河南省平頂山市食品藥品檢驗所中藥室,河南 平頂山 467000

中藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的主要內(nèi)容之一，中藥藥材的制備、使用不斷傳承，在臨床上得到廣泛的應(yīng)用。但由于中藥藥材種類繁多，形態(tài)相似，對藥品的分類僅靠肉眼無法有效區(qū)分，且一些植物根莖等部位與中藥相似，出現(xiàn)制假販假的可能性高，對臨床用藥安全產(chǎn)生較大的威脅[1]。為減少中藥應(yīng)用風(fēng)險，臨床從購藥、用藥過程中把握中藥的用藥安全，對容易出現(xiàn)混淆、假冒的中藥藥品進(jìn)行鑒別。我國傳統(tǒng)中藥鑒別方式是利用放大鏡觀察，區(qū)別藥物之間的細(xì)微差異，挑選出假冒藥品。但放大鏡觀察對檢驗員的檢驗經(jīng)驗要求較高，無法在基層醫(yī)療機構(gòu)廣泛推廣[2]。隨著臨床檢驗技術(shù)的不斷提高，掃描儀鑒定逐步應(yīng)用在中藥的鑒別當(dāng)中，作為技術(shù)性鑒別手段，掃描儀鑒定的應(yīng)用效果較放大鏡觀察的效果明顯改善。顯微技術(shù)的興起與發(fā)展，我國認(rèn)識到顯微技術(shù)對中藥外觀、成分鑒別的有利因素，將顯微技術(shù)與掃描技術(shù)向結(jié)合，應(yīng)用在中藥藥材真?zhèn)舞b定當(dāng)中[3]。目前臨床較少使用放大鏡檢驗手段，多以技術(shù)性檢驗為主。筆者對所選兩組易混淆藥物的檢驗資料進(jìn)行對比，分析半顯微狀鑒定與掃描儀鑒定的效果差異，分析半顯微狀鑒定在中藥藥材真?zhèn)舞b定中的應(yīng)用優(yōu)勢，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2016年1月至2017年12月的部分中藥藥材，包括虞美人種子、罌粟、鶴虱、蛇床子。將虞美人種子、罌粟作為A組，鶴虱、蛇床子作為B組，兩組各128粒，各組中兩種藥材均占半數(shù)，各64粒。另選取中醫(yī)院及我所的中藥藥劑師12名，男8名，女4名，年齡31～52歲，平均年齡(46.31±5.69)歲，工作時間8～24年，平均工作時間(18.63±5.38)年，兩組標(biāo)本均為雙盲法收集和檢驗，避免人為因素影響實驗結(jié)果，兩組一般資料無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)： ①均為中醫(yī)院正規(guī)渠道購買藥材；②藥劑師自愿參與實驗并簽署同意書；③使用儀器均為我所現(xiàn)有器材。

排除標(biāo)準(zhǔn) ： ①排除變質(zhì)藥材；②藥劑師均具有國家承認(rèn)資質(zhì)；③排除實驗中途調(diào)崗、轉(zhuǎn)院藥劑師。

1.2 方法

1.2.1 藥物選擇 A組中虞美人種子與罌粟均存在相同外形，且制備后表面紋路相似。B組鶴虱、蛇床子的外形相似且均存在羽邊，容易造成混淆，因此選擇上述四種藥物作為實驗藥材，各選擇虞美人種子、罌粟、鶴虱、蛇床子64粒，將虞美人種子與罌粟混合，鶴虱與蛇床子混合，混合后作為A、B組分別進(jìn)行檢驗和區(qū)別。

1.2.2 檢驗方法 分別對A、B兩組進(jìn)行掃描儀鑒定法與半顯微狀鑒定法對藥材進(jìn)行鑒定。掃描儀鑒定方法是將兩組分別放置在掃描儀的掃描臺上，利用掃描儀對藥材利用貝靈巧DR-2020型掃描儀進(jìn)行鑒定，用電腦連接掃描儀，并將藥品放在掃描儀的掃描位置上，利用電腦操作取景框，攝取藥材的部分位置，儀器色彩選擇24bit，像素選擇2400，在拍攝時盡量拍攝藥材的部分位置，避免照片過大影響處理速度。根據(jù)藥材攝片的亮度、顏色選擇是否重新攝片，對亮度滿意的藥材照片進(jìn)行處理，直到觀察到藥材的細(xì)微差異。通過掃描圖像對A、B兩組的不同藥材進(jìn)行區(qū)分，觀察和記錄鑒定準(zhǔn)確率。

半顯微鑒定法則利用體視顯微鏡與電子目鏡進(jìn)行觀察，將電子目鏡與電腦連接，在電腦上操作調(diào)整至可以攝片，將藥物放在體視顯微鏡下，利用電腦攝片，并截取圖片，通過調(diào)節(jié)亮度、對比度、色度增加圖像的清晰度，待清晰度良好后保存圖片至電腦，在電腦上打開圖像進(jìn)行藥物外觀的觀察，直至發(fā)現(xiàn)藥物區(qū)別，并將藥物編號、分類保存。進(jìn)行下一項藥物鑒定，則重復(fù)攝片步驟。

1.2.3 鑒定方法 由12名藥劑師對兩組藥物分別進(jìn)行觀察和區(qū)分，并最終對鑒定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)一后，分別計算掃描儀鑒定與半顯微狀鑒定的結(jié)果差異。

1.3 觀察指標(biāo) 對比掃描儀鑒定、半顯微狀鑒定的鑒定準(zhǔn)確率差異，并詳細(xì)區(qū)分兩種檢驗鑒定方法下A、B兩組觀察效果的差異。鑒定準(zhǔn)確率=準(zhǔn)確鑒定粒數(shù)/總數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 兩組鑒定準(zhǔn)確率比較 掃描儀鑒定準(zhǔn)確率A組平均60.15%，B組平均67.96%，半顯微狀鑒定準(zhǔn)確率A組平均92.96%，B組平均93.75%，藥品整體鑒定準(zhǔn)確率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組鑒定準(zhǔn)確率比較 [例(%)]

注：與掃描儀鑒定組比較，*P<0.05。

2.2 不同檢驗方法下A、B兩組藥材檢驗差異分析 掃描儀鑒定方法下A組虞美人種子、罌粟的檢查結(jié)果與半顯微狀鑒定有明顯差異。利用掃描儀檢驗攝片的圖片分辨率相對較差，無法完全對比虞美人種子與罌粟見的區(qū)別，兩種藥材的差異無法完全通過掃描儀完全鑒別，存在一定的鑒定差異，利用半顯微鑒定方法，能夠明顯觀察到虞美人的種子略長、顏色呈褐暗色，并且能夠觀察到淺網(wǎng)狀表皮。罌粟則外形相對較圓，具有較亮的色澤，且有深窩狀表面，二者通過半顯微鑒定法能夠得到顯著的區(qū)別。B組鶴虱、蛇床子利用掃描儀鑒定方法進(jìn)行觀察，對兩種藥物的表面差異觀察相對準(zhǔn)確，但無法完全有效區(qū)別兩種藥材，對出現(xiàn)外觀破損的B組藥物的混淆性較高，利用半顯微鑒定法，則能夠明顯觀察到鶴虱存在棘狀邊緣，蛇床子的邊緣則是光滑的，且呈現(xiàn)出脊?fàn)钸吘?，即便B組藥物出現(xiàn)破損，也能夠明顯觀察到蛇床子脊?fàn)钸吘?，對兩種藥材的區(qū)分效果明顯。

3 討論

中藥藥材的鑒定與鑒別，一直是中藥臨床應(yīng)用的關(guān)鍵問題。自古我國就存在由于用藥安全性差的問題，主要由于中藥的藥材種類繁多、易混淆。多數(shù)外形相似的中藥存在藥性藥理不同的情況，一旦出現(xiàn)誤用、混用，對患者疾病的治療產(chǎn)生影響，嚴(yán)重時危及患者的生命[4]。此外，一些不法商販將沒有藥用價值的植物部分當(dāng)作藥物販賣，對中藥的用藥安全也有較大的影響，為減少患者的用藥風(fēng)險，改善臨床中藥用藥安全，對不同藥物進(jìn)行區(qū)分，鑒別藥物真?zhèn)我饬x重大[5]。

目前我國基層中藥鑒定、使用機構(gòu)多應(yīng)用放大鏡、掃描儀鑒定藥材的真?zhèn)危僮骱唵畏奖?，但鑒定準(zhǔn)確率相對較低，對檢驗師的臨床經(jīng)驗要求相對較高。臨床利用實驗室鑒定方法，則多利用顯微鏡進(jìn)行鑒定，能夠明確鑒定出藥品的細(xì)胞差異，是最為準(zhǔn)確的鑒定方法，但顯微鏡儀器相對較沉，且儀器昂貴，需在專業(yè)的實驗室內(nèi)使用。使用靈活性相對較低，且為安置顯微鏡等相關(guān)配套儀器，對鑒定環(huán)境的要求也較高[9-10]，臨床為配套使用顯微鏡，需耗費大量的財力與物力，不利于基層醫(yī)療機構(gòu)的發(fā)展。因此多數(shù)基礎(chǔ)醫(yī)療機構(gòu)與鑒定機構(gòu)利用顯微鏡鑒定的普及能力相對較差。半顯微狀鑒定是利用體視顯微鏡開展的鑒定措施，半顯微狀鑒定能夠通過現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論，利用微觀技術(shù)對藥材進(jìn)行微觀觀察，且在傳統(tǒng)掃描儀鑒定的基礎(chǔ)上更加明確的觀察到藥物表面的差異，與顯微鏡相比操作更加簡單，需為保證鑒定技術(shù)實施效果建設(shè)專門的實驗室或購進(jìn)相應(yīng)的配套器材，在基層醫(yī)療機構(gòu)、臨床的普及能力較好，多數(shù)藥材檢驗師能夠通過短期培訓(xùn)熟練操作半顯微鑒定儀器與電腦，不但對藥材檢驗師的經(jīng)驗要求相對較低，還能夠短時間培養(yǎng)熟練的鑒定人才。

本研究對所選A、B兩組中藥藥材進(jìn)行真?zhèn)舞b定，選擇半顯微狀鑒定與掃描儀鑒定，鑒定結(jié)果中以半顯微狀鑒定的準(zhǔn)確率更高，兩組鑒定準(zhǔn)確率均超過90%，掃描儀鑒定的結(jié)果準(zhǔn)確率相對較低?？梢娎冒腼@微狀鑒定能夠有效提高藥材真?zhèn)舞b定的準(zhǔn)確率，增加用藥的安全性，減少中醫(yī)臨床藥材分配、鑒定工作的困難。

綜上所述，中藥藥材真?zhèn)舞b定中，利用半顯微狀鑒定的效果更加顯著，能夠減少中醫(yī)臨床用藥風(fēng)險，為中藥藥材鑒定提供更加詳細(xì)的區(qū)別特點，幫助臨床盡快培養(yǎng)出熟練的鑒定人才，減少中藥使用過程中的錯誤，增加用藥安全性，值得臨床應(yīng)用。

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