張長(zhǎng)軍

按照《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》和《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床試驗(yàn)室管理方法》的規(guī)定［1-2］，對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室的全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行安裝后，因其對(duì)安裝和使用環(huán)境有特殊的要求，故應(yīng)對(duì)所開展項(xiàng)目的性能進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性［3］。同時(shí)，生化項(xiàng)目性能評(píng)價(jià)也是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的重要內(nèi)容及要求［4］。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的情況，選取天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（gamma-glutamyl transpetidase，GGT）、載脂蛋白A1（apolipoprotein A1，ApoA1）、載脂蛋白 B（ApoB）、血鈣（calcium，Ca）、總膽固醇（total cholestero，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、尿酸（uric acid，UA）、低密度脂蛋白（low densith lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high densith lipoprotein，HDL）、總膽紅素（total bilirubin，TBil）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBil）、肌酐（creatinine，Cr）、尿素（urea，Ure）、葡萄糖（glucose，Glu）、血磷（P）、脂蛋白 a（lipoprotein a，LPa）、前白蛋白（prealbumin，PA）共20個(gè)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目，對(duì)上述項(xiàng)目的精密度、準(zhǔn)確性、參考范圍和線性范圍的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料

1.1 儀器與試劑 采用德國(guó)西門子公司生產(chǎn)的ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀及其配套試劑，試劑均在有效期內(nèi)。

1.2 標(biāo)本 選取本院健康體檢者當(dāng)天新鮮血清標(biāo)本作為正常血清標(biāo)本，要求血樣采集后盡快離心處理，且標(biāo)本溶血指數(shù)、黃疸指數(shù)和脂血指數(shù)均符合要求。收集各項(xiàng)目的異常高值及低值標(biāo)本，以2017年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心第1次發(fā)放的室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本的數(shù)據(jù)作為評(píng)價(jià)依據(jù)。健康體檢者的納入條件：經(jīng)健康體檢，發(fā)育、精神均正常，無(wú)任何器質(zhì)性疾??；3個(gè)月內(nèi)無(wú)輸血史和手術(shù)史；無(wú)不良嗜好；近期無(wú)用藥或特殊飲食治療史；女性不在經(jīng)期、妊娠期或哺乳期；近1個(gè)月內(nèi)無(wú)任何疾?。?］。

1.3 校準(zhǔn)品和質(zhì)控品 采用西門子原裝試劑的配套校準(zhǔn)物檢測(cè) AST、ALT、GGT、ALP、ApoA1、ApoB、Ca、TC、TG、UA、LDL、HDL、TBil、DBil、Cr、Ure、Glu、P、LPa、PA共20個(gè)生化項(xiàng)目，質(zhì)控采用美國(guó)伯樂(lè)生化質(zhì)控水平1、質(zhì)控水平2和質(zhì)控水平3共3種質(zhì)控血清。

2 方法

2.1 精密度驗(yàn)證 根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）EP5-A2文件［6］要求，對(duì)全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行安裝調(diào)試，于每天的室內(nèi)質(zhì)控符合要求后進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。使用高、中、低3個(gè)水平的室內(nèi)質(zhì)控，每個(gè)水平各分裝5管，每天各解凍其中的1管進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，連續(xù)檢測(cè)4次，共檢測(cè)5 d。利用生化儀中的軟件計(jì)算批內(nèi)不精密度和總精密度值，判斷標(biāo)準(zhǔn)為批內(nèi)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）不超過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)室管理要求的最大允許誤差（total error，TE%）的1/4。CV總不超過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)室管理要求的1/3TE%。

2.2 正確度驗(yàn)證 根據(jù)CLSI EP15-A2文件［7］，精密度符合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)要求后，本實(shí)驗(yàn)室以2017年第1次衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心回報(bào)的生化室間質(zhì)評(píng)結(jié)果作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以每個(gè)項(xiàng)目的5個(gè)標(biāo)本中結(jié)果最大偏倚作為該生化項(xiàng)目的正確度，判斷依據(jù)為不超過(guò)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（National Center Clinical Laboratories，NCCL）允許最大誤差的1/3。

2.3 線性范圍驗(yàn)證 參考CLSI EP6-A2文件［8］，至少檢測(cè)6個(gè)濃度水平。選擇高值濃度標(biāo)本（H，高值標(biāo)本濃度盡量接近線性范圍的上限）和低值濃度標(biāo)本（L）各1份，濃度范圍要覆蓋儀器說(shuō)明書給出的線性范圍。將高值濃度標(biāo)本與低值濃度標(biāo)本分別按L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、H 的比例混合，配成6份不同濃度的標(biāo)本，隨機(jī)排列，每份混合血清標(biāo)本測(cè)定2次，記錄結(jié)果。將實(shí)測(cè)值與預(yù)期值進(jìn)行回歸分析。若所有實(shí)驗(yàn)點(diǎn)在坐標(biāo)紙上呈明顯直線趨勢(shì)，用直線回歸對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，得直線回歸方程Y＝aX+b，同時(shí)計(jì)算相關(guān)系數(shù) r。若 r2≥0.95，a為0.97～1.03，b與0無(wú)顯著差異，則可判斷其呈線性，同時(shí)需滿足測(cè)定值與理論值偏差＜1/2TE%。

2.4 參考區(qū)間驗(yàn)證 參考CLSI C28-A2文件［9］，從本院體檢人群標(biāo)本中選取20份體檢合格的健康人標(biāo)本，其中男性、女性各10例。在ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定所選取的項(xiàng)目（默認(rèn)稀釋倍數(shù)），并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。針對(duì)西門子廠家提供的參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證，要求20份參考標(biāo)本中，觀測(cè)值在引用廠家的參考區(qū)間以外的標(biāo)本≤2份（10%的結(jié)果）。計(jì)算比率R，計(jì)算公式為R＝檢測(cè)值在引用廠家的參考區(qū)間之內(nèi)的個(gè)數(shù)/20。R≥90%表示可以接受，驗(yàn)證通過(guò)；否則，為驗(yàn)證未通過(guò)。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel 2010表格軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)算相關(guān)系數(shù)和回歸方程等。

3 結(jié)果

3.1 精密度驗(yàn)證結(jié)果 20個(gè)生化項(xiàng)目中，各項(xiàng)目的批內(nèi)精密度值均＜1/4TE%；各項(xiàng)目總精密度≤1/3TE%。表明上述20個(gè)生化項(xiàng)目在ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀上的精密度良好，可滿足性能評(píng)價(jià)要求。見(jiàn)表1。

3.2 正確度驗(yàn)證結(jié)果 20個(gè)生化項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的平均偏差為0.05～5.36，小于該項(xiàng)目1/3NCCL的要求，各項(xiàng)正確度性能符合要求，評(píng)價(jià)均通過(guò)。見(jiàn)表1。

3.3 線性范圍驗(yàn)證結(jié)果 相關(guān)系數(shù)r2為0.994 1～1.000 7，r2≥0.95，評(píng)價(jià)結(jié)果均通過(guò)。見(jiàn)表2。

3.4 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果 20個(gè)生化項(xiàng)目中，各項(xiàng)目的觀測(cè)值在引用廠家的參考區(qū)間之外的個(gè)數(shù)均≤2個(gè)（10%的結(jié)果），評(píng)價(jià)結(jié)果均通過(guò)。見(jiàn)表3。

表2 ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀線性范圍驗(yàn)證結(jié)果

表3 ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

4 討論

設(shè)備的硬件及測(cè)量系統(tǒng)的良好分析性能是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的前提，而檢測(cè)系統(tǒng)的性能驗(yàn)證是評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)能否用于臨床檢驗(yàn)工作的前提［10-11］。CNAS-CL02《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》（ISO 15189：2012）中也規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室在設(shè)備安裝和使用前應(yīng)驗(yàn)證其性能，對(duì)制造商提供的相關(guān)方法學(xué)分析性能等信息資料要予以驗(yàn)證確認(rèn)［12］。本研究對(duì)20個(gè)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目（包括AST、ALT、GGT、ALP、ApoA1、ApoB、Ca、TC、TG、UA、LDL、HDL、TBil、DBil、Cr、Ure、Glu、P、LPa、PA）進(jìn) 行 了 精密度、準(zhǔn)確性、參考范圍和線性范圍的性能驗(yàn)證，結(jié)果均可靠。

精密度即多次重復(fù)測(cè)定同一量時(shí)各檢測(cè)結(jié)果的一致性，包括批內(nèi)精密度和批間精密度［13］，是檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的重要指標(biāo)之一［14］。對(duì)檢測(cè)的20個(gè)生化項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，各項(xiàng)目的批內(nèi)精密度均不超過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)室管理要求的1/4TE%的質(zhì)量要求，各項(xiàng)目總精密度不超過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)室管理要求的1/3TE%的質(zhì)量要求，表明20個(gè)生化項(xiàng)目在ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀上的精密度良好，符合性能評(píng)價(jià)要求。

正確度是指大量測(cè)定的均值與真值的接近程度［15］，參照 EP15-A2 文件［7］，對(duì) 2017 年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心第1次提供的生化室間質(zhì)評(píng)的樣本進(jìn)行檢測(cè)，以回報(bào)的生化室間質(zhì)評(píng)結(jié)果作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。本研究在ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)的20個(gè)生化項(xiàng)目結(jié)果的平均偏差均小于該項(xiàng)目1/3NCCL的要求，表明其正確度性能符合要求。

線性范圍是評(píng)價(jià)試劑檢測(cè)性能的重要指標(biāo)之一［16］，可報(bào)告范圍即檢測(cè)線性范圍。本研究中各項(xiàng)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析顯示，相關(guān)系數(shù)r2均≥0.95，表明20個(gè)生化項(xiàng)目的線性范圍驗(yàn)證結(jié)果良好。

臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制訂是實(shí)驗(yàn)室開展的前提［17-18］。臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立符合中國(guó)人群特點(diǎn)的參考范圍，在應(yīng)用該參考范圍之前先對(duì)其進(jìn)行必要的驗(yàn)證［19］。本研究通過(guò)檢測(cè)20例健康體檢者的20個(gè)生化項(xiàng)目，每個(gè)生化項(xiàng)目觀測(cè)值在引用廠家的參考區(qū)間以外的個(gè)數(shù)均≤2個(gè)（10%的結(jié)果），說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)室擬開展的20個(gè)生化項(xiàng)目所引用的的參考區(qū)間滿足臨床需求。

綜上所述，本院使用ADVIA XPT全自動(dòng)生化分析儀及其配套試劑開展檢測(cè)的20個(gè)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目（包括AST、ALT、GGT、ALP、ApoA1、ApoB、Ca、TC、TG、UA、LDL、HDL、TBil、DBil、Cr、Ure、Glu、P、LPa、PA）的精密度、正確度、線性范圍和參考區(qū)間均驗(yàn)證合格，達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求，可以用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。

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