù)蜜蜂健康的基礎(chǔ)上促進(jìn)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展，創(chuàng)造出雙贏的效益.