蔡志杰　許奎

摘要：通過(guò)對(duì)目標(biāo)豬場(chǎng)實(shí)施豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗的全面免疫，配合定期的血清學(xué)檢測(cè)，對(duì)3個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行了豬偽狂犬病凈化研究。在凈化過(guò)程中，對(duì)3個(gè)豬場(chǎng)的生產(chǎn)公母豬群、后備豬群進(jìn)行血檢，對(duì)陽(yáng)性豬、可疑豬實(shí)施淘汰，后備豬必須是陰性才留作種用，并輔以良好的飼養(yǎng)管理，最終使整個(gè)種豬群偽狂犬病的陽(yáng)性數(shù)為零，表明利用偽狂犬基因缺失的弱毒疫苗對(duì)生產(chǎn)的公母群、后備豬群進(jìn)行全面免疫接種并配合血檢淘汰陽(yáng)性種豬的方法來(lái)凈化豬場(chǎng)是可行的。

關(guān)鍵詞：豬偽狂犬病；免疫；檢測(cè)；凈化

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2018）05-0012-02

偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起家畜和多種野生動(dòng)物感染的一種急性傳染病，仔豬感染PRV后表現(xiàn)有高熱、食欲廢絕、呼吸困難、流涎、嘔吐、腹瀉、神經(jīng)癥狀，2周齡內(nèi)仔豬死亡率高達(dá)100%；懷孕母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎和木乃伊胎；母豬返情、屢配不孕，公豬睪丸炎[1]。豬感染該病毒后可終身帶毒，并向外排毒，呈現(xiàn)免疫抑制，導(dǎo)致豬體免疫耐受，因此在種豬階段就應(yīng)凈化根除。

偽狂犬病的控制與凈化工作在很多發(fā)達(dá)國(guó)家早已開展，許多國(guó)家實(shí)施的強(qiáng)制性偽狂犬病凈化項(xiàng)目已取得成功，我國(guó)也有集約化豬場(chǎng)成功凈化PR的案例[2]。近年來(lái)，由于疫苗使用缺乏科學(xué)性等原因，導(dǎo)致甘肅省武威市涼州區(qū)PRV野毒感染率較高，為降低豬群感染率，提高養(yǎng)殖效益，并參照國(guó)外應(yīng)用基因缺失苗凈化豬偽狂犬病的成功經(jīng)驗(yàn)[3，4]，采取改變免疫程序，使用高效力基因缺失弱毒疫苗免疫、定期檢測(cè)、淘汰陽(yáng)性種豬等綜合性凈化措施，在我區(qū)三個(gè)規(guī)模較大的養(yǎng)豬場(chǎng)實(shí)施了PRV凈化工作，取得了良好的凈化效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇 選擇3個(gè)規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化程度較高的養(yǎng)豬場(chǎng)，分別稱作A豬場(chǎng)、B豬場(chǎng)、C豬場(chǎng)，養(yǎng)殖情況如下：A豬場(chǎng)存欄生產(chǎn)母豬270頭，B豬場(chǎng)存欄生產(chǎn)母豬220頭，C豬場(chǎng)存欄生產(chǎn)母豬190頭。在實(shí)施豬偽狂犬病凈化前，這3個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)按常規(guī)方法進(jìn)行免疫。

1.1.2 試劑與儀器 偽狂犬病gE基因缺失弱毒苗購(gòu)自美國(guó)一家疫苗生產(chǎn)公司；豬偽狂犬gE-ELISA抗體鑒別試劑盒購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。美靈SJ-8酶標(biāo)檢測(cè)儀，F(xiàn)innpieptte Freshman移液器，高速離心機(jī)，一次性獸用采血器。

1.2 方法

1.2.1 豬血清的采集 按要求定期采集各場(chǎng)豬血清，離心后編號(hào)保存。

1.2.2 檢測(cè)方法 按照ELISA試劑盒的操作說(shuō)明，進(jìn)行豬偽狂犬病感染抗體的鑒別診斷。

1.3 免疫程序

各類豬群的免疫均按照疫苗的標(biāo)準(zhǔn)劑量進(jìn)行免疫。對(duì)于經(jīng)產(chǎn)母豬和公豬，從未做過(guò)豬偽狂犬病基因缺失弱毒苗的，在試驗(yàn)開始時(shí)做第一次免疫，4周后做第2次免疫，以后每隔4個(gè)月免疫1次。后備公、母豬，第10周齡第1次免疫，第14周第2次免疫，第20～26周齡第3次免疫，以后每4個(gè)月免疫1次。引進(jìn)后備公、母豬：引進(jìn)的第2天免疫1次，4周后作第2次免疫，以后每4個(gè)月免疫1次。

1.4 管理

對(duì)于后備公、母豬執(zhí)行3周齡早期斷奶。改善飼養(yǎng)管理，提供優(yōu)質(zhì)、科學(xué)和充足的營(yíng)養(yǎng)飼料，滿足機(jī)體營(yíng)養(yǎng)需求；做好清潔、消毒工作，及時(shí)清理糞便，定期用高效消毒藥進(jìn)行消毒；采用全進(jìn)全出及同日齡階段飼養(yǎng)，并設(shè)置專門的病豬隔離圈舍。豬場(chǎng)嚴(yán)格禁止飼養(yǎng)犬、貓及家禽，杜絕犬、貓、雞及鳥類進(jìn)入豬場(chǎng)，定期進(jìn)行場(chǎng)內(nèi)滅鼠、滅蠅工作。

1.5 凈化方案

（1）A豬場(chǎng)、B豬場(chǎng)、C豬場(chǎng)從2015年1月份開始使用豬偽狂犬基因缺失弱毒苗（gE缺失），進(jìn)行常規(guī)免疫，從同年5月份開始對(duì)3個(gè)豬場(chǎng)種公豬、生產(chǎn)母豬分批采血檢測(cè)，逐步開始分群，將野毒感染血清學(xué)陽(yáng)性豬與健康陰性豬分開飼養(yǎng)。

（2）逐步淘汰野毒感染血清陽(yáng)性生產(chǎn)母豬，陽(yáng)性率大于15%的分批淘汰，小于15%的一次性淘汰。

（3）對(duì)于更新后備豬群，在選留前進(jìn)行血檢，檢測(cè)陰性豬留用。種豬群凈化后連續(xù)2次抽樣血檢，在經(jīng)過(guò)全面血檢全部淘汰野毒感染血清陽(yáng)性及可疑者后，生產(chǎn)豬群以隨機(jī)抽樣的方式連續(xù)2次抽樣血檢。

2 結(jié)果與分析

2.1 生產(chǎn)種豬群偽狂犬病野毒感染血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

從A、B、C 3個(gè)豬場(chǎng)共檢測(cè)生產(chǎn)母豬680頭，檢出陽(yáng)性豬52頭、可疑豬68頭，陽(yáng)性率為7.64%；陰性豬560頭，陰性率為82.35%；檢測(cè)種公豬50頭，檢出陽(yáng)性豬5頭，可疑5頭，陽(yáng)性率為10%， 陰性豬40頭，陰性率為80%。

2.2 后備母豬偽狂犬病野毒感染血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

檢測(cè)后備母豬1 025頭，檢出陽(yáng)性豬15頭，可疑豬15頭，陽(yáng)性率1.46%，陰性豬1 738頭，陰性率97%。

2.3 豬群凈化后偽狂犬病野毒感染血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)對(duì)豬場(chǎng)2年的凈化工作，對(duì)檢出的野毒感染血清學(xué)陽(yáng)性豬逐步分批次或1次性淘汰，3個(gè)豬場(chǎng)嚴(yán)格的按照制定的免疫程序，使用豬偽狂犬病基因缺失疫苗進(jìn)行免疫接種。隨著對(duì)豬場(chǎng)豬偽狂犬病凈化的不斷深入，至2016年12月底，通過(guò)連續(xù)2次抽查檢測(cè)，3個(gè)豬場(chǎng)的檢測(cè)結(jié)果均為野毒感染血清學(xué)檢測(cè)陰性，達(dá)到了預(yù)期制定的凈化目標(biāo)。凈化后A、B、C 3個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)第1次檢測(cè)種公母豬360頭、第2次檢測(cè)360頭，檢測(cè)后備種豬270頭，檢測(cè)結(jié)果均為陰性。

3 小結(jié)

通過(guò)高質(zhì)量豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗的全面應(yīng)用和定期的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，首先將生產(chǎn)公豬群凈化，然后將各場(chǎng)生產(chǎn)母豬群中陽(yáng)性者逐步淘汰，嚴(yán)格執(zhí)行全進(jìn)全出的管理方法，全群嚴(yán)格按時(shí)免疫，對(duì)更新的后備豬群嚴(yán)格血檢，陰性豬留作種用。通過(guò)循環(huán)更新淘汰，最終使生產(chǎn)種公母豬全部?jī)艋癁殛幮载i群。在接下來(lái)的2次連續(xù)抽檢結(jié)果全部為陰性，可以看出，3個(gè)豬場(chǎng)凈化偽狂犬病是成功的。

本試驗(yàn)證明豬群偽狂犬病病毒及野毒在我區(qū)豬場(chǎng)中廣泛存在，證實(shí)了利用ELISA檢測(cè)方法在凈化豬群偽狂犬病過(guò)程中的準(zhǔn)確性，為今后豬偽狂犬病的防控提供了真實(shí)可靠的試驗(yàn)數(shù)據(jù)和研究方法[5]。依據(jù)此研究方法進(jìn)行豬群抗體檢測(cè)、野毒鑒定、淘汰帶毒種豬、培育健康種豬群，結(jié)合高質(zhì)量的基因缺失弱毒疫苗全面免疫接種、定期消毒、分區(qū)隔離管理、全進(jìn)全出等綜合防制技術(shù)來(lái)凈化豬場(chǎng)，是控制并逐漸消滅豬偽狂犬病的有效途徑[6]。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，待豬群陽(yáng)性率下降至10%～15%以下時(shí)，進(jìn)行全面淘汰陽(yáng)性種豬；更新留用后備母豬為陰性方可留為種用；豬群應(yīng)在檢測(cè)結(jié)果全部為陰性后，隔2～3個(gè)月作復(fù)檢2次，結(jié)果全部為陰性后，方可認(rèn)為豬偽狂犬病在該豬群得到凈化[7]。

規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病的徹底凈化和根除，是一項(xiàng)長(zhǎng)期的系統(tǒng)工程，檢測(cè)技術(shù)和防控凈化技術(shù)還需要不斷的改進(jìn)和完善。我區(qū)作為全國(guó)的生豬養(yǎng)殖大區(qū)，豬場(chǎng)豬群中的感染率較高，必須采取科學(xué)有效的措施加以防制，減少給養(yǎng)豬業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失[8]。目前正逐步將此方法向全區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)進(jìn)行技術(shù)推廣，不斷的提升豬群的健康水平，促進(jìn)我區(qū)養(yǎng)豬業(yè)的健康和諧發(fā)展。

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