夏廣清，臧 皓，張露云，3，劉 偉，薛長(zhǎng)松

鹿角是我國(guó)常用中藥之一，藥典規(guī)定鹿角為鹿科動(dòng)物馬鹿和梅花鹿已骨化的角或據(jù)茸后翌年春季脫落的角基.研究表明，鹿角的藥效類(lèi)似于傳統(tǒng)的珍貴藥材鹿茸，但是藥效相對(duì)比較溫和，在一定意義上，為藥物替代提供了一個(gè)很好的選擇方向［1-2］.研究表明，鹿角中含有氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)等活性物質(zhì)，對(duì)人體沒(méi)有毒副作用［3］，并具有免疫調(diào)節(jié)、抗癌、抗疲勞、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗應(yīng)激、抗氧化、降血糖、抗骨質(zhì)疏松、活血化瘀及治療乳腺增生的療效［4-7］.由于鹿角具有良好的藥用價(jià)值，使其成為我國(guó)醫(yī)療保健之良藥，但是由于人們對(duì)鹿角的不夠重視，使得其研究和開(kāi)發(fā)利用的深度都比較有限，嚴(yán)重阻礙了鹿角產(chǎn)業(yè)的發(fā)展.因此豐富的鹿角資源亟待深入研究探索.

本研究采用水提法和醇提法對(duì)梅花鹿角成分進(jìn)行提取，對(duì)其抗氧化作用進(jìn)行研究，為進(jìn)一步促進(jìn)梅花鹿角產(chǎn)業(yè)的開(kāi)發(fā)，更好利用梅花鹿角這一傳統(tǒng)中藥提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 試劑與耗材

鹿茸及鹿角由通化市東昌區(qū)王馨梅花鹿坊提供，ABTS試劑盒（江蘇碧云天生物技術(shù)研究所），其余試劑為分析純.

1.2 方法

（1）成分含量測(cè)定.取不同鹿產(chǎn)品100g，干燥，粉碎，得到梅花鹿角及鹿茸粗粉，將粗粉用超微粉碎機(jī)粉碎，過(guò)400目篩，得梅花鹿茸及鹿角超微粉的粒徑，用于成分含量測(cè)定［8］.

（2）抗氧化實(shí)驗(yàn)研究.鹿茸、鹿角粉各取2g，分別加入20mL蒸餾水和甲醇，水煎煮4h，甲醇回流提取4h后減壓抽濾得濾液，水提取液于水浴鍋上蒸干，甲醇提取物蒸干溶劑，稱(chēng)重，用于抗氧化實(shí)驗(yàn)研究.

（3）鹿茸及鹿角水提取物體外抗氧化實(shí)驗(yàn)研究.分別配制5～30mg/mL不同濃度鹿茸及鹿角水提取物，超氧陰離子自由基清除率采用鄰苯三酚自氧化法進(jìn)行測(cè)定，羥自由基清除率采用FeSO-4水楊酸法.

（4）鹿茸及鹿角水提取物及醇提取物ABTS實(shí)驗(yàn).參照文獻(xiàn)方法［9］，取5μL樣品加入到96孔板中，加入200μL ABTS自由基工作液，混勻，置暗處反應(yīng)20min.用酶標(biāo)儀在734nm處測(cè)定OD值.每份樣品平行3次，取平均值，計(jì)算出抑制率.

2 結(jié)果與分析

2.1 鹿茸及鹿角成分含量比較分析

將鹿茸、鹿角經(jīng)干燥、粉碎等處理后，測(cè)定成分含量，結(jié)果見(jiàn)表1.

表1 鹿茸及鹿角成分含量

從表1可以看出，鹿角中多肽、鈣、鐵、鋅和錳含量高于鹿茸，尤其是鋅和鈣含量，分別比鹿茸高87.2%和40.94%（同一品種間差異不顯著）.此外，鹿角中還含有少量的多糖和氨基酸，推測(cè)鹿角的溫腎補(bǔ)陽(yáng)作用可能與這些微量的物質(zhì)有關(guān)［2］.

2.2 鹿茸及鹿角水提取物對(duì)DPPH、超氧陰離子自由基和羥自由基清除率的影響

不同濃度鹿茸及鹿角水提取物對(duì)DPPH、超氧陰離子自由基和羥自由基清除率不同，總體而言，鹿角對(duì)自由基清除能力低于鹿茸，并且沒(méi)有呈現(xiàn)出劑量依賴(lài)效應(yīng)（見(jiàn)圖1～3）.

圖1 鹿茸及鹿角提取物對(duì)DPPH清除率

圖2 鹿茸及鹿角提取物對(duì)超氧陰離子自由基清除率

圖3 鹿茸及鹿角提取物對(duì)羥自由基清除率

從圖1～3可以看出，鹿角提取液濃度超過(guò)25mg/mL對(duì)DPPH清除率最高為24.58%，并且高于同等濃度下鹿茸提取物對(duì)DPPH清除率；對(duì)超氧陰離子自由基清除率鹿角提取物在10mg/mL時(shí)達(dá)到最高，為26.05%，與同等濃度下鹿茸對(duì)超氧陰離子自由基清除率（26.34%）基本相同，而對(duì)羥自由基清除率則兩者均在5mg/mL濃度下效果最好，為23.62%.對(duì)比體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知，相比于鹿茸而言，鹿角抗氧化值較低，可能是鹿角產(chǎn)品纖維化高，大部分的營(yíng)養(yǎng)成分不能被提取出來(lái)，而樣品濃度增加使雜質(zhì)含量增加，導(dǎo)致吸光值的減小.

2.3 鹿茸及鹿角水提取物及甲醇提取物ABTS實(shí)驗(yàn)研究

為進(jìn)一步探討鹿角抗氧化作用的藥理作用的有效物質(zhì)，在獲得水提取物不同濃度對(duì)自由基清除的基礎(chǔ)上，以甲醇為溶劑，對(duì)鹿茸及鹿角有效成分進(jìn)行提取，采用ABTS法比較分析0～10mg/mL濃度范圍內(nèi)兩者抗氧化效果，結(jié)果見(jiàn)圖4.

圖4 鹿茸鹿角水提取物及醇提取物ABTS抗氧化活性比較分析

從圖4可以看出，鹿茸和鹿角的甲醇提取物為10mg/mL時(shí)，有明顯的抑制活性，抑制率均超過(guò)50%，并且鹿角醇提取物抗氧化活性表現(xiàn)出一定的劑量依賴(lài)效應(yīng).

3 討論

鹿角是完全骨化的實(shí)心角，其中無(wú)機(jī)元素是其藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，鹿角的藥理活性與其中含量豐富的無(wú)機(jī)元素密不可分.研究者通過(guò)對(duì)梅花鹿角無(wú)機(jī)元素的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，梅花鹿角中鈣、鎂、磷的含量非常高，同時(shí)富含鐵、銅、鋅、錳等必需微量元素［4］.此外，梅花鹿角中還含有豐富的氨基酸，張德昌等以梅花鹿角為材料，測(cè)定其總氨基酸含量達(dá)30.24%［10］.對(duì)梅花鹿角藥理作用研究表明，梅花鹿角可通過(guò)提高機(jī)體抗氧化能力，清除衰老機(jī)體產(chǎn)生過(guò)多的自由基，抑制機(jī)體組織、細(xì)胞的抗氧化過(guò)程，使機(jī)體的各項(xiàng)生命體征得到改善，從而延緩衰老［11-12］.

本研究以鹿角為實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行比較分析研究，結(jié)果表明梅花鹿角中多肽及無(wú)機(jī)元素鈣、鐵、鋅及錳含量比較豐富，這一結(jié)果與前人的報(bào)道基本一致.體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鹿角醇提取物抗氧化活性較高，但其有效成分及其作用機(jī)制還需進(jìn)一步探討.參考文獻(xiàn)：

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