王燦琴，韋仕巖，吳圣進(jìn)，覃曉娟，陳雪鳳，吳小建

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，廣西 南寧 530007)

【研究意義】廣西桉樹(shù)人工林面積、生長(zhǎng)量、蓄積量均占全國(guó)首位[1]。桉樹(shù)加工產(chǎn)業(yè)在促進(jìn)廣西經(jīng)濟(jì)發(fā)展的同時(shí)，也產(chǎn)生了大量的剩余物，如桉木屑、桉樹(shù)皮等，其中桉木屑占絕大多數(shù)。傳統(tǒng)的處理剩余物的方式以堆放丟棄或焚燒為主，產(chǎn)生的滲出物和氣體對(duì)土壤、水體和空氣均造成嚴(yán)重污染。近年來(lái)，隨著食用菌栽培產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，對(duì)栽培原料的需求也相應(yīng)增加，棉籽殼、雜木屑、桑枝屑、甘蔗渣等傳統(tǒng)栽培原料產(chǎn)量有限、用途較廣、銷量增長(zhǎng)，導(dǎo)致食用菌產(chǎn)業(yè)面臨原料短缺、價(jià)格上漲的問(wèn)題。因此，尋找新型食用菌栽培原料已逐漸成為行業(yè)發(fā)展的新方向[2]。將桉木屑資源化利用于食用菌栽培，既可以延長(zhǎng)桉樹(shù)木材加工的產(chǎn)業(yè)鏈，又可以減輕其對(duì)環(huán)境的污染，同時(shí)也緩解了食用菌產(chǎn)業(yè)存在的原料短缺問(wèn)題?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】長(zhǎng)期以來(lái)，人們認(rèn)為桉樹(shù)芳香油含量豐富，不適于栽培食用菌，因此在食用菌栽培產(chǎn)業(yè)上應(yīng)用桉樹(shù)原料的研究仍較少。吳繼林等[3]研究發(fā)現(xiàn)，桉木屑可以用于栽培香菇、鮑魚(yú)菇、茶樹(shù)菇、杏鮑菇等食用菌，且栽培出的食用菌在口感、外觀、營(yíng)養(yǎng)成分等方面與使用木屑栽培的并無(wú)差別。夏鳳娜等[4]2011年以桉樹(shù)加工剩余物(皮屑、桿屑、皮桿混合屑)為基質(zhì)，栽培靈芝、秀珍菇、刺芹側(cè)耳和金針菇4種食用菌，結(jié)果表明，靈芝、秀珍菇、刺芹側(cè)耳能正常生長(zhǎng)及出菇，而金針菇菌絲生長(zhǎng)弱，不能出菇。王燦琴等[5]2016年以桉木屑為主料，對(duì)秀珍菇的栽培配方進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)以桉木屑為主料，配以桑枝或甘蔗渣，可以顯著降低秀珍菇栽培的原料成本，提高經(jīng)濟(jì)效益?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前桉木屑栽培食用菌尚處于可行性研究階段，對(duì)適于桉木屑栽培的優(yōu)良菌株篩選還有待深入研究。猴頭菇是一種珍貴的藥食相用菌，富含多糖、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分[6]，不僅營(yíng)養(yǎng)豐富，味道鮮美，還具有抗?jié)兒脱装Y，增強(qiáng)免疫力，抗腫瘤，降血糖等作用[7]，深受消費(fèi)者歡迎，是近年來(lái)廣西發(fā)展較快的食用菌品種之一。猴頭菇的不同菌株間產(chǎn)量和商品性狀差異較大，即使在傳統(tǒng)栽培原料雜木屑、棉籽殼培養(yǎng)料上，菌株間的產(chǎn)量、抗雜能力、子實(shí)體外觀品質(zhì)等性狀也存在明顯差別[8]。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】為降低栽培成本，提高經(jīng)濟(jì)效益，以桉木屑為主要栽培原料，對(duì)不同來(lái)源的10個(gè)猴頭菇菌株進(jìn)行了栽培比較試驗(yàn)，篩選出適合廣西栽培的猴頭菇優(yōu)良菌株。

1 材料與方法

1.1 參試菌株

從國(guó)內(nèi)食用菌有關(guān)單位引進(jìn)及本單位分離保存的10個(gè)猴頭菇菌株作為參試菌株(表1)。

表1 參試猴頭菇菌株來(lái)源

1.2 參試培養(yǎng)基

1.2.1 母種培養(yǎng)基 PDA加富培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、蛋白胨3 g，用麥麩10 g煮水濾汁定溶至1000 mL，pH自然。

1.2.2 原種和栽培種培養(yǎng)基 棉籽殼40 %、雜木屑40 %、麥麩15 %、石灰2 %、石膏1 %、白糖1 %、過(guò)磷酸鈣1 %，含水量65 %。

1.2.3 出菇培養(yǎng)基 桉木屑55 %、棉籽殼10 %、桑枝屑10 %、花生殼5 %、木薯酒廢渣5 %、麥麩10 %、石灰2 %、石膏1 %、過(guò)磷酸鈣1 %、白糖1 %，含水量65 %。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菌種制作 根據(jù)母種、原種、栽培種三級(jí)制種方法制作菌種，配制好培養(yǎng)基后，母種培養(yǎng)基滅菌溫度為126 ℃，時(shí)間30 min。原種、栽培種培養(yǎng)基滅菌溫度為126 ℃，時(shí)間2.5 h，滅菌結(jié)束后冷卻接種并靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25～28 ℃。

1.3.2 菌袋制作 提前5 d將桉木屑、棉籽殼、桑枝屑和花生殼浸泡預(yù)濕，再按配方將其余成分補(bǔ)齊，攪拌均勻，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量至65 %左右，pH值8.0～8.5。將配好的培養(yǎng)基分裝入聚乙烯筒料袋(23 cm×43 cm)，每袋裝干料1.0 kg，100 ℃常壓滅菌10～12 h。冷卻至60 ℃左右移入接種室進(jìn)行接種，接種按無(wú)菌操作要求進(jìn)行。每個(gè)菌株接種50個(gè)菌袋，試驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3.3 菌袋菌絲培養(yǎng) 接種完成后，將菌包轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室進(jìn)行菌絲培養(yǎng)，期間培養(yǎng)室溫度應(yīng)控制在25～28 ℃，濕度控制在65 %～70 %，并進(jìn)行避光暗培養(yǎng)。在菌絲生長(zhǎng)期間定期觀察記錄菌絲生長(zhǎng)情況并測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度(直線生長(zhǎng)測(cè)量法)，標(biāo)記菌絲長(zhǎng)勢(shì)(用“+”號(hào)表示菌絲密度和長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)弱)，發(fā)現(xiàn)污染的菌袋要及時(shí)移除。

1.3.4 出菇管理及采收 出菇管理可參照王賀祥等2008[9]年的記錄方法進(jìn)行。

1.3.5 菌株農(nóng)藝性狀記錄 記錄各菌株的原基形成時(shí)間、形態(tài)特征、轉(zhuǎn)潮時(shí)間等。

1.3.6 產(chǎn)量統(tǒng)計(jì) 統(tǒng)計(jì)各菌株前3潮鮮菇的產(chǎn)量，計(jì)算其生物學(xué)效率，并進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 猴頭菇菌株菌絲體在菌袋培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況比較

參試猴頭菇菌株的菌絲生長(zhǎng)狀況見(jiàn)表2。其中菌絲長(zhǎng)速最快的是野生猴頭菌株，其日平均生長(zhǎng)速度達(dá)6.38 mm/d，除了與常山猴頭菌株的菌絲長(zhǎng)速存在顯著差異以外，與其它菌株之間均存在極顯著差異。菌絲生長(zhǎng)速度較慢的是猴頭4903和魯猴1號(hào)，兩者之間差異不顯著，但與其它菌株的生長(zhǎng)速度均存在極顯著差異，其中猴頭4903菌株的長(zhǎng)速最慢，僅為4.12 mm/d。

表2 參試猴頭菇菌絲體在出菇菌包培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況

注: +++表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，粗壯、潔白、整齊; ++表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)較強(qiáng)，粗壯、潔白，但生長(zhǎng)不夠整齊。

Notes: + + + means that mycelium is strong, thick, white, neat; + + means that mycelium is strong, thick, white, but not neat.

圖1 以桉木屑為栽培主料的不同猴頭菇菌株菌絲生長(zhǎng)情況比較Fig.1 Comparison of mycelium growth of different Hericium erinaceus strains in the culture medium with eucalyptus sawdust as the main material

圖2為空載工況下列車主被動(dòng)頭車的車輪抬升量，圖中G代表剛性輪，T代表彈性輪。曲線軌道上，剛性輪和彈性輪最大車輪抬升量分別為26.32 mm和22.19 mm，剛性輪已經(jīng)非常接近于脫軌的邊緣。直線軌道上，剛性輪最大車輪抬升量為16.67 mm，而彈性輪為14.28 mm。與剛性輪相比，彈性輪的車輪抬升量在曲線軌道和直線軌道上分別降低了15.69%和14.34%。

10個(gè)參試菌株的污染率均在10 %以下，其中常山猴頭和猴頭6號(hào)菌株的抗雜能力最強(qiáng)，污染率為0；猴頭4903和猴頭4916菌株的抗雜能力最差，污染率最高，達(dá)8 %；猴頭T3、猴頭王、魯猴1號(hào)，3個(gè)菌株的抗雜能力較差，污染率達(dá)6 %。

在菌絲長(zhǎng)勢(shì)方面，野生猴頭、常山猴頭、猴頭6號(hào)、魯猴1號(hào)的菌絲長(zhǎng)勢(shì)均濃密、潔白、粗壯、有力，其余菌株則長(zhǎng)勢(shì)稍差，生長(zhǎng)不夠整齊(圖1)。

2.2 參試猴頭菇菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀比較

參試猴頭菇菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀見(jiàn)表3，從表中可以看出，10個(gè)參試菌株子實(shí)體的顏色均為白色。除常山猴頭、猴頭T3和魯猴1號(hào)3個(gè)菌株的子實(shí)體的刺較短以外，其它菌株的子實(shí)體均為長(zhǎng)或較長(zhǎng)刺。猴頭BJ和猴頭4903為耐高溫菌株，而猴頭T3和猴頭6號(hào)高溫偏高時(shí)呈花椰型；常山猴頭、猴頭4903和猴頭BJ的子實(shí)體個(gè)體較大，其中常山猴頭菌株的單個(gè)平均重量最重，達(dá)88.41 g。而猴頭T3菌株的子實(shí)體個(gè)體最小，其單個(gè)平均重量最輕，僅為58.69 g，其余菌株的個(gè)體均為中等大小。10個(gè)參試菌株從接種到原基形成需24～36 d，其中了出現(xiàn)原基最早的是猴頭4903，接種后僅24 d便開(kāi)始現(xiàn)蕾?，F(xiàn)原基最晚的是野生猴頭，接種后36 d才開(kāi)始現(xiàn)蕾(圖2)。

表3 參試猴頭菇菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀

圖2 不同猴頭菇菌株的子實(shí)體農(nóng)藝性狀比較Fig.2 Comparison of agronomic characters of subentities of different strains of Hericium erinaceus

2.3 參試猴頭菇菌株潮次產(chǎn)量比較

參試猴頭菇菌株前3潮產(chǎn)量結(jié)果見(jiàn)表4。從表中可以看出，在桉木屑培養(yǎng)基中常山猴頭的產(chǎn)量最高，前3潮的平均產(chǎn)量達(dá)276.19 g/袋，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率達(dá)69.05 %，在0.05和0.01水平上，除與猴頭BJ相比差異不顯著外，與其它菌株的產(chǎn)量均存在顯著差異。猴頭BJ產(chǎn)量次之，前3潮平均產(chǎn)量為245.10 g/袋，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率為61.28 %。產(chǎn)量最低的是野生猴頭，前3潮平均產(chǎn)量?jī)H為150.04 g/袋，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率僅為37.51 %。除了與猴頭6號(hào)無(wú)顯著差異外，與其它菌株之間存在顯著或極顯著差異(圖3)。

3 討 論

用桉木屑作為栽培主料，對(duì)10個(gè)猴頭菇菌株進(jìn)行出菇篩選試驗(yàn)，結(jié)果表明不同菌株的菌絲生長(zhǎng)情況、出菇性狀等表現(xiàn)各異。從生物學(xué)轉(zhuǎn)化率方面看，李碧瓊等[7]用雜木屑和棉籽殼為栽培主料篩選猴頭菇的優(yōu)良菌株，篩選出產(chǎn)量最高的菌株生物學(xué)轉(zhuǎn)化率為66.3 %，而本試驗(yàn)中產(chǎn)量最高的菌株的轉(zhuǎn)化率達(dá)69.05 %接近，說(shuō)明桉木屑完全可以作為猴頭菇的栽培主料。

研究結(jié)果表明，常山猴頭菌株的綜合性狀表現(xiàn)最好，產(chǎn)量及生物學(xué)效率最高，且單個(gè)均重最重，污染率最低，菌絲長(zhǎng)勢(shì)良好，長(zhǎng)速僅次于野生猴頭菌株居第2位；其次表現(xiàn)較好的是猴頭BJ菌株，雖然菌絲長(zhǎng)速較慢，居第6位。但產(chǎn)量和生物學(xué)轉(zhuǎn)化率、單個(gè)均重均僅次于常山猴頭菌株居第2位，且兩者的生物學(xué)效率與其它菌株間均存在顯著或極顯著差異，但兩者間差異不顯著。野生猴頭菇菌株的菌絲生長(zhǎng)速度最快，長(zhǎng)勢(shì)和菇型也表現(xiàn)良好，但生物學(xué)轉(zhuǎn)化率最低，產(chǎn)量最低。這種現(xiàn)象一方面表明產(chǎn)量與長(zhǎng)速無(wú)直接關(guān)系，另一方面說(shuō)明野生猴頭菇菌株具有一些潛在的優(yōu)良性狀，然而，可能由于馴化時(shí)間太短，在產(chǎn)量上表現(xiàn)一般，可進(jìn)行深入的馴化篩選； 猴頭4903菌株的菌絲長(zhǎng)速最慢，長(zhǎng)勢(shì)也相對(duì)較弱，產(chǎn)量較低，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率低僅為47.13 %，污染率高，但其出菇和轉(zhuǎn)潮最快，且耐高溫，高溫環(huán)境下其它菌株不能正常出菇甚至出現(xiàn)花椰菜型的畸形菇，但4903菌株仍然可以正常出菇，且菇型表現(xiàn)良好；除以上4個(gè)菌株外，其它6個(gè)菌株表現(xiàn)一般。

表4 參試猴頭菇菌株潮次產(chǎn)量比較

圖3 不同猴頭菇菌株以桉木屑為主料的出菇比較試驗(yàn)Fig.3 Comparison fruiting test of Hericium erinaceus strains in the culture medium with eucalyptus wood chips as the main material

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，常山猴頭和猴頭BJ兩個(gè)菌株在以桉木屑作為栽培主料的出菇比較試驗(yàn)中表現(xiàn)優(yōu)良，可作為廣西猴頭菇的主栽培品種進(jìn)一步在全區(qū)示范推廣；而野生猴頭和猴頭4903兩個(gè)菌株各性狀的優(yōu)缺點(diǎn)并存，且非常明顯，可作為育種材料對(duì)其優(yōu)良性狀進(jìn)一步挖掘利用。

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