胡靜華

[摘要] 目的 探討2016年從業(yè)人員健康體檢志賀氏菌檢測結(jié)果分析及預(yù)防管理。方法 選取2016年來該中心的餐飲與公共服務(wù)的從業(yè)人員，樣本數(shù)為79 947，并根據(jù)春、夏、秋和冬4個季節(jié)進行劃分，對樣本進行志賀氏菌核酸試劑盒的檢測，分析檢測結(jié)果，并提出預(yù)防措施。結(jié)果 從業(yè)人員體檢中志賀氏菌的檢出率，春季為0.020%（4/19 917）、夏季為0.025%（5/20 165）、秋季為0.020%（4/19 811）和冬季為0.020%（4/20 054），各季節(jié)檢出率的變化不大，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結(jié)論 通過志賀氏菌核酸試劑盒進行PCR熒光檢測，并且分析志賀氏菌檢測結(jié)果，有助于判斷所檢出菌是否為志賀氏菌，同時通過加強預(yù)防消毒，切斷病原菌，有助于保證社會安全。

[關(guān)鍵詞] 從業(yè)人員；健康體檢；志賀氏菌；結(jié)果分析；預(yù)防管理

[中圖分類號] R194.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2018）02（a）-0158-02

隨著生活水平的提高，越來越多的人開始注重養(yǎng)生、保健，每年的定期健康體檢也必不可少。所謂的健康體檢是指通過醫(yī)學的手段，了解自身的身體情況，如健康狀況和疾病狀態(tài)，根據(jù)健康隱患和疾病線索，可以做到盡早發(fā)現(xiàn)疾病、盡早治療的目的，有效地抑制了疾病的擴大，減少了受檢者的痛苦[1]。從業(yè)人員中從事餐飲與公共服務(wù)的人員來講，每年的預(yù)防性健康體檢是必不可少的環(huán)節(jié)，檢查項目除了常規(guī)的化膿或滲出性皮膚病、活動性肺結(jié)核檢查及轉(zhuǎn)氨酶、沙門氏菌檢測外，志賀氏菌檢測也越來越被重視。志賀氏菌通過攝取的食物污染途徑即可傳播，常見的臨床癥狀是腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)燒等。志賀氏菌的血清可分為福氏志賀菌（B群）、鮑氏志賀菌（C群）、痢疾志賀菌（A群）、宋內(nèi)氏志賀菌（D群）4種類型，其中福氏志賀菌是最為普遍的感染病毒[2]。目前，志賀氏菌的檢測方法除了病原菌的分離鑒定、生化試驗、凝集反應(yīng)等方法外，志賀氏菌核酸試劑盒PCR熒光的檢測方法已逐步應(yīng)用于臨床，該方法具有用量小、檢測迅速、靈敏度高等特點。該中心選取2016年對健康體檢的從業(yè)人員采用志賀氏菌核酸試劑盒的方法進行志賀氏菌檢測，分析檢測結(jié)果且提出預(yù)防管理措施，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該中心志賀氏菌檢測的樣本數(shù)為79 947，該樣本數(shù)來源于餐飲與公共服務(wù)的從業(yè)人員，其中春季的樣本數(shù)為19 917，夏季的樣本數(shù)為20 165，秋季的樣本數(shù)為19 811，冬季的樣本數(shù)為20 054。4個季節(jié)在樣本數(shù)方面差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 樣本處理 樣本選擇自然的糞便進行采集，并且挑選粘液部位的糞便，樣本量為2～3 g。將樣本放到增菌培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基選擇亞硒酸鹽胱氨酸增菌液，用量為3～5 mL，放置在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4～6 h。

備注：①樣本采集后，要及時保存，并且盡量將樣本密閉送檢，避免樣本間出現(xiàn)交叉污染；②樣本采集后，要及時檢測，若不能及時檢測，存放到-20℃下，可以保存12個月；③樣本需要運輸時，冰袋的低溫運輸方式不可超過3 d；④樣本不能反復(fù)凍融，次數(shù)不能超過5次。

1.2.2 實驗室檢測方法 采取熒光PCR法進行志賀氏菌的檢測，其中志賀氏菌核酸檢測的試劑盒包括：核酸擴增反應(yīng)液、酶混合液、志賀反應(yīng)液、陽性對照、去RNA酶水、DNA提取液。試劑盒存放在-20℃中保存，用時將各個試劑融化后，短暫進行離心后使用。根據(jù)試劑盒的說明書中各個試劑的用量進行取樣至PCR反應(yīng)管中，每次實驗時做好空白對照與陽性對照。將反應(yīng)管放置到熒光PCR擴增儀中，并且設(shè)定相應(yīng)參數(shù)：UNG酶處理（50℃下5 min，進行1個循環(huán)），預(yù)變性（95℃下5 min，進行1個循環(huán)），變性（95℃下10 s，進行40個循環(huán)），退火、延伸與檢測熒光（55℃下40 s，進行40個循環(huán)），其中熒光檢測的通道為Vic、Fam和Cy5。

1.3 評價標準

志賀氏菌陰性結(jié)果為沒有典型的S型擴增曲線或者CT值為Undet，同時內(nèi)標對照具有典型的S型擴增曲線或者CT值≤30；志賀氏菌陽性結(jié)果為典型的S型擴增曲線或者CT值≤35.5，同時內(nèi)標對照的結(jié)果與陰性結(jié)果一致。若樣本沒有出現(xiàn)典型的S型擴增曲線或者CT值為Undet，并且內(nèi)標對照也同樣如此，則實驗判定無效，需重新檢測[3]。

1.4 統(tǒng)計方法

觀察比較每個季節(jié)的數(shù)據(jù)，應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件完成數(shù)據(jù)的分析，計數(shù)資料用百分率表示，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

從業(yè)人員體檢中志賀氏菌的檢出率，4個季節(jié)的變化不大，除了夏季的檢出率為0.025%外，其他季節(jié)為0.020%，差異無統(tǒng)計學意義（χ2=0.413，P=0.8，P>0.05）。

3 討論

志賀氏菌具有較強的致病力，可產(chǎn)生內(nèi)外毒素，因此很容易引起細菌性痢疾[4]。志賀氏菌感染后的臨床表現(xiàn)為腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)燒等。目前，志賀氏菌的預(yù)防通常采用口服減毒的活菌苗，如2a變異株和Sd株等，雖然該活菌苗具有一定的預(yù)防能力，但是它具有服用量較大、維持時間短、免疫力較弱、型間沒有保護性交叉免疫等缺點，因此在臨床應(yīng)用具有一定難度。一旦出現(xiàn)志賀氏菌感染引起的細菌性痢疾，通常采用中西藥進行治療，其中西藥通常使用氨芐青霉素、氯霉素或磺胺類等藥物；中藥使用馬齒筧、白頭翁、黃連與黃柏等藥物?？傊瑹o論作為公眾服務(wù)行業(yè)還是餐飲行業(yè)，都需要養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習慣，做到勤洗手與多消毒，從而可以切斷病原菌的傳播。

隨著生活水平的提高，越來越多的人躋身于公共區(qū)域，來緩解生活及工作壓力，因此公共區(qū)域的衛(wèi)生安全需重點關(guān)注，尤其是在公眾服務(wù)或餐飲行業(yè)要求從業(yè)人員進行必要的預(yù)防性健康體檢。所謂預(yù)防性健康體檢是指通過醫(yī)學的手段，了解自身的身體情況，如健康狀況和疾病狀態(tài)，根據(jù)健康隱患和疾病線索，可以做到盡早發(fā)現(xiàn)疾病、盡早治療的目的，有效地抑制了疾病的擴大，減少了受檢者的痛苦[5-7]。目前，預(yù)防性健康體檢的檢查項目包括化膿或滲出性皮膚病、活動性肺結(jié)核檢查及轉(zhuǎn)氨酶、志賀氏菌、沙門氏菌檢測。志賀氏菌通過攝取的食物污染途徑即可傳播，它具有較強的致病力，可產(chǎn)生內(nèi)外毒素，因此很容易引起細菌性痢疾，其臨床癥狀是腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)燒等。志賀氏菌的血清可分為福氏志賀菌、鮑氏志賀菌、痢疾志賀菌、宋內(nèi)志賀菌4種類型[8-9]。目前，除了病原菌的分離鑒定、生化試驗、凝集反應(yīng)等方法外，志賀氏菌核酸試劑盒PCR熒光的檢測方法已逐步應(yīng)用于臨床，該方法具有用量小、檢測迅速、靈敏度高等特點。該研究首先對樣本進行密封送檢后，進行增菌培養(yǎng)；按照志賀氏菌核酸檢測的試劑盒中的說明書進行樣品準備，并將制備好的樣品放置到PCR熒光擴增儀中進行熒光擴增，擴增的程序先后為UNG酶處理、預(yù)變性、變性、退火、延伸與檢測熒光步驟，并根據(jù)內(nèi)標對照與樣本的結(jié)果，分析是否為志賀氏菌陽性反應(yīng)，值得一提的是，若內(nèi)標對照和樣本的結(jié)果都顯示為沒有典型的S型擴增曲線或者CT值為Undet時，則說明實驗失效，需要重新進行檢測。目前，采用口服減毒的活菌苗方法進行預(yù)防志賀氏菌感染，因為該方法的缺點較多，很難大量應(yīng)用到臨床，因此需從業(yè)人員做到勤洗手與常消毒，有利于切斷病原菌，一旦感染志賀氏菌通常采用中藥與西藥的方式進行治療?？傊ㄟ^志賀氏菌核酸試劑盒進行PCR熒光檢測，并且分析志賀氏菌檢測結(jié)果，有助于判斷所檢出菌是否為志賀氏菌，同時通過加強預(yù)防消毒，切斷病原菌，有助于保證社會安全。

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（收稿日期：2017-11-06）