孟婷婷　李君　李露露　賀怡欣

摘要：為了檢測不同濃度重樓對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌效果，我們采用了常規(guī)的微生物學(xué)免疫法圓紙片擴(kuò)散法。結(jié)果顯示重樓對金黃色葡萄球菌具有一定的抑制作用，而對大腸桿菌抑菌效果不甚明顯。

關(guān)鍵詞：重樓；抑菌效果；金黃色葡萄球菌；大腸桿菌

1 概論

痤瘡是一種慢性炎癥性皮膚病，多發(fā)于青少年，臨床表現(xiàn)為面部粉刺HYPERLINK"http：//www.baike.com/wiki/%E7%B2%89%E5%88%BA"＼t"http：//www.baike.com/wiki/_blank"、丘疹HYPERLINK"http：//www.baike.com/wiki/%E4%B8%98%E7%96%B9"＼t"http：//www.baike.com/wiki/_blank"、膿皰、結(jié)節(jié)等多形性皮損，檢測分析發(fā)現(xiàn)細(xì)菌則是主要的誘發(fā)因素。因?yàn)榧?xì)菌可以為痤瘡的生長提供良好的溫床，油性肌膚最為明顯[1]。目前市場上的治療藥物也是種類繁多，中西藥皆有，但是并未發(fā)現(xiàn)效果甚少的“良藥”。我們研究的中藥重樓在抑癌方面的作用已有報道而其抑菌作用研究則大部分停留在理論層面上，較少應(yīng)用于具體病癥中，尤其是抑痘作用更為少見。研究以中藥陜重樓為主，屬于百合科多年生草本植物，其干燥的根莖具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚等作用。其中重樓的變種：“七葉一枝花”具有良好的抗菌消炎作用。七葉一枝花對宋內(nèi)氏痢疾桿菌、黏質(zhì)沙雷桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌有一定的抑制作用[2]，研究發(fā)現(xiàn)其對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加有明顯的抗炎作用[3]。鑒于此，本課題研究重樓乙醇提取物對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑制作用，為重樓抑菌消炎藥物的研發(fā)提供理論支撐與新藥開發(fā)提供依據(jù)。

2 實(shí)驗(yàn)

2.1 實(shí)驗(yàn)材料

2.1.1 重樓

2017年6月購買于老百姓大藥房（西安市科技路西口店），屬于重樓的變種之一七葉一枝花。

2.1.2 菌種

金黃色葡萄球菌、大腸桿菌由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

2.1.3 培養(yǎng)基

細(xì)菌培養(yǎng)基：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，瓊脂 520g，Nacl5g，蒸餾水 1000mL，PH7.07.1。

2.2 實(shí)驗(yàn)儀器

VD650凈化工作臺（石家莊泰斯特儀器設(shè)備有限公司）；M215597高壓蒸汽滅菌鍋（上海中西化玻儀器試劑有限公司）；BCD1667T ADZ冰箱（青島海爾股份有限公司），2011型電熱恒溫干燥箱。酒精燈、電爐、接種環(huán)、打孔器、培養(yǎng)皿、紗布等微生物常規(guī)實(shí)驗(yàn)器械設(shè)備。

2.3 實(shí)驗(yàn)方法

2.3.1 重樓乙醇提物的制備

取重樓飲片，用70%的乙醇提取兩次，第一次10BV提取2小時，第二次8BV提取1.5小時，合并提取液。

2.3.2 制作藥敏片

向干燥的培養(yǎng)皿中倒入重樓提取液20ml，將濾紙放提取液中4小時，隨后取出放在干燥的器皿里，然后將其置于60℃的電熱恒溫干燥箱中進(jìn)行干燥，等完全干燥之后連同器皿一起取出，以作備用。

2.3.3 抑菌實(shí)驗(yàn)

整個實(shí)驗(yàn)操作過程，全部在無菌操作臺中來進(jìn)行操作，首先，每種細(xì)菌接種要有4個培養(yǎng)基，并且要把金黃色葡萄球菌和大腸桿菌分別劃線及接種于培養(yǎng)皿培養(yǎng)基之上；其次，把接種環(huán)放在酒精燈上進(jìn)行滅菌之后，再放入適量的細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)，最后，選擇以劃線的方式再將其細(xì)菌物涂抹于培養(yǎng)皿之上。

3 結(jié)果

根據(jù)重樓液在圓紙片上的擴(kuò)散大小來判定其抑菌效果，當(dāng)重樓不斷的在培養(yǎng)基內(nèi)向四周進(jìn)行擴(kuò)散時，在其圓紙片的周邊一定范圍內(nèi)，對于細(xì)菌的生長程度也將會得到一定的抑制。同時，在一晝夜后也將形成一個抑菌環(huán)。通過實(shí)驗(yàn)確定，可以根據(jù)抑菌環(huán)的大小來判定抑菌的效果。抑菌環(huán)大小的不同，可以說明該菌種對藥物的敏感性也是不同的。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

由表1可知，重樓對金黃色葡萄球菌具有一定的抑制作用，且根據(jù)藥敏試驗(yàn)判定為中敏（平均抑菌換在13.07），而重樓對大腸桿菌的抑菌作用為低敏，這對重樓在臨床的推廣與應(yīng)用，提供了理論依據(jù)。

4 討論

本研究以圓紙片擴(kuò)散法檢測到了重樓對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌作用，同時，通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以證實(shí)，重樓具有一定的抗菌效果的，這與文獻(xiàn)上報道的大致是相同的。重樓在我國分布廣泛，資源豐富，相對于臨床來說其具有十分重要的研究價值，該實(shí)驗(yàn)不但對重樓的抑菌抗炎作用做了積極的探討，同時，相對于其在業(yè)內(nèi)的影響，也為臨床上重樓藥物的使用以及新藥的開發(fā)提供了一定的支持。

參考文獻(xiàn)：

[1]范志莘，趙旺勝，施瑞華，童明慶，郁輝，鄭樂.尋常痤瘡細(xì)菌感染病因?qū)W探討.臨床皮膚科雜志，1996，（6）371373.

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[3]刁燕春，吳鏑.重樓的成分及藥理作用.中外健康文摘，2014.（19）1.

[4]孫桂麗，陳有為，夏國興，吳少華，張琦，李治瀅，李紹蘭，楊麗源，黃榮.云南重樓植物內(nèi)生真菌的分離及抗菌活性篩選[J].微生物學(xué)雜志，2005（06）.

[5]任安芝，高玉葆.植物內(nèi)生真菌——類應(yīng)用前景廣闊的資源微生物[J].微生物學(xué)通報，2001（06）.

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作者簡介：孟婷婷（1983），女，漢族，陜西西安人，碩士，陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，西安培華學(xué)院醫(yī)學(xué)院講師，主要研究方向：比較神經(jīng)生理學(xué)。