李文梅，俞捷，胡斌麗，羅婭，楊靜，楊雪松，許潔

(遵義醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，貴州遵義563099)

肥胖癥是環(huán)境與遺傳因素共同作用下機(jī)體能量攝入超過消耗，以脂肪方式儲(chǔ)存的一種營(yíng)養(yǎng)代謝障礙性疾病，其特征在于身體中脂肪過度積聚和儲(chǔ)存，脂肪細(xì)胞數(shù)量和(或)尺寸的增加[1]。近年人類日常飲食結(jié)構(gòu)中脂肪稍高于日常攝入量，供能比高于適宜攝入量上限50%，伴隨生活方式改變，肥胖癥發(fā)病率呈快速上升趨勢(shì)[2],已成為威脅全球人群的內(nèi)分泌代謝性疾病，可促進(jìn)多種慢性疾病的發(fā)生發(fā)展，是導(dǎo)致心腦血管疾病、Ⅱ型糖尿病和惡性疾病的危險(xiǎn)因素[3,4]。治療肥胖的主要方式是藥物治療和手術(shù)治療，藥物治療可導(dǎo)致嚴(yán)重的精神病學(xué)問題，雖手術(shù)治療的效果優(yōu)于藥物治療[4]，但費(fèi)用昂貴[5]，不易大范圍實(shí)行。貴州鳳岡土地富含鋅硒、所產(chǎn)鳳岡鋅硒茶有機(jī)鋅、硒含量為40～100 mg/kg、0.25～3.50 mg/kg。茶樹有極強(qiáng)富集鋅硒的能力，新葉中鋅、硒含量與土壤中含量呈正相關(guān)，比老葉分別高2.3～4.0倍和1.2～3.0倍[6]，茶葉因其硒含量高于其他農(nóng)作物成為食物鏈植物環(huán)節(jié)及補(bǔ)硒途徑的高硒資源。有研究顯示，茶有減肥作用，微量元素鋅、硒與肥胖有密切關(guān)系。兒童尿液鋅含量與BMI呈負(fù)相關(guān)，肥胖兒童低于正常兒童[7]。2016年4月～2017年6月,本文根據(jù)人群日常飲茶習(xí)慣對(duì)大鼠進(jìn)行長(zhǎng)期灌胃，探討鳳岡鋅硒茶是否有減肥作用，為預(yù)防肥胖提供科研證據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 成年健康SD雄性大鼠30只，體質(zhì)量(180±15)g，購(gòu)自第三軍醫(yī)大學(xué)大坪實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[合格證號(hào)：SCXK(渝)2012-0005]。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后按照8 g/100 g投喂高脂高糖干飼料自由攝食和飲水，其飼料成分為70%基礎(chǔ)飼料、10%豬油、12%白糖、8%雞蛋；其主要營(yíng)養(yǎng)成分供能比例為脂肪12.05%、碳水化合物66.14%、蛋白質(zhì)10.33%，總熱量21.64 kJ/g。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)于貴州遵義醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院動(dòng)物房，飼養(yǎng)溫度(20±2)℃，相對(duì)濕度(60±5)%，通風(fēng)良好，明暗周期12 h。鳳岡鋅硒茶和普通綠茶分別由貴州鳳崗縣萬壺緣鋅硒茶業(yè)有限公司、貴州味道茶業(yè)有限公司提供；電熱恒溫水浴箱(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)；101-2型電熱干燥箱(上海路達(dá)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；SZ-93雙蒸水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)；AL-104電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)；全自動(dòng)生化分析儀(貝克庫(kù)爾曼特)。

1.2 模型制備及分組 剪碎稱量好的適量茶葉，放入3倍量沸騰雙蒸水(避免用礦泉水或自來水引入無機(jī)離子)，煎煮10 min，連續(xù)3次，合并茶水煎劑，減壓濃縮至濃度為0.2 g/mL，2 000 r/min常溫離心10 min，取上清液過0.22 μm微孔濾膜，-20 ℃冷藏備用。30只SD大鼠隨機(jī)分為3組，即對(duì)照組、普茶組、鋅硒茶組各10只。高脂飼料飼養(yǎng)6周后每日下午4時(shí)對(duì)大鼠進(jìn)行雙蒸水、普通綠茶、鋅硒茶灌胃，灌胃體積均為5 mL/(kg·d)，茶暴露劑量均為0.24 g/(kg·d)。

1.3 觀察指標(biāo)及其檢測(cè)方法 ①體質(zhì)量、脂肪質(zhì)量和脂肪系數(shù):灌胃至26周,禁食12 h后空腹進(jìn)行稱重并麻醉，取睪丸和附睪旁脂肪放置在天平稱濕重，計(jì)算脂肪系數(shù)(脂肪系數(shù)=脂肪質(zhì)量/體質(zhì)量×100%)。②血脂:剖殺大鼠取腹主動(dòng)脈全血以3 000 r/min、10 min離心后取上清液血清用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。③脂肪組織病理學(xué)觀察:取適量脂肪組織放于10%多聚甲醛溶液中固定、石蠟包埋、切片、乙醇梯度脫水、蘇木精-伊紅(HE)染色，200倍光學(xué)顯微鏡下觀察脂肪組織病理變化。④脂肪組織鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù):應(yīng)用盲法由不同實(shí)驗(yàn)者200倍鏡下采用五點(diǎn)取樣法隨機(jī)照相、再由其他實(shí)驗(yàn)者運(yùn)用Photo Shop軟件根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)原則(數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)算平均每個(gè)視野下細(xì)胞個(gè)數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 各組體質(zhì)量、脂肪質(zhì)量、脂肪系數(shù)比較 灌胃至26周，對(duì)照組、普茶組、鋅硒茶組體質(zhì)量分別為(392.30±61.94)、(318.10±45.01)、(298.70±51.63)g；脂肪質(zhì)量分別為(1.98±0.29)、(1.54±0.23)、(1.13±0.26)g；脂肪系數(shù)分別為0.51%±0.04%、0.49%±0.06%、0.34%±0.13%。各組大鼠體質(zhì)量、脂肪質(zhì)量、脂肪系數(shù)比較：鋅硒茶組<普茶組<對(duì)照組(P均<0.05)。

2.2 各組血脂比較 對(duì)照組、普茶組、鋅硒茶組TC分別為(1.99±0.52)、(1.47±0.34)、(1.44±0.29)mmol/L；LDL-C分別為(0.86±0.27)、(0.44±0.19)、(0.38±0.10)mmol/L，TG分別為(0.85±0.35)、(0.61±0.29)、(0.59±0.17)mmol/L，各組TG、LDL-C比較：鋅硒茶組<普茶組<對(duì)照組(P均<0.05)；而盡管TC水平在各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.196)，仍表現(xiàn)出鋅硒茶組<普茶組<對(duì)照組的變化趨勢(shì)。對(duì)照組HDL-C[(1.10±0.32)mmol/L]高于普茶組[(0.77±0.17)mmol/L]及鋅硒茶組[(0.86±0.27)mmol/L](P均<0.05)。

2.3 各組脂肪組織病理學(xué)變化 脂肪組織鏡下觀察到對(duì)照組脂肪細(xì)胞體積大于其他兩組，鋅硒茶組細(xì)胞排列較整齊,細(xì)胞面積小于對(duì)照組，略小于普茶組。見圖1。

圖1 脂肪組織病理學(xué)表現(xiàn)(×200)

2.4 各組脂肪組織鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)比較 平均視野細(xì)胞數(shù)：鋅硒茶組[(85.40±31.12)個(gè)/視野]>普茶組[(61.84±23.31)個(gè)/視野]>對(duì)照組[(55.54±15.69)個(gè)/視野](P均<0.05)。

3 討論

有研究提出，快速飲食與體質(zhì)量升高呈正相關(guān)[8]，目前對(duì)肥胖的有效治療采用生活方式干預(yù)、藥物和手術(shù)治療[9]。目前減肥方式主要通過運(yùn)動(dòng)和節(jié)食，而運(yùn)動(dòng)需時(shí)較長(zhǎng)不易堅(jiān)持，節(jié)食對(duì)胃腸功能不利。已有研究顯示，茶具有減肥功效，通過飲茶減肥或預(yù)防肥胖引起人們關(guān)注。國(guó)外研究認(rèn)為，單純性肥胖血鋅含量缺乏[10]，門診糖尿病患者血硒有76%低于正常參考值范圍，糖尿病患者補(bǔ)硒后，降低了其血中的脂質(zhì)過氧化物[11]。參照中國(guó)居民膳食微量營(yíng)養(yǎng)素平均需要量，人群中男性和女性鋅攝入不足比例分別為69.2%和29.2%，硒攝入不足的比例分別為49.6%和65.4%。

貴州鳳岡鋅硒茶先后43次榮獲國(guó)家級(jí)和國(guó)際茶博會(huì)金牌、獲農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志產(chǎn)品登記。全區(qū)土壤鋅最高含量為245.7 mg/kg，平均含量為116.0 mg/kg，超過了我國(guó)茶園土壤鋅的平均含量。有研究顯示，新鮮嫩芽中鋅硒含量與土壤呈正比，均比老葉高，鳳岡鋅硒茶以新鮮嫩芽為原材料，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其含鋅、硒量高[12]，為富含鋅硒產(chǎn)品。茶中因含有兒茶素和咖啡因增加能量代謝導(dǎo)致體質(zhì)量下降利于減肥和維持體質(zhì)量[13]，兒茶素類化合物具有較強(qiáng)的抗氧化特性，普通綠茶兒茶素含量一般在10%～20%，而鳳岡鋅硒茶高達(dá)20.08%，可作為維持或增強(qiáng)能量消耗和增加脂肪氧化的工具，另外茶多酚[13]、沒食子兒茶素、沒食子酸酯、咖啡因混合物也有微小降血脂作用。在本實(shí)驗(yàn)中，普茶組、鋅硒茶組均有減肥效果，可能就是基于以上幾個(gè)因素。在本研究中還發(fā)現(xiàn)，茶葉有減肥效果的同時(shí)，鳳岡鋅硒茶的減肥效果要優(yōu)于普通綠茶。其原因考慮如下：富硒綠茶的氧化活性遠(yuǎn)高于普通綠茶，鋅可調(diào)節(jié)食欲，有脂質(zhì)抗氧化作用；綠茶通過減少食物攝入，中斷脂質(zhì)乳化和吸收，抑制脂肪形成和脂質(zhì)合成以及通過發(fā)熱、脂肪氧化和糞便脂質(zhì)排泄增加能量消耗，在脂肪代謝中起重要作用[14]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)飲用茶水制劑可減肥、有清脂的效果，主要表現(xiàn)為體質(zhì)量降低、調(diào)節(jié)脂代謝、脂肪細(xì)胞體積變??；鋅硒茶組上述效果優(yōu)于普茶組。

綜上認(rèn)為，鳳岡鋅硒茶的減肥效果優(yōu)于普通綠茶，其可能與鳳岡鋅硒茶中富含抗氧化能力強(qiáng)的鋅、硒元素有關(guān)。

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