王青，沃銘毅，沈彥，賈鵬強(qiáng)

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是一種結(jié)腸和直腸慢性非特異性炎癥性疾病，病變主要局限于大腸黏膜及黏膜下層[1]。UC癥狀以腹瀉為主，也常伴有腹痛、便血、嘔吐等癥狀。有研究認(rèn)為[2]，UC的發(fā)病與腸道菌群的改變有著密切的聯(lián)系。人體腸道內(nèi)寄生著10萬(wàn)億個(gè)細(xì)菌，它們能影響體質(zhì)量、消化能力、抵御感染和自體免疫疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)，還能控制人體對(duì)癌癥治療藥物的反應(yīng)。在炎癥性腸病狀態(tài)下，腸道菌群發(fā)揮著重要的作用[3-4]。本研究探討UC患者腸道菌群的變化，并分析其與腫瘤壞死因子（TNF）-、白細(xì)胞介素（IL）-10及一氧化氮（NO）的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2015年11月至2017年2月在浙江省人民醫(yī)院就診的UC患者86例，均符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)（2012年·廣州）》中UC的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；排除有心腦血管等疾病患者，近期使用抗生素患者，有腹部手術(shù)史患者。按照疾病狀態(tài)分為活動(dòng)期組（41例）和緩解期組（45例），并選擇40例健康體檢者作為對(duì)照組。活動(dòng)期組男23例，女18例；年齡29～46歲，平均（33.6±6.7）歲。緩解期組男24例，女21例；年齡31～44歲，平均（37.3±7.1）歲。對(duì)照組男18例，女22例；年齡26～48歲，平均（36.9±7.5）歲。3組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞ 0.05）。

1.2 方法

1.2.1 腸道菌群檢測(cè) 收集研究對(duì)象糞便0.5 g，于小瓶?jī)?nèi)加入4.5 ml厭氧稀釋液，震蕩至糞便均質(zhì)化。準(zhǔn)備7個(gè)無(wú)菌試管，按照10倍稀釋原則稀釋直至達(dá)到10―8，再取20 l接種于不同培養(yǎng)基中。腸球菌采用需氧培養(yǎng)基培養(yǎng)，雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌采用厭氧培養(yǎng)基培養(yǎng)。1.2.2 炎癥因子檢測(cè) 抽取研究對(duì)象空腹靜脈血 5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定腫瘤壞死因子-（TNF-）、白細(xì)胞介素（IL）-10的水平，采用硝酸還原酶試驗(yàn)檢測(cè)一氧化氮（NO）的水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組比較采用方差分析，多重比較采用LSD-檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用2檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)性分析。＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 3組腸道菌群變化情況

表2 3組TNF-、IL-10、NO變化情況

表3 腸道菌群和TNF-、IL-10、NO的相關(guān)性

2 結(jié)果

2.1 3組腸道菌群變化情況 活動(dòng)期組腸球菌、大腸桿菌數(shù)量均明顯高于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05），雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌數(shù)量均明顯低于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05）；緩解期組和對(duì)照組在腸球菌、大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌數(shù)量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 3組TNF- 、IL-10、NO變化情況活動(dòng)期組TNF-和NO水平均明顯高于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05），IL-10水平明顯低于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05）；緩解期組和對(duì)照組的TNF-和NO水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），但緩解期組的IL-10水平高于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 腸道菌群和TNF-、IL-10、NO相關(guān)性 UC患者腸道菌群的變化與TNF-、IL-10、NO水平具有相關(guān)性。見(jiàn)表3。

3 討論

UC屬于消化內(nèi)科常見(jiàn)疾病，臨床主要表現(xiàn)為腹瀉、腹痛和便血，結(jié)腸鏡下可見(jiàn)直腸部位潰瘍形成，病變可延伸至近端結(jié)腸。有研究表明，不同時(shí)期的UC患者體內(nèi)的腸道菌群會(huì)發(fā)生改變[6]。腸道菌群是人體腸道的正常微生物，可分有益菌、有害菌和中性菌。有益菌，也被稱為益生菌，主要是各種雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌等，是人體健康必不可少的要素，可以合成各種維生素，參與食物的消化，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，抑制致病菌群的生長(zhǎng)。有害菌，如腸球菌等，數(shù)量一旦失控便會(huì)大量生長(zhǎng)，可引發(fā)多種疾病，產(chǎn)生致癌物等有害物質(zhì)，或影響免疫系統(tǒng)功能。中性菌，如大腸桿菌等，是具有雙重作用的細(xì)菌，在正常情況下對(duì)健康有益；一旦增殖失控，或從腸道轉(zhuǎn)移到身體其他部位，就可能引發(fā)許多問(wèn)題。各種細(xì)菌在消化道系統(tǒng)中相互依存，共同作用，維持機(jī)體動(dòng)態(tài)平衡。有研究表明[7]，在腸道炎癥性疾病狀態(tài)下，腸道菌群會(huì)影響腸黏膜的免疫系統(tǒng)功能，進(jìn)而誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，導(dǎo)致UC的發(fā)生。本研究顯示，活動(dòng)期組腸球菌、大腸桿菌數(shù)量均明顯高于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05），雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌數(shù)量均明顯低于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05），說(shuō)明活動(dòng)期UC患者體內(nèi)腸道菌群數(shù)量發(fā)生改變，使原有的平衡被破壞，且雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌等有益菌數(shù)量減少，腸球菌等有害菌數(shù)量增多，導(dǎo)致腸黏膜功能減弱，引起腸道發(fā)生炎癥反應(yīng)[8]。

TNF-是重要的炎癥啟動(dòng)因子，主要由單核巨噬細(xì)胞形成，在細(xì)胞急性反應(yīng)、凋亡等過(guò)程均具有重要作用。IL-10有免疫調(diào)節(jié)和抗炎作用，在腸道免疫中發(fā)揮著重要的作用。NO廣泛存在于胃腸道、食管中。Ikonomi等[9]指出，NO 在UC患者腸黏膜組織中合成增加，提示可能參與UC致病過(guò)程中的組織損傷和炎癥反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn)，活動(dòng)期組TNF-和NO水平均高于緩解期組和對(duì)照組（P＜0.05），IL-10水平明顯低于緩解期組和對(duì)照組（均P＜0.05），說(shuō)明UC可導(dǎo)致TNF-和NO水平的增加以及IL-10水平的降低。本研究還發(fā)現(xiàn)，TNF-和NO與腸球菌、大腸桿菌呈正相關(guān)（均P＜0.05），與雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05），即TNF-和NO水平越高，UC患者體內(nèi)的腸球菌和大腸桿菌數(shù)量越多，而雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌數(shù)量越少；IL-10與腸球菌、大腸桿菌呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05），與雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌呈正相關(guān)（均P＜0.05），即IL-10水平越高，UC患者體內(nèi)的腸球菌和大腸桿菌數(shù)量越少，而雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌數(shù)量越多。

綜上所述，UC患者腸道菌群數(shù)量發(fā)生改變，活動(dòng)期UC患者變化程度更加明顯，且通過(guò)測(cè)定TNF-、IL-10、NO的水平可有效評(píng)估UC患者病情。

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