王偉　丁仁奎　李清艷　祁妍敏

中圖分類號(hào) R969.1；R917 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2018）02-0194-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.02.13

摘 要 目的：建立同時(shí)測(cè)定人血漿中卡馬西平、文拉法辛、羅格列酮和硝苯地平濃度的方法。方法：血漿樣品經(jīng)甲醇（含0.1%甲酸）沉淀蛋白后，以鹽酸吡格列酮為內(nèi)標(biāo)，采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定。色譜柱為Waters ACQUITY UPLC HSS C18，流動(dòng)相為含0.01%甲酸的水溶液-含0.01%甲酸的甲醇溶液（梯度洗脫），流速為0.3 mL/min，柱溫為50 ℃，進(jìn)樣量為5 μL；采用電噴霧離子源，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行正離子掃描，用于定量分析的離子對(duì)分別為m/z 237.00→194.05（卡馬西平）、m/z 278.20→58.10（文拉法辛）、m/z 358.08→135.04（羅格列酮）、m/z 347.15→315.17（硝苯地平）、m/z 357.09→134.06（內(nèi)標(biāo)）。結(jié)果：卡馬西平、鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮、硝苯地平血藥濃度的線性范圍分別為2.00～2 000.00、2.12～2 120.00、2.00～2 000.00、2.04～1 020.00 ng/mL（r分別為0.995 9、0.990 5、0.991 5、0.991 0，n=5），最低檢測(cè)限分別為0.200、0.106、0.100、1.020 ng/mL；日內(nèi)、日間RSD均小于15%，相對(duì)誤差的絕對(duì)值小于15%；提取回收率為65.66%～96.36%（RSD<15%，n=5），基質(zhì)效應(yīng)為80.99%～114.33%。采用該法測(cè)得2例癲癇患者體內(nèi)卡馬西平的血藥濃度分別為（1 500.41±169.11）、（1 159.01±59.24）ng/mL（RSD分別為11.27%、5.60%，n=3），2例高血壓患者體內(nèi)硝苯地平的血藥濃度分別為（14.68±1.92）、（21.18±3.59）ng/mL（RSD分別為16.98%、13.10%，n=3）。結(jié)論：該方法操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，靈敏度、準(zhǔn)確度高，可用于上述藥物的血藥濃度監(jiān)測(cè)及藥動(dòng)學(xué)研究。

關(guān)鍵詞 卡馬西平；文拉法辛；羅格列酮；硝苯地平；血藥濃度；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ABSTRACT OBJECTIVE： To develop a method for simultaneous determination of carbamazepine， venlafaxine， rosiglitazone and nifedipine in human plasma. METHODS： UPLC-MS/MS method was adopted to determine plasma sample after precipitated with methanol （containing 0.1% formic acid） using pioglitazone hydrochloride as internal standard. The determination was performed on Waters ACQUITY UPLC HSS C18 column with mobile phase consisted of aqueous solution containing 0.01% formic acid-methanol containing 0.01% formic acid （gradient elution） at the flow rate of 0.3 mL/min. The column temperature was 50 ℃， and sample size was 5 μL. ESI was used for positive ion scanning by multi reaction monitoring mode. The ion pairs for quantitative analysis were m/z 237.00 to 194.05 （carbamazepine）， m/z 278.20 to 58.10 （venlafaxine）， m/z 358.08 to 135.04 （rosiglitazone）， m/z 347.15 to 315.17 （nifedipine）， m/z 357.09 to 134.06 （internal standard）. RESULTS： The liner ranges of carbamazepine， venlafaxine hydrochloride， rosiglitazone hydrochloride and nifedipine were 2.00-2 000.00 （r=0.995 9，n=5）， 2.12-2 120.00（r=0.990 5， n=5）， 2.00-2 000.00（r=0.991 5， n=5） and 2.04-1 020.00（r=0.991 0，n=5） ng/mL； the minimum detection limits were 0.200， 0.106， 0.100， 1.020 ng/mL， respectively. RSDs of inter-day and intra-day were less than 15%. The absolute values of RE were less than 15%. The extraction recoveries were 65.66%-96.36%（RSD%<15%，n=5）， and matrix effects ranged 80.99%-114.33%. The plasma concentrations of carbamazepine in 2 epileptic patients were （1 500.41±169.11）， （1 159.01±59.24） ng/mL（RSD were 11.27%， 5.60%，n=3）. The plasma concentrations of nifedipine in 2 hypertensive patients were （14.68±1.92），（21.18±3.59）ng/mL（RSD were 16.98%， 13.10%，n=3）. CONCLUSIONS： The method is simple， specific， sensitive， accurate and suitable for the monitoring of plasma concentration and pharmacodynamic study of above drugs.

KEYWORDS Carbamazepine； Venlafaxine； Rosiglitazone； Nifedipine； Plasma concentration； UPLC-MS/MS

卡馬西平是治療簡(jiǎn)單部分性和復(fù)雜部分性癲癇的首選藥物，但其安全范圍小、有效劑量個(gè)體差異大，易引起不良反應(yīng)（多與其環(huán)氧化物有關(guān)），如骨髓抑制、剝脫性皮炎等[1]。文拉法辛是新一代的抗抑郁首選藥，對(duì)各種類型抑郁癥（包括伴有焦慮的抑郁癥）及廣泛性焦慮癥均具有顯著療效，其不良反應(yīng)包括胃腸道反應(yīng)、癔病發(fā)作、出血等[2]。羅格列酮屬于噻唑烷二酮類抗糖尿病藥，被廣泛用于高血糖、高血壓等疾病的治療，但易引起心血管危險(xiǎn)事件、貧血、低血糖等不良反應(yīng)[3]。硝苯地平屬于二氫吡啶類鈣離子拮抗藥，在臨床上主要用于治療高血壓、心絞痛和心律失常等，不良反應(yīng)包括頭痛、頭暈、體位性低血壓、心動(dòng)過(guò)速等[4]。上述4種藥物均為臨床的首選或常用藥物，由于患者的個(gè)體差異或者長(zhǎng)期用藥等因素可能導(dǎo)致不良反應(yīng)的發(fā)生，而個(gè)別不良反應(yīng)（如癔病發(fā)作、低血糖、低血壓、頭暈、頭痛等）容易影響駕駛者（地面和航空）的操作能力，存在引發(fā)重大安全事故的隱患[2-4]。目前有不少研究發(fā)現(xiàn)，一些中藥制劑和保健品普遍存在違規(guī)添加抗癲癇藥、抗糖尿病藥、抗高血壓藥、抗抑郁藥等現(xiàn)象，檢出的藥物包括卡馬西平、羅格列酮、硝苯地平等[5-7]。因此，為了建立快速、靈敏、準(zhǔn)確測(cè)定人血漿中上述各類藥物濃度的方法，本研究在已有文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，首次建立了同時(shí)測(cè)定人血漿中卡馬西平、文拉法辛、羅格列酮和硝苯地平濃度的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS），可用于臨床患者血藥濃度監(jiān)測(cè)及藥動(dòng)學(xué)研究，也可為藥物相關(guān)駕駛安全事故的調(diào)查提供技術(shù)支持。

1 材料

1.1 儀器

AcquityTM UPLC型超高效液相色譜儀（配有二元梯度洗脫泵、自動(dòng)進(jìn)樣器和在線脫氣機(jī)）、AcquityTM TQ- MS型質(zhì)譜儀（配有三重四極桿質(zhì)量分析器）和Masslynx 4.1分析軟件（美國(guó)Waters公司）；BT25S型十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）；SIGMA 3-18K型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)希格瑪公司）；Milli-Q Advantage A10型純水儀（美國(guó)密理博公司）；VORTEX-5型旋渦混合器（江蘇海門(mén)其林貝爾儀器制造有限公司）。

1.2 藥品與試劑

卡馬西平對(duì)照品溶液（美國(guó)Sigma-Aldrich公司，批號(hào)：FN03241402，濃度：1 mg/mL）；鹽酸文拉法辛對(duì)照品（批號(hào)：100543-200401，純度：99.9%）、鹽酸羅格列酮對(duì)照品（批號(hào)：100673-200401，純度：91.3%）、硝苯地平對(duì)照品（批號(hào)：100338-201404，純度：99.9%）和鹽酸吡格列酮對(duì)照品（內(nèi)標(biāo)，批號(hào)：100634-201202，純度：100%）均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；甲醇、甲酸為色譜純，水為去離子水。

1.3 空白血漿

招募6例健康志愿者，于晨起空腹抽取其靜脈血，置于含肝素鈉抗凝劑的離心管中，以2 292×g離心5 min，取上清液置于-20 ℃冰箱中冷凍保存，備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜與質(zhì)譜條件

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Waters ACQUITY UPLC HSS C18（150 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流動(dòng)相：含0.01%甲酸的水溶液（A）-含0.01%甲酸的甲醇溶液（B），梯度洗脫（0～2 min，85%A→30%A；2～6 min，30%A→5%A；6～7 min，5%A；7～7.1 min，5%A→85%A；7.1～10 min，85%A）；流速：0.3 mL/min；柱溫：50 ℃；進(jìn)樣量：5 μL。

2.1.2 質(zhì)譜條件 電噴霧離子源；離子源溫度：120 ℃；去溶劑化溫度：350 ℃；液氮?dú)怏w流速：650 L/h；毛細(xì)管電壓：3.0 kV；采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式掃描，正離子方式檢測(cè)。4個(gè)待測(cè)物和內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品貯備液及混合標(biāo)準(zhǔn)工作液 精密稱取鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮和硝苯地平對(duì)照品各適量，置于5 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮、硝苯地平質(zhì)量濃度分別為0.212、0.200、0.204 mg/mL的對(duì)照品貯備液。精密量取上述各貯備液和卡馬西平對(duì)照品溶液各適量，置于同一量瓶中，用甲醇定容，搖勻，得鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮、硝苯地平、卡馬西平質(zhì)量濃度分別為42.40、40.00、40.80、40.00 μg/mL的混合對(duì)照品溶液；隨后用甲醇稀釋，分別得鹽酸文拉法辛質(zhì)量濃度為21.20、10.60、2.12、1.06、0.424、0.212、0.042 4 μg/mL，鹽酸羅格列酮質(zhì)量濃度為20.00、10.00、2.00、1.00、0.40、0.20、0.04 μg/mL，硝苯地平質(zhì)量濃度為20.40、10.20、2.04、1.02、0.408、0.204、0.040 8 μg/mL，卡馬西平質(zhì)量濃度為20.00、10.00、2.00、1.00、0.40、0.20、0.04 μg/mL的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

2.2.2 內(nèi)標(biāo)溶液 精密稱取內(nèi)標(biāo)對(duì)照品1.02 mg，置于5 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，得質(zhì)量濃度為0.204 mg/mL的內(nèi)標(biāo)貯備液。精密吸取上述貯備液25 μL，置于10 mL量瓶中，用甲醇定容，得質(zhì)量濃度為0.51 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液。

2.3 血漿樣品的處理

精密量取空白血漿200 μL，置于1.5 mL塑料離心管中，加入內(nèi)標(biāo)溶液（0.51 μg/mL）5.0 μL，渦旋混勻30 s，加入甲醇（含0.1%甲酸）500 μL，渦旋混勻60 s，于4 ℃下、以15 493×g離心10 min，取上清液5 μL，進(jìn)樣分析。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 專屬性考察 分別取6個(gè)不同來(lái)源的人空白血漿各200 μL，按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，進(jìn)樣分析，得色譜圖1A；另配制4種待測(cè)物的血漿樣品（卡馬西平、鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮、硝苯地平的質(zhì)量濃度分別為50.00、53.00、50.00、51.00 ng/mL），按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，進(jìn)樣分析，得色譜圖1B；取臨床患者（服用卡馬西平或硝苯地平）的血漿樣品各適量，按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，進(jìn)樣分析，得色譜圖1C、圖1D。結(jié)果顯示，在“2.1”項(xiàng)色譜與質(zhì)譜條件下，卡馬西平、文拉法辛、羅格列酮、硝苯地平和內(nèi)標(biāo)的分離度較好，保留時(shí)間分別為3.58、2.81、2.52、3.81、3.32 min；血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾上述待測(cè)物的測(cè)定。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、定量下限及最低檢測(cè)限的考察 取空白血漿200 μL，精密加入“2.2.1”項(xiàng)下系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液各適量，配制成卡馬西平、鹽酸羅格列酮質(zhì)量濃度均為2 000.00、1 000.00、500.00、100.00、50.00、20.00、10.00、2.00 ng/mL，鹽酸文拉法辛質(zhì)量濃度為2 120.00、1 060.00、530.00、106.00、53.00、21.20、10.60、2.12 ng/mL，硝苯地平質(zhì)量濃度為1 020.00、510.00、102.00、51.00、20.40、10.20、2.04 ng/mL的血漿樣品，按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。以待測(cè)物質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)、待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值（y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行加權(quán)（w=1/x）線性回歸。結(jié)果顯示，卡馬西平、鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮、硝苯地平血藥濃度的線性范圍分別為2.00～2 000.00、2.12～2 120.00、2.00～2 000.00、2.04～1 020.00 ng/mL（r分別為0.995 9、0.990 5、0.991 5、0.991 0，n=5），最低檢測(cè)限分別為0.200、0.106、0.100、1.020 ng/mL，詳見(jiàn)表2。

2.4.3 精密度、準(zhǔn)確度和提取回收率試驗(yàn) 取空白血漿200 μL，分別配制卡馬西平低、中、高質(zhì)量濃度（5.00、80.00、1 200.00 ng/mL），鹽酸文拉法辛低、中、高質(zhì)量濃度（5.30、84.80、1 272.00 ng/mL），鹽酸羅格列酮低、中、高質(zhì)量濃度（5.00、80.00、1 200.00 ng/mL），硝苯地平低、中、高質(zhì)量濃度（5.10、81.60、612.00 ng/mL）的質(zhì)控樣品，各質(zhì)量濃度平行配制5份，按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，進(jìn)樣分析，考察日內(nèi)精密度；連續(xù)測(cè)定3 d，按當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品的實(shí)測(cè)質(zhì)量濃度，考察日間精密度。將實(shí)測(cè)質(zhì)量濃度與理論質(zhì)量濃度進(jìn)行比較，以相對(duì)誤差（RE）來(lái)考察準(zhǔn)確度。將質(zhì)控樣品的峰面積與空白血漿經(jīng)提取后加入系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣所得的峰面積進(jìn)行比較，考察提取回收率。結(jié)果顯示，各質(zhì)控樣品日內(nèi)、日間RSD<15%，RE絕對(duì)值<15%；各待測(cè)物的提取回收率為65.66%～96.36%（RSD<15%，n=5）；內(nèi)標(biāo)的提取回收率為（94.64±4.73）%（RSD=5.01%，n=5），符合生物樣品定量分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則[8]，詳見(jiàn)表3。

2.4.4 基質(zhì)效應(yīng) 取空白血漿適量，按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，加入“2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各適量，配制成卡馬西平低、中、高質(zhì)量濃度（5.00、80.00、1 200.00 ng/mL），鹽酸文拉法辛低、中、高質(zhì)量濃度（5.30、84.80、1 272.00 ng/mL），鹽酸羅格列酮低、中、高質(zhì)量濃度（5.00、80.00、1 200.00 ng/mL），硝苯地平低、中、高質(zhì)量濃度（5.10、81.60、612.00 ng/mL）的血漿樣品，進(jìn)樣分析，記錄峰面積（A）；以空白溶劑[甲醇-水（5 ∶ 2，V/V）]配制相應(yīng)質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣分析，記錄峰面積（B）；基質(zhì)效應(yīng)（%）=A/B×100%。每質(zhì)量濃度平行配制5份。結(jié)果顯示，卡馬西平、鹽酸文拉法辛、鹽酸羅格列酮、硝苯地平的基質(zhì)效應(yīng)分別為84.15%～104.01%、80.99%～111.65%、81.66%～114.33%、81.86%～108.37%（RSD<15%，n=5）；內(nèi)標(biāo)的基質(zhì)效應(yīng)為（87.92±4.77）%（RSD=5.43%，n=5），提示基質(zhì)效應(yīng)不影響待測(cè)物的測(cè)定[8]。

2.4.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 配制卡馬西平低、中、高質(zhì)量濃度（5.00、80.00、1 200.00 ng/mL），鹽酸文拉法辛低、中、高質(zhì)量濃度（5.30、84.80、1 272.00 ng/mL），鹽酸羅格列酮低、中、高質(zhì)量濃度（5.00、80.00、1 200.00 ng/mL），硝苯地平低、中、高質(zhì)量濃度（5.10、81.60、612.00 ng/mL）的質(zhì)控樣品各5份，分別考察其在-20 ℃冰箱中放置20 d、反復(fù)凍融（-20 ℃～室溫）3次、按“2.3”項(xiàng)下方法處理后在儀器自動(dòng)進(jìn)樣室（10 ℃）內(nèi)放置24 h的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，各質(zhì)控樣品在上述條件下穩(wěn)定性良好，RE均小于20%。

2.5 臨床應(yīng)用

采用上述UPLC-MS/MS法測(cè)定4例患者的血藥濃度。其中，2例患者確診為癲癇，1例聯(lián)合使用卡馬西平和丙戊酸鈉治療，1例聯(lián)合使用卡馬西平和苯巴比妥治療（效果不佳，需進(jìn)行用藥調(diào)整）；另外2例患者確診為高血壓，均服用硝苯地平治療（效果不佳，需進(jìn)行用藥調(diào)整）。上述患者均按藥品說(shuō)明書(shū)服用治療藥物。因患者個(gè)體差異致治療前期效果欠佳或?yàn)榻档鸵蛩幬镩L(zhǎng)期服用的蓄積作用引發(fā)潛在不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，采集其靜脈血5 mL進(jìn)行血藥濃度監(jiān)測(cè)。將上述靜脈血置于含肝素鈉抗凝劑的離心管中，以2 292×g離心5 min，取上層血漿，按“2.3”項(xiàng)下方法處理后，進(jìn)樣分析，各樣本重復(fù)測(cè)定3次，以當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其血藥濃度。結(jié)果顯示，2例癲癇患者體內(nèi)卡馬西平的血藥濃度分別為（1 500.41±169.11）、（1 159.01±59.24）ng/mL（RSD分別為11.27%、5.60%，n=3）；2例高血壓患者體內(nèi)硝苯地平的血藥濃度分別為（14.68±1.92）、（21.18±3.59）ng/mL（RSD分別為16.98%、13.10%，n=3）。

3 討論

目前，關(guān)于血液樣本中卡馬西平、文拉法辛、羅格列酮和硝苯地平濃度的檢測(cè)方法已有相關(guān)報(bào)道，主要包括高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）[9-14]。其中，HPLC法的靈敏度較低且所需血漿量較大；LC-MS或LC-MS/MS法的前處理方法較為復(fù)雜，線性范圍較窄，且多適用于單一化合物的檢測(cè)。故本研究在已有文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，建立了同時(shí)測(cè)定上述4種藥物濃度的UPLC-MS/MS法，采用甲醇（含0.1%甲酸）直接沉淀蛋白，相比于文獻(xiàn)報(bào)道的液-液萃取法，本法操作更簡(jiǎn)單、處理周期更短，且盡可能地避免了前處理環(huán)節(jié)過(guò)多所造成的系統(tǒng)誤差，適合于臨床大樣本分析[10，12-13]。本法在流動(dòng)相的有機(jī)相和水相中均加入了0.01%甲酸，此舉可優(yōu)化待測(cè)物色譜峰峰形，避免其拖尾。通過(guò)梯度洗脫，將復(fù)雜的內(nèi)源性物質(zhì)先洗脫下來(lái)，而待測(cè)物在2 min以后出峰，一定程度上降低了基質(zhì)效應(yīng)的影響；同時(shí)，各待測(cè)物分離度良好，有助于分時(shí)段進(jìn)行質(zhì)譜掃描分析，提高了質(zhì)譜的響應(yīng)值。方法學(xué)考察結(jié)果顯示，本法內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)待測(cè)物的干擾小，方法的專屬性好，線性范圍寬于文獻(xiàn)報(bào)道[10，14]；同時(shí)精密度、準(zhǔn)確度良好，可用于臨床生物樣品的定量分析。另外，卡馬西平、文拉法辛和羅格列酮（后兩者為鹽酸鹽）的最低檢測(cè)限均小于1.0 ng/mL，表明該方法靈敏度較高；硝苯地平的最低檢測(cè)限為1.020 ng/mL，雖高于文獻(xiàn)[14]，但仍能滿足臨床監(jiān)測(cè)的要求（硝苯地平在體內(nèi)代謝期的血藥濃度大于1.0 ng/mL）[15]。本研究選用鹽酸吡格列酮為內(nèi)標(biāo)，因其與待測(cè)化合物的結(jié)構(gòu)中均含有氮原子，理化性質(zhì)較為相似，基質(zhì)效應(yīng)和提取回收率考察結(jié)果也表明選用該化合物作為內(nèi)標(biāo)是合適的。

目前，藥品不良反應(yīng)一直是臨床用藥關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。本研究中的4種藥物均是臨床上治療不同疾病的常用藥物，都具有潛在的不良反應(yīng)，患者的個(gè)體差異、長(zhǎng)期用藥等因素均可導(dǎo)致不良反應(yīng)的發(fā)生，因此其血藥濃度的監(jiān)測(cè)顯得十分重要，高效的血藥濃度監(jiān)測(cè)方法為藥物治療的有效性和安全性評(píng)價(jià)提供了技術(shù)保障。本研究采用上述UPLC-MS/MS法對(duì)臨床患者的血液樣本進(jìn)行了血藥濃度測(cè)定，其中1例患者[服用硝苯地平，體內(nèi)血藥濃度為（21.18±3.59）ng/mL]自述服藥期間出現(xiàn)了頭脹、頭痛、面部潮紅等癥狀，醫(yī)師根據(jù)血藥濃度監(jiān)測(cè)結(jié)果和患者當(dāng)時(shí)的血壓情況減少了用藥劑量，3 d后復(fù)查上述癥狀得以減輕。由于本試驗(yàn)只測(cè)定了4例患者的血漿樣品，且僅測(cè)定了其中2種藥物，故仍需增大臨床樣本量進(jìn)一步考察。另外，臨床上其他部分藥品的說(shuō)明書(shū)也指出其不良反應(yīng)會(huì)影響駕駛者的操作能力，如抗組胺類藥物等，故仍有待進(jìn)一步增加待測(cè)藥物，改進(jìn)方法，完善此類藥物血藥濃度監(jiān)測(cè)平臺(tái)的建設(shè)。

綜上所述，本研究建立的同時(shí)測(cè)定人血漿中卡馬西平、文拉法辛、羅格列酮和硝苯地平濃度的UPLC-MS/MS法具有樣品前處理簡(jiǎn)單、快速、專屬性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確度和精密度高等特點(diǎn)，可用于臨床患者的血藥濃度監(jiān)測(cè)和藥動(dòng)學(xué)研究。

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（收稿日期：2017-02-22 修回日期：2017-11-20）

（編輯：張?jiān)拢?/p>