李曉梅 陳萌 張鐵剛 董梅 苗良 王凌云 劉維祥 楊潔 孫美平 陳麗娟 黃芳 盧莉

開展疫苗免疫成功率監(jiān)測的主要目的，是考核和評價疫苗、接種的質量和效果，并作為調整免疫規(guī)劃的依據[1]?，F匯總1987-2014年北京市百白破疫苗基礎免疫后抗體水平監(jiān)測結果，分析結果波動的影響因素，提升對歷史資料的科學利用與評價。

1 材料與方法

1.1資料來源 監(jiān)測數據來源于1987-2014年歷次北京市百白破疫苗基礎免疫后血清學監(jiān)測結果。

1.2監(jiān)測周期與采樣變化 北京市自1987年開始百白破疫苗基礎免疫后抗體水平監(jiān)測，每年1次，在城區(qū)、近郊區(qū)、遠郊區(qū)各選擇1個區(qū)，每個區(qū)選擇嬰兒35人在完成百白破疫苗基礎免疫3劑次后1～2個月時，采集末梢血，分別檢測白喉和百日咳抗體水平。自1996年開始同時監(jiān)測破傷風抗體。2003年開始每年監(jiān)測2個區(qū)，在城郊(城區(qū)和近郊區(qū))和遠郊區(qū)各選擇1個區(qū)。2007年及以后改為每兩年監(jiān)測一次。2003年及以前血標本采集方式為末梢血，2014年后所有標本均采集靜脈血。

1.3檢測方法和判斷標準

1.3.1白喉抗體： 2003年及以前，采用間接血凝法檢測凝集抗體，判斷標準為：≥0.01 IU/mL為陽性，即為保護水平。標準白喉抗毒素、致敏血球與對照血球，均由中國藥品生物制品檢定所提供。2004年及以后使用ELISA方法檢測白喉IgG抗體，判斷標準為：≥0.1 IU/mL為陽性，即為保護水平。2004年使用德國IBL公司生產的白喉ELISA試劑盒；2006-2014年，使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司的ELISA classic白喉IgG試劑盒。

1.3.2百日咳抗體： 2004年及以前，采用凝集試驗(微量法)檢測，血清抗體滴度≥1∶320則判為具有保護水平。百日咳菌液和標準血清由北京生物制品研究所和中國藥品生物制品檢定所提供。2012年及以后，使用ELISA檢測百日咳毒素IgG抗體，2012年使用德國歐盟ELISA百日咳 PT(IgG)試劑盒，判斷標準為：≥28 IU/mL為陽性，2014年使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產的賽潤ELISA classic百日咳毒素IgG試劑盒，判斷標準為：≥30 IU/mL為陽性。

1.3.3破傷風抗體： 2007年及以前，采用間接血凝法檢測，判斷標準為：≥0.01 IU/mL為陽性即達到保護水平。破傷風抗毒素標準品、致敏血球和對照血球分別由中國藥品生物制品檢定所和北京生物制品研究所提供。2009年及以后，使用ELISA方法檢測破傷風IgG抗體，使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產的賽潤ELISA classic破傷風IgG試劑盒，>0.1 IU/mL為陽性，即為保護水平。以上所有檢測均由北京市疾病預防控制中心完成。

1.4統(tǒng)計學方法 百白破疫苗基礎免疫后抗體水平監(jiān)測資料，進行描述性分析。使用WPS Office 2016的WPS表格建立數據庫，計算各監(jiān)測年白喉抗體、百日咳抗體、破傷風抗體的陽性率和平均抗體濃度。

2 結果

2.1白喉抗體水平 白喉基礎免疫后抗體水平監(jiān)測始于自1987年，已進行23次(表1)，陽性率均在97%～100%。抗體濃度各次監(jiān)測波動較大，1987-2001年抗體濃度在0.38～1.07 IU/mL，2002年以后都在1 IU/mL以上，各年抗體監(jiān)測結果都高于保護水平0.1 IU/mL。

2.2百日咳抗體水平 百日咳基礎免疫后抗體水平監(jiān)測起自1987年，共進行19次(表1)。陽性率波動較大，1990年以前較低，為42.86%～77.13%，1991-2004年陽性率維持較穩(wěn)定，除1997年為76.83%以外，其余年均在84.03%以上，2012-2016年陽性率波動更大，為8.14%～81.03%。2004年以前抗體水平以幾何平均滴度顯示，波動在1∶144～1∶3 387；2012年以后為抗體濃度，波動在33.18～72.60 IU/mL。

2.3破傷風抗體水平 破傷風基礎免疫后抗體水平監(jiān)測始自1996年，已進行14次(表1)，陽性率都在98%以上。雖然抗體濃度各次監(jiān)測波動較大，在0.49～9.98 IU/mL，各年抗體監(jiān)測結果都高于保護水平0.1 IU/mL。

表1 1987-2014年北京市百白破疫苗基礎免疫后抗體水平監(jiān)測結果

注：A為1991年以前使用百日咳、白喉、破傷風混合制劑，1991年及以后使用吸附百白破聯合疫苗;B為2006年及以后使用吸附無細胞百白破疫苗；C為2003年及以前采用間接血凝法檢測凝集抗體，2004年及以后使用ELISA方法檢測白喉IgG抗體；D為2004年及以前采用凝集試驗(微量法)檢測凝集抗體，2012年及以后使用ELISA檢測百日咳毒素IgG抗體；E為2007年及以前采用間接血凝法檢測凝集抗體，2009年及以后使用ELISA方法檢測破傷風IgG抗體。

2.4抗體波動影響因素 1991年以前使用百日咳、白喉、破傷風混合制劑，1991及以后使用吸附百白破聯合疫苗，疫苗轉換后白喉、百日咳的抗體濃度和百日咳的陽性率均較前有所升高。使用ELISA檢測方法后白喉、破傷風的抗體濃度較凝集法有升高。凝集法和ELISA方法檢測的百日咳抗體不同，不能直接比較(表2)。

表2 白喉抗體、百日咳、破傷風抗體波動的影響因素

3 討論

3.1從歷次白喉監(jiān)測結果看，抗體陽性率變化不大，但抗體水平波動較大，分析影響因素有以下幾方面。首先，疫苗變化影響抗體水平，如北京市1991年使用吸附百白破疫苗，使用吸附劑可以增強抗原的免疫原性，因此1991年以后白喉抗體水平較20世紀80年代有所提高[2]。其次，檢測方法變化可導致抗體水平波動。2003年以前的白喉抗體檢測方法采用間接血凝法，間接血凝法使用的致敏血球批次間差異較大，檢測結果由人工主觀判定,導致這種檢測方法的重復性和穩(wěn)定性較差，另外由于血凝法的單位與國際單位不同,其僅能反映抗體高低的變化趨勢[3]，2004年以后，北京市逐漸采用ELISA方法檢測白喉抗體。檢測方法改變導致檢測結果的最大值也發(fā)生了變化，白喉抗體的最大值從>1.0 IU/mL變?yōu)?2.0 IU/mL，抗體平均水平也明顯升高。2014年檢測最大值白喉抗體為>20.0 IU/mL，其抗體平均值明顯高于既往歷年監(jiān)測結果。由此可見，在比較歷年監(jiān)測結果時，除了要考慮接種對象、疫苗變化外，還要考慮檢測方法、試劑、陽性標準的變化、檢測結果最大值和最小值的處理，這都會直接影響監(jiān)測結果的分析和利用。

3.2破傷風抗體水平的變化與白喉相似，2007年及以前破傷風抗體的檢測方法都采用間接血凝法，也可造成不同監(jiān)測年度之間結果波動較大[4]。2009年后，采用ELISA方法檢測破傷風抗體，檢測結果的最大值從>1.0 IU/mL變?yōu)?5.0 IU/mL，抗體平均水平也明顯升高。2014年檢測最大值為40.239 IU/ml，當年的抗體平均值明顯高于既往歷年監(jiān)測結果。

3.32006年以前，北京市使用全細胞百白破疫苗，采用微量凝集試驗檢測百日咳抗凝集原抗體(抗-AGGs)水平[5]。2006年以后，使用無細胞百白破疫苗替代全細胞百白破疫苗，我國自主研發(fā)的無細胞百日咳疫苗采用的是共同提取有效組分的共純化工藝，以百日咳毒素(PT)和絲狀血凝素(FHA)為主要有效成分[6]。由于凝集原不是主要成分，微量凝集試驗不適用于評價接種無細胞百日咳疫苗產生的抗體水平，檢測方法改為ELISA方法檢測百日咳毒素的IgG抗體。2012-2014年進行了2次監(jiān)測，百日咳抗體陽性率和抗體水平波動較大?？紤]原因可能由于檢測試劑不同、陽性標準不同、疫苗批次間PT含量不一致等有關。2012年使用的德國歐盟ELISA百日咳 PT(IgG)試劑盒，≥28 IU/mL為陽性，而2014年使用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產的賽潤ELISA classic百日咳毒素IgG試劑盒，≥30 IU/ml為陽性,這會造成前后兩年結果的差異。我國共純化工藝生產的無細胞百日咳疫苗不易進行質量控制[6]，中國藥品生物制品檢定所曾對國內幾家生產廠家送檢的無細胞百日咳疫苗原液進行PT和FHA含量測定，結果顯示同一廠家送檢的每批原液之間PT和FHA含量不一致[7,8]，疫苗抗原含量的差異也可以造成抗體水平的差異。

綜上，在評價、利用歷史監(jiān)測數據時，要考慮檢測方法、試劑、檢測的目標抗體、陽性標準、極值的處理等方面的變化對標本檢測結果的干擾后，再評價疫苗、接種質量和免疫效果,而不能簡單的僅由抗體水平升高值得出疫苗免疫效果提高的結論，從而提升對歷史監(jiān)測資料的科學利用與評價水平。