蘇卓經(jīng)，黃海龍(肇慶醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校 .205級(jí)臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)； 2.人體形態(tài)學(xué)研究室，廣東 肇慶 526020)

豬是生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用最為廣泛的非嚙齒類大型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一，在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中具有重要的應(yīng)用價(jià)值，具有其他動(dòng)物不可替代的優(yōu)越性。而利用鑄型技術(shù)構(gòu)筑豬各部位的血管系統(tǒng)分布提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)是一種重要的研究手段。目前，豬部分臟器的血管鑄型標(biāo)本制作已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[1 - 3]，而有關(guān)豬頭頸部血管及其三維建模的報(bào)道相對(duì)甚少。為此，本研究采用管道鑄型技術(shù)和血管造影重建技術(shù)制作小型豬頭頸部動(dòng)脈血管鑄型標(biāo)本后行螺旋CT掃描，以重建小型豬頭頸部血管三維立體模型，旨在為小型豬腦缺血模型的建立及研究提供立體形態(tài)學(xué)的參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

采用普通級(jí)巴馬小型豬1只，雄性，體重18 kg，7月齡，由肇慶醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供[SCXK (粵) 2016-0041]，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取材和實(shí)驗(yàn)過(guò)程均在肇慶醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校外科實(shí)驗(yàn)室完成[SYXK (粵) 2016-0167]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)符合倫理要求，實(shí)驗(yàn)程序通過(guò)了肇慶醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)委員會(huì)批準(zhǔn)(批號(hào)：2016-9-25-101)，實(shí)物動(dòng)物處理嚴(yán)格遵循肇慶醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)委員會(huì)與倫理委員會(huì)相關(guān)指南要求。

1.2 主要試劑與儀器

鑄型填充劑：E-51型環(huán)氧樹脂、環(huán)氧樹脂高性能增韌改性劑RF-400、三(二甲胺基甲基)苯酚DMP-30、改性脂環(huán)胺環(huán)氧樹脂固化劑ZY-1618、氧化鉛(9.63 g/cm3)、馬利牌油畫顏料、37%鹽酸。

手術(shù)器械(手術(shù)刀、組織剪、止血鉗、醫(yī)用縫線)，醫(yī)用塑料注射器(規(guī)格：50 mL、20 mL)，燒杯(規(guī)格：50 mL)，玻璃棒，電子秤(規(guī)格：0.01 g)，自制不同口徑塑料插管。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 鑄型制作

要求豬頭各部分組織無(wú)破損，將表面血跡沖洗干凈，用自制塑料插管對(duì)其左、右頸總動(dòng)脈進(jìn)行插管，插管后用自來(lái)水將血管內(nèi)的淤血沖洗干凈。先將豬頭標(biāo)本放置12～18 h，灌注前用50 mL注射器反復(fù)向插管內(nèi)注入空氣，盡可能排出血管內(nèi)殘余水分，然后配制改良環(huán)氧樹脂混合液-氧化鉛(100 mL/150 g)填充劑[4]，用50 mL一次性注射器分別向兩側(cè)頸總動(dòng)脈緩慢推注填充劑，邊推注邊觀察豬頭表面的顏色變化，當(dāng)出現(xiàn)部分微小紅斑應(yīng)立即停止推注，灌注量約為38 mL。最后將小型豬頭部標(biāo)本擺正，待填充劑完全凝固后，放入37%的鹽酸溶液浸泡腐蝕，7 d后取出鑄型標(biāo)本用自來(lái)水沖洗干凈，適當(dāng)修剪處理，封瓶保存。

1.3.2 CT掃描與三維重建

將已制作好的小型豬頭頸部血管網(wǎng)鑄型標(biāo)本作為模板，采用西門子SOMATOM Definition AS 128層螺旋CT進(jìn)行薄層掃描。掃描參數(shù)：電壓120 kV，電流100 mA，旋轉(zhuǎn)時(shí)間每圈0.5 s，準(zhǔn)直寬度64 × 0.625 mm，重建層厚0.67 mm，重建間隔0.33 mm，螺距0.973 mm，視野300 mm，矩陣512 × 512，所獲數(shù)據(jù)用DICOM格式保存，數(shù)據(jù)容量共計(jì)0.6 GB。然后將CT掃描采集的原始二維斷層圖像數(shù)據(jù)集導(dǎo)入CT后處理工作站重建小型豬頭頸部動(dòng)脈三維圖像。

2 結(jié)果

2.1 小型豬頭頸部動(dòng)脈血管的分布特點(diǎn)

小型豬頭頸部動(dòng)脈血管主要來(lái)自頸總動(dòng)脈，在進(jìn)胸腔前處分成左、右頸總動(dòng)脈，起始外徑為(5.6±0.2) mm、長(zhǎng)度為(9.4±0.2) mm，各自沿氣管外側(cè)向頸部延伸，沿頸動(dòng)脈鞘走行，終末以不同方式分出頸外動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈和枕動(dòng)脈，頸內(nèi)動(dòng)脈和枕動(dòng)脈同起始于一短的總干，頸外動(dòng)脈主要分為頜面部血管、舌部血管和鼻部血管(圖1)，具體分布特點(diǎn)如下。

2.1.1 頸內(nèi)動(dòng)脈

與枕動(dòng)脈同以一短的總干起始，略向前走行，比枕動(dòng)脈大，起始外徑為(2.5±0.1) mm，在根部分出短、長(zhǎng)兩支。短支向上行，分布于頭側(cè)直肌、咽后內(nèi)側(cè)淋巴結(jié)及頭前斜肌。長(zhǎng)支向前上行，從破裂孔后部(頸靜脈孔)進(jìn)入顱腔，在進(jìn)入顱腔前參與形成硬膜后異網(wǎng)。頸內(nèi)動(dòng)脈進(jìn)入顱腔后，立即向后分出后交通動(dòng)脈，與大腦后動(dòng)脈吻合。頸內(nèi)動(dòng)脈主干呈弧形彎曲向前內(nèi)側(cè)走行，在視神經(jīng)交叉的前側(cè)方分出兩支中支，即大腦中動(dòng)脈和大腦前動(dòng)脈。

(1)豬的大腦中動(dòng)脈通常不是以一總干起始，而是以2～3支密集地由頸內(nèi)動(dòng)脈發(fā)出，向背外側(cè)走，再以不同形式分成許多分支分布于大腦半球的外側(cè)、背外側(cè)及前外側(cè)部表面，并于嗅外側(cè)溝發(fā)出一些穿支至皮質(zhì)的不同區(qū)域，包括梨狀葉及腦島。

注：a：右側(cè)面觀；b：后面觀；c：正面觀。1：左頸總動(dòng)脈；2：左頸外動(dòng)脈；3：左枕動(dòng)脈干；4：右頸總動(dòng)脈；5：右頸外動(dòng)脈；6：右枕動(dòng)脈干；7：眶下動(dòng)脈；8：鼻后動(dòng)脈；9：右鼻內(nèi)動(dòng)脈；10：左鼻內(nèi)動(dòng)脈。圖1 小型豬頭頸部血管鑄型標(biāo)本Note.a: Right side view. b: Back view. c: Front view. 1: Left common carotid artery; 2: Left external carotid artery; 3: Left occipital artery trunk; 4: Right common carotid artery; 5: Right external carotid artery; 6: Right occipital artery trunk; 7: Infraorbital artery; 8: Posterior nasal artery; 9: Right nasal artery; 10: Left nasal artery.Fig.1 Vascular cast specimen of miniature pig head and neck

(2)大腦前動(dòng)脈向前走行分出交通支，與對(duì)側(cè)的同名動(dòng)脈分支吻合，形成前交通支；大腦前動(dòng)脈繼續(xù)前行，分出一支分支向上彎曲走行，在大腦半球間隙形成胼胝體動(dòng)脈，而后與對(duì)側(cè)同名動(dòng)脈匯合成胼胝體總動(dòng)脈，胼胝體總動(dòng)脈沿大腦半球間隙向后走行，供養(yǎng)大腦半球背側(cè)面及大腦前半部腦回；大腦前動(dòng)脈分出胼胝體動(dòng)脈后，繼續(xù)走行成為篩內(nèi)動(dòng)脈，篩內(nèi)動(dòng)脈在行程中分出分支完成整個(gè)嗅球血供。

(3)大腦后動(dòng)脈從后交通動(dòng)脈發(fā)出，沿大腦背外側(cè)向上，主要供養(yǎng)大腦后部表面及內(nèi)部，行至大腦半球后部及后內(nèi)部與大腦前動(dòng)脈的終末部連接；后交通動(dòng)脈為頸內(nèi)動(dòng)脈的后分支，分出大腦后動(dòng)脈后，向后延續(xù)為中腦動(dòng)脈，沿大腦腳腹側(cè)面走行，沿途分出分支供應(yīng)血流至丘腦、垂體及大腦腳，然后與對(duì)側(cè)同名動(dòng)脈相吻合并與基底動(dòng)脈相連。

2.1.2 枕動(dòng)脈

與頸內(nèi)動(dòng)脈同來(lái)源于一短的總干，起始外徑為(2.1±0.1) mm，分出枕支供應(yīng)胸骨乳突肌、頭長(zhǎng)肌、頭腹側(cè)直肌及頭外側(cè)直肌的血流；枕動(dòng)脈在寰椎窩內(nèi)與椎動(dòng)脈吻合后，經(jīng)寰椎椎間孔進(jìn)入椎管，然后分出前、后兩支，前支為基底動(dòng)脈，后支為脊髓腹側(cè)動(dòng)脈。基底動(dòng)脈在延髓和腦橋腹側(cè)正中前行，分別發(fā)出分支至小腦、延髓及腦橋，行至大腦腳與大腦后動(dòng)脈吻合。

2.1.3 頸外動(dòng)脈

起源于頸總動(dòng)脈，起始外徑(4.5±0.2) mm，其走行呈S形彎曲，根據(jù)其行程主要分為舌部、頰面部、鼻部，具體分布如下。

(1)舌部：舌部的動(dòng)脈主要由舌動(dòng)脈發(fā)出，舌動(dòng)脈自頸外動(dòng)脈腹側(cè)發(fā)出，分出腭部和咽部分支到軟腭、咽部及舌骨部及周圍肌肉，后沿舌骨舌肌深面前下行，沿途發(fā)出舌深動(dòng)脈和舌下動(dòng)脈，舌深動(dòng)脈為母干延續(xù)，一直前行到達(dá)舌尖，舌下動(dòng)脈沿舌肌表面前下行，主要供養(yǎng)舌下組織；頦下動(dòng)脈經(jīng)頦孔進(jìn)入下頜骨，主要分布于下頜切齒。

(2)頜面部：頜面部血管較多，包括頜外動(dòng)脈、耳前動(dòng)脈、耳后動(dòng)脈、腮腺支、顳淺動(dòng)脈和頜內(nèi)動(dòng)脈。頜外動(dòng)脈由頸總動(dòng)脈分出，沿下頜骨向外前下行，分布于下頜間隙；耳后動(dòng)脈沿著耳后的向上走行，沿途發(fā)出分支至耳下肌，血管管徑較粗且長(zhǎng)，一直行至耳甲尖；腮腺枝較細(xì)小，由頸外動(dòng)脈側(cè)方發(fā)出，向外走行，分布于腮腺；顳淺動(dòng)脈為頸外動(dòng)脈最前方的一個(gè)分支，發(fā)出面橫動(dòng)脈供養(yǎng)咬肌、顴肌和眼輪匝肌，耳前動(dòng)脈由顳淺動(dòng)脈發(fā)出，分布于耳前不的肌肉和耳廓內(nèi)側(cè)面；頜內(nèi)動(dòng)脈為頸外動(dòng)脈主干的延續(xù)部分，位于翼內(nèi)肌和翼外肌之間，分出頰肌動(dòng)脈后，主干呈S形轉(zhuǎn)彎前行，依次分出腦膜中動(dòng)脈、下頜齒槽動(dòng)脈、翼肌支、頰肌動(dòng)脈、眼外動(dòng)脈、顴動(dòng)脈、腭降動(dòng)脈和眶下動(dòng)脈，腦膜中動(dòng)脈有兩支分支，最終都趨向破裂孔前部，與頸內(nèi)動(dòng)脈共同形成異網(wǎng)，其余血管分別對(duì)下頜齒槽、翼肌、頰肌(包括眼角、上下唇和口角)、眼眶及其周圍組織進(jìn)行供血。頜面部的血管較細(xì)小，位置也相對(duì)表淺，但分支較多，且覆蓋面較廣，血供豐富，面部血管不會(huì)出現(xiàn)血運(yùn)障礙。

2.1.4 鼻部

鼻部血供主要來(lái)源于腭降動(dòng)脈，腭降動(dòng)脈分為蝶腭動(dòng)脈和腭大動(dòng)脈，蝶腭動(dòng)脈進(jìn)入鼻腔，分為數(shù)支，分支與于鼻腔粘膜，在鼻腔中與腭大動(dòng)脈的分支吻合；腭大動(dòng)脈為腭降動(dòng)脈的延續(xù)，向前下側(cè)走行，穿過(guò)腭管進(jìn)入鼻腔，分布于鼻腔粘膜。

2.2 小型豬頭頸部血管三維重建圖像

基于鑄型標(biāo)本的CT掃描數(shù)據(jù)，利用CT后處理工作站對(duì)小型豬頭頸部血管進(jìn)行三維重建，重建方式包括容積再現(xiàn)(volume rendering，VR)和最大密度投影法(maximal intensity projection，MIP)。VR圖像空間立體感強(qiáng)，管道飽滿、連續(xù)性好，能立體地顯示血管的分布走行、位置及其相關(guān)的毗鄰關(guān)系(圖2a)；MIP圖像能夠清晰顯示動(dòng)脈血管的密度分布及血管逐漸變細(xì)的樣影，且連續(xù)性強(qiáng)，可通過(guò)調(diào)整窗位與窗寬顯示不同級(jí)數(shù)的血管(圖2b)。CT重建圖像可在三維空間內(nèi)進(jìn)行任意角度的動(dòng)態(tài)旋轉(zhuǎn)，不僅可以從不同角度對(duì)血管進(jìn)行觀察，而且可以通過(guò)對(duì)重建條件的調(diào)節(jié)而選擇不同的顯示方式。

注：a：VR重建模型；b：MIP重建模型。1：左頸總動(dòng)脈；2：右頸總動(dòng)脈；3：右頸內(nèi)動(dòng)脈；4：左頸內(nèi)動(dòng)脈；5：右頸外動(dòng)脈；6：左頸外動(dòng)脈。圖2 小型豬頭頸部血管CT重建模型Note.a: VR reconstruction model. b: MIP reconstruction model. 1: Left common carotid artery; 2: Right common carotid artery; 3: Right internal carotid artery; 4: Left internal carotid artery; 5: Right external carotid artery; 6: Left external carotid artery.Fig.2 CT reconstruction model of the arterial vessels in the head and neck of miniature pig

3 討論

3.1 小型豬頭頸部血管灌注成型顯影的優(yōu)勢(shì)

管道鑄型技術(shù)對(duì)于顯示血管及其他管道結(jié)構(gòu)具有其獨(dú)特的意義，隨著鑄型技術(shù)的發(fā)展，鑄型標(biāo)本與教學(xué)、科研的聯(lián)系也越來(lái)越緊密，為臨床、教學(xué)及科研提供可靠、直觀的形態(tài)學(xué)依據(jù)[5 - 6]。小型豬頭頸部動(dòng)脈血管具有管徑小、管壁薄、彈性差等特點(diǎn)，其鑄型標(biāo)本制作難度較大，國(guó)內(nèi)關(guān)于小型豬頭頸部動(dòng)脈血管形態(tài)學(xué)詳細(xì)、完整的研究報(bào)道甚少。利用管道鑄型技術(shù)構(gòu)建小型豬頭頸部動(dòng)脈血管鑄型，具有以下特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)：① 能顯示小型豬頭頸部各級(jí)動(dòng)脈血管的走行及分布特點(diǎn)，具有層次分明、三維立體感強(qiáng)及形態(tài)結(jié)構(gòu)與小型豬頭頸部外形一致性高等特點(diǎn)，其腦部位于顱腔內(nèi)，腦部血管側(cè)支循環(huán)較少，與頜面部無(wú)血管吻合，血管分布較集中等血管之間的毗鄰關(guān)系在鑄型標(biāo)本上能清楚表達(dá)。通過(guò)加入金屬氧化物氧化鉛作為造影劑，利用重金屬氧化物造影成像，圖像豐富飽滿、清晰無(wú)偽影，細(xì)節(jié)表現(xiàn)力強(qiáng)，CT掃描顯影度好，得到的三維圖像立體感強(qiáng)。② 通過(guò)觀察小型豬頭頸部動(dòng)脈鑄型標(biāo)本，血管的分布、結(jié)構(gòu)及其特征清晰可辨，能夠直觀、立體地從不同角度觀察血管之間的走行和吻合，這個(gè)優(yōu)勢(shì)是傳統(tǒng)二維解剖圖片不能比擬的，可為進(jìn)一步研究小型豬頭頸部動(dòng)脈血管的結(jié)構(gòu)以及功能奠定形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)和提供解剖學(xué)的參考依據(jù)。

3.2 小型豬頭頸部動(dòng)脈血管三維建模的特點(diǎn)及意義

近年來(lái)，隨著計(jì)算機(jī)軟件技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究各個(gè)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，基于CT掃描數(shù)據(jù)集的三維重建有了很大的發(fā)展[7]。國(guó)內(nèi)那順巴雅爾等設(shè)計(jì)與制作西藏小型豬腦的動(dòng)脈血管鑄型，但是沒(méi)有構(gòu)建三維可視化模型，只能從二維圖片去觀察血管的分支與走行[8]。本研究通過(guò)制作小型豬頭頸部血管鑄型標(biāo)本，后行CT掃描并重建得到的小型豬頭頸部血管三維模型，與鑄型標(biāo)本相一致，能清晰表達(dá)小型豬頭頸部血管全貌，空間感強(qiáng)，與鑄型標(biāo)本相比，具有以下特點(diǎn)：重建三維模型具有虛擬、靈活的特點(diǎn)，可在計(jì)算機(jī)三維空間內(nèi)行任意角度的旋轉(zhuǎn)、隨意放大或縮小，還可以對(duì)模型進(jìn)行虛擬切割。由于鑄型標(biāo)本的空間構(gòu)造特點(diǎn)，只能觀察到表面的血管，難以觀察到被表面覆蓋的內(nèi)部血管，對(duì)于深層血管的觀察具有很大局限性，而三維重建模型則可以很好解決這個(gè)問(wèn)題，還可在計(jì)算機(jī)三維空間內(nèi)對(duì)原始圖進(jìn)行解剖數(shù)據(jù)的測(cè)量。小型豬作為醫(yī)學(xué)研究的理想動(dòng)物模型已得到廣泛認(rèn)可，其大腦血管的解剖結(jié)構(gòu)與人相近似，且側(cè)支循環(huán)少，常被用于建立腦缺血模型[9 - 11]。本研究所構(gòu)建的三維模型對(duì)建立豬腦缺血模型具有參考意義，主要有：① 形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)參考：豬腦缺血模型包括全腦缺血模型和局灶性腦缺血模型，其中局灶性腦缺血模型通過(guò)阻斷部分血管的血流以達(dá)到缺血的效果，其對(duì)頸內(nèi)血管的管徑大小以及解剖位置的準(zhǔn)確定位要求較高，在建立腦缺血模型前，操作者可在計(jì)算機(jī)三維空間內(nèi)對(duì)小型豬頭頸部血管三維模型進(jìn)行操作，利用切割功能充分暴露頸內(nèi)動(dòng)脈的分布，再通過(guò)旋轉(zhuǎn)和放大縮小等功能觀察頸內(nèi)動(dòng)脈的走行及吻合，進(jìn)一步觀察血管之間的吻合情況；② 虛擬模型建立：操作者可利用有限元軟件切割功能將三維模型分離出頸內(nèi)血管及其分支，再導(dǎo)入仿真軟件，通過(guò)仿真軟件選擇建立模型的血管位置和操作方式，預(yù)測(cè)缺血的范圍，并反復(fù)進(jìn)行的模擬操作和修正。通過(guò)結(jié)合三維模型建立虛擬腦缺血模型，既有助于制定和優(yōu)化建立模型的方案，又能減低建立模型過(guò)程中神經(jīng)血管組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)，提高建立豬腦缺血模型的成功率。此外，由于鑄型標(biāo)本的技術(shù)特點(diǎn)，制作一件鑄型標(biāo)本就要消耗一件實(shí)物標(biāo)本，其制作成本較高、耗時(shí)較長(zhǎng)。因此可以將重建三維模型導(dǎo)入3D打印設(shè)備，就能打印出與原標(biāo)本一致的3D立體模型，制作成本有效降低、方便攜帶且數(shù)量不限[12]。

綜上所述，采用鑄型標(biāo)本與CT三維重建模型相結(jié)合的方式，能多角度、多層次地展示小型豬頭頸部血管的分布及走向情況，為探討小型豬腦部血管的分布走行特點(diǎn)以及建立豬腦缺血模型從實(shí)體標(biāo)本與虛擬化模型兩方面提供形態(tài)學(xué)的參考依據(jù)。

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